辐照甘蔗愈伤组织的诱变效应

本文研究了60_Coγ射线辐照甘蔗愈伤组织的诱变效果。结果表明,辐照甘蔗愈伤组织的再生植株有较大的变异。经过几代选择,已从1340株再生植株中获得2个比较理想的高产高糖株系。试验说明:用60_Coγ射线辐照甘蔗愈伤组织,可作为选育甘蔗良种的方法加以利用。     

EMS 处理甘蔗愈伤组织诱变效应

用甲基磺酸乙酯(EMS)处理组培甘蔗愈伤组织细胞诱变育种结果表明:处理细胞再生植株主要农艺性状:株高、茎径、锤度经 X~2分析明显偏离正常常态分布,较供体和织培苗差异显著。变异大多数朝不利方向发展,少数植株有选种价值。经 R_3代选择,从1536株诱变株中获得2个比较好的高产高糖突变株系。试验说明:EMS 诱变处理甘蔗愈伤组织可作为一种甘蔗育种手段加以利用。其最佳浓度为0.1%处理24小时。     

湿度对甘薯愈伤的影响

为探索湿度对甘薯愈伤的影响,本试验以普薯32号甘薯为原料,人工模拟机械损伤后于25℃、不同相对湿度(RH50%和RH80%)条件下愈伤,通过比较甘薯木质素生成、失重率、呼吸强度、愈伤过程关键酶活性、总酚和类黄酮含量的差异,评价湿度对甘薯愈伤的影响。结果表明,RH80%条件下较RH50%更有利于甘薯愈伤木栓组织的形成,在愈伤4 d时甘薯木质素积累达到最高。与RH50%组相比,RH80%条件处理能显著提高甘薯愈伤组织苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性(P<0.05),提升总酚、类黄酮含量,促进呼吸高峰提前,降低甘薯重量损失。相关性分析表明,RH80%条件下愈伤,甘薯木质素含量与PAL、POD、PPO活性及总酚、类黄酮含量呈显著正相关(P<0.05)。本研究结果为甘薯采后愈伤提供了一定的理论依据。     

旱地甘蔗若干生理特性比较及其与抗旱性的关系

选用Ｆ１７２、Ｆ１３４、选蔗３号、桂糖１１号和粤糖５７／４２３为试验材料，于分蘖期、伸长初期、工艺成熟初期分别测定叶片细胞膜相对透性、ＮＡＤＰ－苹果酸酶活性、转化酶活性、光合色素含量以及叶片Ｎ，Ｋ，Ｃａ，Ｍｇ，Ｍｎ，Ｆｅ含量。结果表明：耐旱能力强的品种如Ｆ１７２，在旱地栽培时能保持较高的酶活性及光合色素含量，叶片细胞膜透性小，不耐旱品种粤糖５７／４２３则有相反的表现。选蔗３号叶片内Ｋ，Ｃａ，Ｍｇ等大量矿质元素含量较高，这可能是通过渗透调节作用影响其抗旱能力。     

几个甘蔗新品种的抗旱性比较研究

以新台糖22号(ROC22)为对照,对台04/32、柳城03/182、柳城06/241、海大28、柳城03/1137、柳城05/137、柳城03/362、柳城05/126共9个甘蔗新品种进行抗旱性比较研究。采取甘蔗+1叶进行测定脯氨酸含量、过氧化物酶(POD)活性、细胞膜透性和可溶性蛋白等生理生化指标进行抗旱性比较研究。综合评结果表明:抗旱性比较强的是柳城03/362、柳城06/241、柳城03/182,抗旱性中等的是柳城03/1137、柳城05/137、柳城05/126,抗旱性比较差的是ROC22、海大28和台04/32。     

甘蔗愈伤组织和胚性细胞团的诱导与分化因素的研究

甘蔗愈伤组织和胚性细胞团的形成与分化,主要受以下因素的影响: 材料生理状态对愈伤组织或胚性细胞团形成的数质有明显差异。夏秋两季取材培养的愈伤组织质量好,诱导频率高;同一季节取材因叶龄和部位不同,诱导频率也有很大差异,以蔗尾梢生长点以上0～5厘米,-1～-4叶龄的外植体要比10厘米以上的同叶龄材料高3倍以上,诱导频率可高达100％。试验表明在N_6和MS培养基上形成的愈伤组织生长较好,色泽鲜艳,不易衰老,增殖速度快,分化频率高;在附加有2,4—D的各种培养基上,都能诱导甘蔗嫩叶产生愈伤组织,在0.5～3毫克/升可诱范围内,愈伤组织的诱导频率,随2,4—D浓度增加而提高,但继代能力表现为负相关的下降趋势,超过4毫克/升时尤其明显。在2～3毫克/升的高浓度2,4—D培养基上形成的愈伤组织质量好,色泽鲜黄,形态结构松散呈颗粒状,生长旺盛,增殖很快,在继代过程中容易产生具有胚性结构的细胞团,这些细胞团的继代和分化能力都较强。而外形结构紧密是淡灰色半透明状的愈伤组织,其继代和分化能力都较差。不同激素配比对愈伤组织或细胞团的分化频率和根芽生长是否协调有明显影响,试验表明以K1毫克/升:NAA0.5毫克/升:IBA0.5毫克/升的配比较为理想,细胞团增殖快,形成的绿苗多,分化频率高达90％以上,而且根芽分化比差小,生长较协调。愈伤组织或细胞团的年龄与分化有明显相关性,其分化频率随年龄增长而降低,并随着继代时间愈长,分化能力也渐趋下降以至不能分化。     

