朱顶红鳞茎组织培养中的抗褐化研究

试验以朱顶红（Hippeastrum rutilum）无菌苗为材料,通过筛选基本培养基、低 pH 水培、添 加不同种类和浓度的凝固剂、不同浓度蔗糖、不同褐化剂来探讨鳞茎组织培养中抑制褐化的有效方法。 结果表明：朱顶兰在 MS 基本培养基中生长状况较好,褐化程度最低;低 pH 水培显著影响朱顶红的生 长与增殖,且不能有效抑制朱顶红鳞茎褐化;以琼脂粉 A 为凝固剂,半固体状态,附加 30 g · L-1 蔗糖的 MS 培养基有利于朱顶红鳞茎的抗褐化和增殖;在继代培养基中添加 1.0 g · L-1 活性炭可有效抗褐化。因 此,朱顶红鳞茎继代过程中适宜的培养条件为：MS+2.0 mg · L-1 6-BA +30 g · L-1 蔗糖 +1.8 g · L-1 琼脂粉 A 或 MS+2.0 mg · L-1 6-BA +30 g · L-1 蔗糖 +6.0 g · L-1 卡拉胶 +1.0 g · L-1 活性炭。     

抗氧化剂和吸附剂促进银杏愈伤组织生长及防止褐化作用研究

探讨了抗氧化剂柠檬酸、抗坏血酸(VC)、植酸(PA)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP),吸附剂活性炭(AC)对银杏愈伤组织继代培养中细胞生长和褐化的影响,结果表明:柠檬酸0.2 g.L-1对银杏继代细胞生长速率促进最大,可达11.354%;15 mg.L-1VC抗褐化效果最好,叶绿素含量可达0.248%。综合细胞生长和抗褐化效果,最佳处理为柠檬酸0.2 g.L-1。     

抑制‘白花油茶’叶片外植体褐化和诱导愈伤组织的研究

以‘白花油茶’Camellia oleosa Rehd叶片作为材料研究愈伤组织诱导过程中降低外植体的褐化现象和提高诱导率的方法。对‘白花油茶’嫩枝弱光培养,用维生素C漂洗外植体,培养基中加入维生素C和活性炭来抑制外植体的褐化现象,对基本培养基种类、激素浓度、琼脂浓度和糖类进行单因素实验和不同组合试验,以外植体的存活率、愈伤组织诱导率及其生长状况为指标,优化了‘白花油茶’叶片愈伤组织诱导的条件。结果表明,水中弱光培养枝条1~2 d,0.3 g·L~(-1)的维生素C溶液漂洗外植体2~3 min,培养基中添加1.0 g·L~(-1)活性炭和0.3 g·L~(-1)维生素C等都可以显著减少外植体的褐化,从而提高外植体的存活率。优化的培养基成分为基本培养基WPM,包含1.0 mg·L~(-1) 6-BA和1.5 mg·L~(-1) 2,4-D,15.0 g·L~(-1)蔗糖和15.0 g·L~(-1)葡萄糖,6.5 g·L~(-1)琼脂,1.0 g·L~(-1)活性炭和0.3 g·L~(-1)维生素C等能够提高外植体的愈伤组织的诱导率,减少‘白花油茶’外植体褐化现象,适当的培养条件能够快速有效地诱导出有活性的愈伤组织,为再生‘白花油茶’植株打下了基础。     

文心兰规模化组培育苗关键技术研究

通过基本培养基(改良MS、改良KC、V&W及自制ZW系列)、植物激素(6-BA、KT、NAA、IBA)、培养条件(香蕉泥、蛋白胨、酵母提取物、糖、活性炭)等关键因子对文心兰组培各阶段影响的试验,探索了文心兰规模化组培育苗的关键技术。结果表明:(1)当6-BA 0.1~2 mg.L-1,NAA 0.1~1.0 mg.L-1时,可诱导拟原球茎形成与增殖;6-BA0.05~0.1 mg.L-1或附加NAA 0.1 mg.L-1就可满足拟原球茎的分化;6-BA 0.01 mg.L-1协同NAA或IBA 0.1mg.L-1处理,诱导生根快而粗壮;(2)添加活性炭1 000 mg.L-1和维生素C 30 mg.L-1对减轻外植体褐化是必要的;添加500~1 000 mg.L-1蛋白胨或酵母提取物可促进诱导拟原球茎;香蕉泥100 g.L-1有助于拟原球茎分化和瓶苗健化;(3)MS高盐类培养基在每个培养阶段都有较高的致畸率,自制中盐ZW培养基,N∶P∶K为3∶1∶2.9,文心兰在其中生长健壮;(4)文心兰在无糖培养基中自养生长基本正常。     

