解淀粉芽抱杆菌对Caco-2细胞抗氧化功能的影响

研究了1株解淀粉芽孢杆菌对氧化应激状态下Caco-2细胞抗氧化功能的影响.试验分3个组,每组3个重复.对照组I和对照组Ⅱ分别添加终浓度为.和100 μmol/L H202,处理组同时添加100μmol/L H202和1 mL芽孢杆菌菌液(10(8) cfu/mL).细胞培养至12h和48 h时测定培养上清和细胞裂解液中的抗氧化指标.结果表明,100 μmol/L H202处理细胞12h不会造成明显的氧化损伤,48 h则会引起丙二醛(MDA)显著升高(P<0.01);添加解淀粉芽孢杆菌后使细胞的总抗氧化能力、多种抗氧化酶活性、抗超氧阴离子活力和抑制羟自由基能力显著升高(P<0.01),同时降低乳酸脱氢酶(LDH)和MDA含量(P<0.01).表明解淀粉芽孢杆菌能通过提高抗氧化酶活力和清除自由基能力来提高细胞总抗氧化能力,缓解氧化应激所引起的脂质过氧化损伤.     

枯草芽孢杆菌对Caco-2细胞抗氧化功能的影响研究

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌对氧化应激状态下Caco-2细胞抗氧化功能的影响。将Caco-2细胞分为4组,对照Ⅰ(空白对照组,0μmol/L H2O2)和对照Ⅱ(氧化应激组,100μmol/L H2O2),处理Ⅰ和处理Ⅱ分别在对照Ⅱ条件下添加枯草芽孢杆菌B1和B10(终浓度为0.3×108CFU/mL),分别于12、48h测定氧化应激状态下Caco-2细胞上清液和裂解液的抗氧化活性。结果表明:与空白对照组和氧化应激组相比,添加2株枯草芽孢杆菌均极显著提高了Caco-2细胞培养上清液12、48 h时的总抗氧化能力(P<0.01)。其中,菌株B1可显著提高上清液中抗超氧阴离子(O2-)(P<0.01)、超氧化物歧化酶(SOD)(P<0.01)和过氧化氢酶(CAT)(P<0.01)以及48h的过氧化物酶(POD)活性(P<0.01),而菌株B10除提高了Caco-2细胞上清液中抗O2-、SOD和CAT活性(P<0.01)外,还提高了细胞抑制羟自由基(.OH)能力(P<0.01)和POD活性(P<0.01或P<0.05);添加枯草芽孢杆菌组细胞上清液中12 h时的乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量与氧化应激组相比差异不显著(P>0.05),48 h时则均极显著降低(P<0.01)。细胞培养12 h时,氧化应激组细胞裂解液中SOD活性和GSH含量比空白对照组低(P<0.05)而POD活性高(P<0.01),48h时结果与之相反,此时添加枯草芽孢杆菌组均极显著提高了细胞裂解液中POD的活性(P<0.01)。结果提示,2株枯草芽孢杆菌均提高了氧化应激状态下细胞的抗氧化功能。     

鼠李糖乳杆菌对Caco-2细胞抗氧化功能和细胞因子分泌的影响

本研究旨在探明鼠李糖乳杆菌(L rhamnosus)对Caco-2细胞抗氧化和非特异免疫功能的影响.Caco-2 细胞分别用PBS(A组)、E.coli K88(B组)和L.rhamnosus(C组)处理,以及先用L.rhamnosus预处理,再用E.coli K88处理(D组).结果表明,B组细胞上清的T-AOC浓度显著降低(P＜0.01),SOD活力显著提高(P＜0.01),C组与此相反,并且细胞裂解液中的SOD活性显著提高(P＜0.05).B组和C组不同程度地促进APRIL的分泌(P＜0.01),而抑制IL-8的产生(P＜0.01).B组也抑制IL-10的产生,但C组却显著促进其分泌(P＜0.01).与B组相比,D组APRIL显著减少(P＜0.01),但IL-8和IL-10都显著增加(P＜0.05,P＜0.01).结果提示,L.rhamnosus可提高Caco-2细胞的抗氧化能力,减轻炎症反应,具有保护作用和免疫佐剂的效果.     