安祖花愈伤组织诱导及其分化的正交试验设计

用正交设计法研究了不同激素处理及不同外植体对安祖花愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,在本试验设计中,外植体是诱导安祖花愈伤组织的主要因素;以茎段为外植体诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA;愈伤组织不定芽诱导的主要因素是6-BA;不定芽诱导分化的最佳培养基为1/2MS+0.5mg/L 2,4-D+1.0mg/L 6-BA。     

低温对诱导小麦未成熟胚愈伤组织出愈率的影响研究

试验研究低温处理对诱导小麦未成熟胚愈伤组织出愈率结果表明 ,6h短时间低温处理可显著提高其出愈率 ,比对照增加 1 4 3倍。随处理时间的延长其出愈率逐渐降低 ,18h后其出愈率又渐增 ,低温处理 30h时其出愈率显著高于对照 ,为对照的 1 4 1倍。     

小桐子愈伤组织的诱导

本文以小桐子的叶片、叶柄、茎段及下胚轴和子叶作为外植体,研究不同外植体类型对愈伤组织诱导的影响,结果表明叶柄的诱导率最高,其次为茎段的诱导率。同时以小桐子的下胚轴作为外植体,研究植物生长调节剂种类及浓度配比对愈伤组织诱导的影响,结果显示6-BA与2,4-D的组合更适宜小桐子愈伤组织的诱导,MS＋6-BA0.5mg/L＋2,4-D0.1mg/L为小桐子愈伤组织诱导的最佳培养基,其愈伤组织诱导率高达96.7%。本研究为小桐子愈伤组织的分化、植株再生及相关的遗传转化研究提供了参考。     

榨菜继代培养愈伤组织及其再生植株的变异性分析

通过分子标记对榨菜愈伤组织及其再生植株的变异性进行了分析。RAPD检测表明:经2、3和5次继代培养的愈伤组织以及经2次继代培养愈伤组织的再生植株的分子标记呈现多态性,变异频率分别为2.04%、1.85%、1.79%和1.56%;流式细胞仪(FCM)分析表明,继代培养后的愈伤组织及其再生植株在染色体倍性上与亲本相比没有发生变化,皆为二倍体(2n=36)。另经2、3和5继代培养只有2次继代培养的愈伤组织分化出了再生植株,且有3.33%的植株与其亲本间存在表型差异。     

pBI121-Lyz-GFP表达载体的构建及其对和田苜蓿愈伤组织的转化

利用分子克隆技术,将GFP基因片段插入到pBI121-Lyz多克隆区,构建了重组表达载体pBI121-Lyz-GFP。经SmaI与BamHI双酶切和PCR验证重组质粒,均能得到约750bp的目的片段,通过进一步测序证明：GFP基因已成功连接到pBI121-Lyz中,且重组质粒连接方向正确。利用冻融法将重组质粒导入农杆菌菌株LBA4404,用叶盘法转化和田苜蓿,筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织,经PCR扩增和荧光显微镜检测证明重组基因已成功转化到和田苜蓿愈伤组织中。     

几个甘蔗新品种的抗旱性和抗寒性比较研究

以G11为对照，通过电导率极值、束缚水／自由水之比、脯氨酸、丙二醛等生理生化指标对来自台湾、美国、日本以及广西自育的7个甘蔗新品种进行抗旱性和抗寒性比较研究。结果表明：T20和T22抗旱性最强，T23、T16、G17、G11抗旱性中等，CP80／1827、NL8抗旱性最弱；G17、T16、T20及对照种G11抗寒性较强，T22抗寒性中等，其它品种抗寒性较弱。     

不同培养条件对瞿麦诱导愈伤组织的影响

试验以瞿麦叶片为材料,通过对其进行不同消毒时间,不同激素配比浓度和不同光照条件处理,探究瞿麦组织培养的最佳培养条件。试验结果表明:酒精浸泡30s、Na Cl O浸泡15min的处理可以极大降低外植体的污染率和褐化率;MS+1.0mg/L6·BA+0.4 mg/L NAA的培养基愈伤组织诱导率最高,为90%;接种后先暗培养25d,然后在光照下进行培养的外植体,其愈伤组织比接种后直接在光照条件下培养的外植体要出现的快且生长状况较好。     

不同激素对微型月季诱导愈伤组织的影响

微型月季应用前景广泛,但因种苗繁殖受限,难以满足大规模生产需要。本试验主要探索诱导微型月季愈伤组织形成的适宜培养基,为进一步研究开发微型月季快繁技术提供数据参考和奠定基础。研究结果表明,以微型月季带腋芽茎段为外植体,在MS+2,4-D 3.0 mg/L+KT 1.0mg/L(p H5.8)中培养(温度25℃,光照1500~2500 Lx)培养基得到的愈伤组织不仅颜色浅黄且比较疏松易于下一步培养;MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基愈伤组织诱导率也高达70%;因此,诱导微型月季愈伤组织形成的适宜培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+KT 0.5 mg/L和MS+NAA0.2 mg/L+6-BA1.0 mg/L。     

柑桔根系对缺铁的生理反应

柑桔在缺铁条件下,幼苗根系分泌H⁺和还原Fe³⁺的能力增加,与植株吸收铁素营养的能力相一致。摘除缺铁失绿的新叶和顶芽,抑制根系分泌H⁺和Fe³⁺还原物;但随着新叶的重新长出,根系分泌H⁺和Fe³⁺还原物的速率逐渐提高。说明缺铁失绿的组织能调控根系分泌H⁺和Fe³⁺还原物。在营养液中加入0.1nmol/L生长素(IAA),能解除因缺少失绿组织对根系分泌H～+产生的抑制作用。此外,在缺铁条件下,吸铁能力较强的酸橙根尖发生膨胀,有利于铁的接触吸收。     

沉水植物对重金属Cu2＋的生物吸附及其生理反应

采用室内培养实验方法,研究了沉水植物轮叶黑藻（Hydilla verticillata）和穗花狐尾藻（Myriophyllum spicatum）在吸收铜离子过程中产生的生理反应。以上两种沉水植物在Cu2＋浓度分别为0、2、4、8、16、32、64mg·L-1的溶液中暴露了24、48、72、96h,结果表明：黑藻对铜的积累量明显高于狐尾藻对铜的积累量,本实验中黑藻对铜的最大积累量为11295．31μgCu·g-1（干重）,而狐尾藻对铜的最大积累量为6861．26μgCu·g-1（于重）;对以上两种植物的叶绿素含量、SOD和POD活性产生胁迫效应的Cu2＋浓度明显不同,表明狐尾藻较黑藻对重金属Cu2＋胁迫具有更高的耐受性。以上研究结果对利用沉水植物去除重金属污染能起到一定的指导和参考作用。     

凤凰山牡丹药用器官的愈伤组织培养

本文采用植物组织培养的方法,在MS培养基中加入不同的植物生长调节剂,以牡丹根韧皮部为材料诱导愈伤组织,并在不同温、光条件下继代培养30d,测定愈伤组织的生长情况和丹皮酚含量。研究结果表明,在MS培养基中加入1.0mgL2,4-D或1.5mgLNAA,愈伤组织的诱导率大于70%;培养基中加入1.0mgL2,4-D和5.0×10-6mgLTDZ、或1.5mgLNAA和5.0×10-3mgLTDZ,并在29℃、黑暗条件下继代培养,可以显著提高牡丹根皮愈伤组织的增长倍数和丹皮酚含量。     

软X射线对柑桔愈伤组织和原生质体的影响

研究了软Ｘ射线对丹西红桔愈伤组织和原生质体的影响。结果表明,辐照１ｈ和１．５ｈ都在不同程度上抑制了愈伤组织的生长,辐照１．５ｈ表现更为明显;原生质体经辐照１．５ｈ后分裂的很少,在培养过程中发生质壁分离,辐射１ｈ的原生质体受抑制的作用不一些。     

山梨醇对栽培稻成熟胚愈伤组织分化的影响

维持良好的愈伤组织状态和提高分化率是栽培稻(Oryza sativa L.)转基因成功的重要因素。本实验研究了培养基中添加山梨醇和添加不同比例的蔗糖与山梨醇对粳型旱稻(Oryza sativa L.ssp.japonica)297和籼型水稻(Oryza sativa L.ssp.indica)9311两品种成熟胚愈伤组织分化的影响,分别比较了愈伤组织诱导、继代和分化阶段添加不同浓度山梨醇和分化阶段不同蔗糖浓度与山梨醇配比对愈伤组织分化率和转基因效率的影响,结果发现,两个品种都以3个阶段分别添加山梨醇10、20和40 g/L即10-20-40的处理获得最高分化率,分别为88.9%和86.1%,比对照(3个阶段都不加山梨醇)提高了45.1%和32.6%。此结果也在旱稻297 Activator(Ac)基因转化中得到验证。此外,不管愈伤组织诱导和继代阶段是否添加山梨醇,分化阶段蔗糖为5.5 g/L和山梨醇为40 g/L的配比都使愈伤组织分化率高达82.7%~95.2%,愈伤组织呈紧实鲜黄,比其他处理有更多的绿芽点。同时该处理还使9311愈伤组织褐化得到抑制。这些结果表明,山梨醇能够使愈伤组织保持良好的状态、抑制籼稻愈伤组织褐化、提高分化率和转基因效率,这一结果对栽培稻乃至其他作物的组织培养和转基因绿苗再生具有一定参考价值。