枯草芽孢杆菌拮抗病原菌对细胞微丝的影响

本研究旨在探讨枯草芽孢杆菌拮抗2种病原菌(鼠伤寒沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌)对人结肠癌细胞Caco-2细胞中微丝的影响。将枯草芽孢杆菌及上述2种病原菌加到Caco-2细胞上,用异硫氰酸荧光素-鬼笔环肽标记细胞微丝,在倒置荧光显微镜下观察细胞微丝的变化;利用Western blotting检测细胞微丝调节蛋白Rac1蛋白的表达变化。结果显示正常Caco-2细胞内微丝呈散在的平行排列;加鼠伤寒沙门氏菌后微丝呈小区域聚集;加产肠毒素大肠杆菌后细胞微丝重排聚集在细胞中央放射状分布或分布紊乱;单独加枯草芽孢杆菌后细胞微丝排列方式变化不大;同时分别加2种病原菌和枯草芽孢杆菌后,大部分的细胞内微丝排列整齐,只是在少部分细胞内存在微丝的聚集。产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌可使细胞微丝调节蛋白Rac1的表达显著上调,而枯草芽孢杆菌则可抑制病原菌对Rac1的影响。本试验证明产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌可影响细胞微丝的表达和分布;而枯草芽孢杆菌及其培养上清液可抑制病原菌的这种破坏作用。     

不同组合芽孢杆菌对鲫鱼抗氧化能力的影响

本文旨在研究不同组合芽孢杆菌对鲫鱼抗氧化能力的影响。将360尾鲫鱼随机分为四组,对照组饲喂基础日粮,试验组I饲喂添加枯草芽孢杆菌的基础日粮,试验组II饲喂添加枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的基础日粮,试验组III饲喂添加枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的基础日粮,3组同样使饲料中芽孢杆菌的含量达1×106CFU/g;饲养45 d。结果显示:3个试验组鲫鱼的肝胰脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、过氧化氢酶(CAT)活力、总超氧化物岐化酶(T-SOD)活力、总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽(GSH)含量均高于对照组,丙二醛(MDA)含量低于对照组。其中试验组II,差异最显著(P0.05),效果最好。本试验发现芽孢杆菌可以提高抗氧化酶活性和非酶抗氧化物质GSH和T-AOC的含量,降低MOD的含量,有利于提高抗氧化能力,减少伤害,提高免疫力,为微生态制剂的开发提供一定的理论基础。     

芽孢杆菌对体外肠上皮细胞黏附和细胞膜完整性的影响

以Caco-2细胞作为体外模型研究芽孢杆菌对细胞黏附、细胞存活率及细胞膜完整性的影响.采用荧光标记法探究芽孢杆菌、大肠杆菌K88和猪霍乱沙门菌对Caco-2细胞的黏附特性,并通过排斥、竞争和置换试验测定其对病原菌黏附的阻断作用.采用台盼蓝染色法测定Caco-2细胞存活率和细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)活性来反映细胞膜的完整性.结果表明:芽孢杆菌对Caco-2细胞的黏附率均低于病原菌、且对病原菌的黏附无阻断作用,大部分芽孢杆菌不会影响细胞存活率及细胞膜的完整性,对细胞无毒.     

芽孢杆菌在大肠杆菌应激下对肉仔鸡免疫和抗氧化功能的影响

芽孢杆菌是益生素的重要组成之一,是一种良好的免疫刺激剂.试验在强毒大肠杆菌应激条件下,研究蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌对28日龄肉仔鸡免疫功能的影响,为益生芽孢杆菌在肉鸡饲料中的应用提供理论依据.     

贝莱斯芽孢杆菌发酵蚯蚓浆对猪抗氧化功能和免疫功能的影响

为探究贝莱斯芽孢杆菌发酵蚯蚓浆对猪生长性能、抗氧化功能及免疫功能的影响,将20头体质量相近的健康育肥猪随机分为4组,每组5头,试验期30 d,空白组K饲喂基础日粮,试验组YD、YZ、YG在基础日粮中分别添加1%、3%、5%的贝莱斯芽孢杆菌发酵蚯蚓浆,对肥育猪进行生产性能、抗氧化指标、血常规及免疫指标检测。结果表明,发酵产物对猪试验前后的生产性能和血常规指标无显著影响(P>0.05);与对照组相比,第30天YD组、YZ组、YG组猪血清丙二醛(MDA)水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化力(T-AOC)水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),YZ组、YG组猪血清IgA和IgG水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结果提示,在育肥猪日粮中添加贝莱斯芽孢杆菌发酵蚯蚓浆可以显著提高试验猪抗氧化功能和免疫功能。     

枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能及其抗氧化和免疫功能的影响

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌(B.subtilis)对罗斯308肉鸡抗氧化能力和免疫性能的影响。试验选用1日龄罗斯308肉鸡216羽,随机分为2组,每组设3个重复。对照组饲喂基础日粮,处理组在基础日粮中添加B.subtilis105CFU/g。饲养试验期为42d。结果表明:与对照组相比,处理组肉鸡日增重提高了12.20%(P0.05),血清与肝脏的总抗氧化能力(P0.05)以及谷胱甘肽过氧化物酶活性(P0.01)显著增加;血清中丙二醛(MDA)、NO及肝脏中MDA水平(P0.05)显著降低。此外,日粮中添加B.subtilis显著提高了肉鸡胸腺指数、法氏囊指数和血清中IgG水平(P0.05),而对脾脏指数及血清中溶菌酶、白介素-2、肿瘤坏死因子-α等指标无显著影响(P0.05)。结果提示,日粮中添加适量B.subtilis可通过提高肉鸡的抗氧化与免疫功能而改善其生长性能。     

12株芽孢杆菌体外抗氧化特性比较研究

为比较12株芽孢杆菌(B1到B12)的抗氧化性能,分别测定其培养上清和无细胞提取物中的抗氧化指标,包括1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除率、羟自由基清除率、还原性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果表明:所有菌株均具有上述抗氧活性,其中在无细胞提取物中DPPH清除率最高的菌株为B7,在培养上清中GSH-Px和SOD酶活性最大的菌株分别为B4和B11。     

枯草芽孢杆菌对轮状病毒感染IPEC-J2细胞相关TLRs mRNA表达的影响

为研究枯草芽孢杆菌(B.subtilis)是否通过激活猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中Toll样受体(TLRs)的表达抑制轮状病毒(RV)的复制,本研究采用RV感染灭活B.subtilis预处理的IPEC-J2细胞,鉴定B.subtilis对RV在细胞中增殖的抑制作用,并检测不同时间点RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞中相关TLRs的表达。结果显示,RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞24 h后,与未处理细胞相比,其病毒的增殖能力显著被抑制。通过荧光定量PCR检测不同处理组细胞TLRs m RNA的表达水平,结果表明RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞在感染早期(1 h和3 h)与其他组相比,TLR2、TLR3、TLR9 m RNA表达均显著增加。本研究表明,灭活的B.subtilis能够抑制RV在IPEC-J2细胞中的增殖,并在病毒感染初期显著提高细胞TLRs m RNA表达,推测可能与调节宿主细胞的先天免疫反应有关。     

枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能和抗氧化力的影响

将300羽1日龄健康振宁雏公鸡随机分成对照组和试验组,每组设3个重复,每个重复50羽。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.75g/kg的枯草芽孢杆菌制剂,活菌数为108CFU/g。试验期为77d,分试验前期(1～35d)和试验后期(36～77d)。结果显示:与对照组相比,日粮中添加枯草芽孢杆菌分别提高前期肉鸡的体质量和日增重,但差异不显著(P0.05),后期肉鸡的体质量和日增重分别提高了6.72%(P0.05)和13.69%(P0.05),全程肉鸡的体质量和日增重分别提高了6.75%(P0.05)和8.22%(P0.05);枯草芽孢杆菌对肉鸡采食量影响不明显(P0.05);料重比在试验前期有所提高,试验后期和全程均呈下降趋势,但无显著差异(P0.05)。从抗氧化指标看,试验组肉鸡血清中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(SOD)、超氧化物歧化酶(GSH-Px)分别比对照组提高了25.75%(P0.05)、20.10%(P0.05)和18.12%(P0.05),丙二醛(MDA)含量有所降低,但差异不显著(P0.05)。结果表明,枯草芽孢杆菌可提高肉鸡的抗氧化能力、减少氧化应激,从而提高肉鸡生长性能。     

枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能和肠黏膜抗氧化及免疫功能的影响

试验旨在研究肉鸡日粮中添加枯草芽孢杆菌对其生长性能及其肠黏膜抗氧化和免疫功能的影响。将600羽1日龄健康振宁雏公鸡随机分成4组,每组设3个重复,每个重复50羽。处理组Ⅰ为对照组,饲喂基础日粮;处理组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别在基础日粮中添加0.25、0.50、0.75 g/kg的枯草芽孢杆菌制剂(活菌数为108 CFU/g)。试验期77 d。结果表明:与对照组相比,处理组Ⅱ和Ⅲ组肉鸡的日增重有所提高但无显著差异,处理组Ⅳ显著提高了6.86%(P<0.05);空肠黏膜中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、维生素C和黄嘌呤氧化酶(XOD)含量显著高于对照组(P<0.05),丙二醛(MDA)明显降低(P<0.05);盲肠和回肠黏膜中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α含量均比对照组极显著提高(P<0.01)。提示肉鸡日粮中,添加适量的枯草芽孢杆菌制剂能改善其肠黏膜的抗氧化和免疫功能,从而提高肉鸡的生长性能。     

干酪乳杆菌对产肠毒素大肠杆菌粘附Caco-2细胞抑制作用的研究

为研究干酪乳杆菌(L.casei)对人结肠癌Caco-2细胞的粘附特点及抑制产肠毒素大肠杆菌K88(ETEC K88)粘附Caco-2细胞的能力,本研究将不同浓度的L.casei和ETEC K88与分化完全的Caco-2细胞共培养2 h和4 h后,采用平板计数法和革兰染色法计算每个细胞上粘附菌的个数,评价L.casei的粘附特点及其抑制ETEC K88对Caco-2细胞的粘附能力,并分析其影响因素。结果表明,L.casei与ETEC K88均可以粘附至Caco-2细胞表面,并且随菌液浓度的升高和培养时间的延长,粘附的数量显著增加(p0.05)。L.casei浓度越高,抑制ETEC K88粘附至细胞表面的能力越强,并与菌液添加顺序有关,但培养时间对其影响不显著(p0.05)。本研究为L.casei抑菌作用机制的研究提供了实验依据。     

枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能、抗氧化功能和肠道形态的影响

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能、抗氧化功能和肠道形态的影响。选取1日龄雄性爱拔益加(AA)肉鸡420只,随机分为4组,每组7个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂基础饲粮,枯草芽孢杆菌组在基础饲粮中添加200 g/t枯草芽孢杆菌,杆菌肽锌组在基础饲粮中添加250 g/t杆菌肽锌,枯草芽孢杆菌+杆菌肽锌组在基础饲粮中添加200 g/t枯草芽孢杆菌和250 g/t杆菌肽锌。试验期42 d。结果表明,与对照组相比,饲粮中添加枯草芽孢杆菌显著提高了22~42日龄肉鸡的平均日增重(ADG)和血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05),显著降低了1~21日龄肉鸡的ADG、平均日采食量(ADFI)及血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和空肠隐窝深度(P<0.05)。饲粮中添加枯草芽孢杆菌和杆菌肽锌对22~42日龄肉鸡的料重比(F/G)、1~42日龄欧洲效益指数和肝脏MDA含量有显著交互作用(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加200 g/t的枯草芽孢杆菌能提高22~42日龄肉鸡的生长性能,在一定程度上改善肉鸡空肠黏膜形态;饲粮中添加200 g/t的枯草芽孢杆菌和250 g/t的杆菌肽锌能够提高肉鸡的生长性能。     

枯草芽孢杆菌B10对饲喂高脂日粮小鼠抗氧化功能的影响

将45只体质量（35±1）g的普通ICR小鼠随机分为对照组（基础日粮）、高脂组（高脂日粮）、处理组（添加0．1％芽孢杆菌B10的高脂日粮）。每组3个重复,每个重复5只。结果显示,高脂日粮组小鼠的试验末期体质量和平均日增重高于对照组和处理组。与对照组相比,高脂组小鼠肠黏膜总抗氧化能力显著降低了28．34％（P〈0．01）;肝脏中TrxR、SOD、GSH—Px和CAT活力分别降低了36．42％（P〈0．05）、22．91％（P〈0．05）、37．34％（P〈0．01）和47．47％（P〈0．01）,血清中抗超氧阴离子、GSH含量、GSH—Px活性分别下降8．206％（P〈0．05）、30．73％（P〈0．05）、47．26％（P〈0．01）。与高脂组相比,处理组肝脏的抗氧化能力显著改善,GSH—Px活力提高了141．35％（P〈0．01）,MDA含量降低了26．85％（P〈0．01）。血清中总抗氧化能力、GSH含量、GSH—Px活力分别提高9．46％（P〈0．05）、28．50％（P〈0．05）、39．95％（P〈0．01）。结果表明,枯草芽孢杆菌B10能够显著提高不同组织中部分抗氧化酶活力,缓解高脂日粮引起的小鼠氧化应激,在肝脏组织中尤为明显。     

地衣芽孢杆菌对肉鸡生长性能、血清抗氧化功能和肠道形态的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同剂量地衣芽孢杆菌对罗氏肉鸡生长性能、血清抗氧化酶清除自由基的能力和肠道形态的影响.选取192只1日龄罗氏肉鸡,随机分为4组,每组4个重复.对照组饲喂基础饲粮,低、中、高剂量组在基础饲粮中添加0.1％地衣芽孢杆菌菌粉(活菌数分别为1.0×109、2.0×109、4.0×109 CFU/mL),...     

枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠抗氧化功能的影响

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠抗氧化功能的影响。将45只体重相近[(35±1)g]的普通ICR小鼠随机分为对照组(基础饲粮)、高脂组(高脂饲粮)、试验组[添加质量分数为0.1%枯草芽孢杆菌B1的高脂饲粮],每组3个重复,每个重复5只,饲养30 d。观察枯草芽孢杆菌B1对高脂饲粮小鼠肠黏膜、肝脏和血清的抗氧化能力、氧化应激状态的影响。结果表明:1)与对照组相比,高脂组小鼠的肠黏膜总抗氧化能力(T-AOC)显著减少了28.34%(P<0.01),肝脏超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和硫氧还蛋白还原酶活性分别显著降低了22.91%(P<0.05)、37.35%(P<0.01)、47.47%(P<0.01)和36.42%(P<0.05);血清还原型谷胱甘肽(GSH)含量、GSH-Px和抗超氧阴离子自由基(O2-.)活性分别显著下降了30.73%(P<0.01)、47.26%(P<0.01)和8.02%(P<0.01);肝脏8-羟基脱氧鸟苷(8-OhdG)含量显著增加了67.87%(P<0.01)。2)与高脂组相比,试验组小鼠的肠黏膜T-AOC显著增加了32.44%(P<0.05),肝脏GSH含量和CAT活性分别显著上升了38.27%(P<0.05)和53.01%(P<0.05);血清T-AOC、GSH含量、GSH-Px和抗O2-.活性分别显著提高了10.72%(P<0.05)、38.01%(P<0.05)、51.98%(P<0.01)和13.45%(P<0.01);肝脏丙二醛、8-OHdG含量和黄嘌呤氧化酶活性分别显著下降了16.01%(P<0.05)、37.52%(P<0.01)和16.25%(P<0.05)。由此可见,高脂饲粮降低了小鼠肠黏膜、肝脏和血清的抗氧化功能;添加枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠的抗氧化功能具有一定的增强作用,并能减少机体的氧化应激状态,较好地保护组织细胞,免受氧化损伤。