几种丛生竹愈伤组织诱导与防褐变技术研究

利用小佛肚竹、凤尾竹和孝顺竹幼竹的茎尖和带节茎段研究了愈伤组织诱导和控制褐变的方法.试验结果表明:在3种生长调节剂(2,4-D、KT、IBA)的组合中,以2,4-D(2～3 mg·L-1)效果最好,愈伤组织的诱导率最高,大部分外植体都能诱导出愈伤组织,生长良好;2,4-D 2 mg·L-1 KT0.5 mg·L-1能使部分茎段诱导出愈伤组织,而茎尖诱导的愈伤组织水渍化,易褐变;KT 4 mg·L-1能使个别茎段有愈伤组织产生,但易褐化;KT 4 mg·L-1 IBA0.5 mg·L-1能诱导出愈伤组织,但生长缓慢.添加抗氧化剂控制愈伤组织褐变的效果要优于吸附剂,其防褐化能力:抗坏血酸(5 mg·L-1)＞半胱氨酸(100 mg·L-1)＞PVP(1 g·L-1)＞活性炭(1 g·L-1).在培养基中加入抗坏血酸(5 mg·L-1),使小佛肚竹、凤尾竹、孝顺竹的茎尖和茎段的褐变率分别比对照下降了51.3%、43.3%、36.8%和62.7%、42.7%、30.8%.外植体在无菌水或半胱氨酸(100 mg·L-1)溶液中浸泡2～4 h也有利于控制褐化.暗培养有利于愈伤组织生长,对控制褐化也有一定作用.     

香蕉薄切片愈伤组织再生体系的建立研究

以巴西香蕉品种的薄切片为外植体高频地诱导出愈伤组织,并诱导出了不定芽,获得了再生植株。在实验过程中,利用正交实验中筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 4.0 mg.L-1+KT 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1+活性炭200 mg.L-1,诱导率可达100%,愈伤组织增殖的最佳培养基是MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1+活性炭100 mg.L-1,继代3-4次的愈伤组织在6-BA浓度为5.0 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽,继代10次之后愈伤组织在继代培养基上开始出现褐化现象,愈伤组织增殖明显受到抑制,褐化的愈伤组织逐渐死亡。     

蝴蝶兰试管苗继代及生根培养的研究

以蝴蝶兰试管苗为试材进行了继代及生根培养基的研究。通过 2次试验的对比 ,得出结论 :在蝴蝶兰的继代培养中 3号培养基 :MS BA 5mg·L-1 NAA0 .5mg·L-1 活性炭 1 .5g·L-1是最适合的 ,在生根培养中 4号培养基 :MS NAA1mg·L-1 活性炭 1 .5g·L-1是最好的     

史密斯桉组织培养技术研究

本文探讨了史密斯桉组织培养技术。试验表明,经HgCl2消毒后用1%的氯化钙浸洗处理,能有效控制外植体褐化的发生,褐化死亡率仅为12.5%;始芽萌动以及初期继代培养阶段,采用F＋6-BA 0.5 mg.L-1＋IBA 0.3mg.L-1培养基,有利于外植体的不定芽诱导以及初期的继代扩大培养,增殖系数达3.7;在增殖与伸长生长阶段,采用改良H＋6-BA 0.125～0.25 mg.L-1＋IBA 0.25 mg.L-1＋VC 20 mg.L-1＋VB210 mg.L-1培养基,在保证较高增值系数的情况下,有利于芽的伸长生长;以1/3 MS为基本培养基,添加0.25 mg.L-1IBA对史密斯桉的根系诱导较为有效,生根率达37.8%。     

刺五加愈伤组织诱导及褐化抑制

分别以刺五加1年生茎、叶柄和嫩叶为外植体,在附加不同浓度NAA和6-BA组合的WPM培养基上进行愈伤组织初代培养,并对继代培养中出现的褐化进行抑制。结果表明:嫩叶为最佳外植体,在各激素配比中的诱导率均达到最高,其中添加0.5 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的诱导率最高98.2%。在继代培养时,向培养基中添加500 mg/L活性炭,5 d暗培养继代10 d,能有效降低刺五加愈伤组织的褐化。     

牡丹愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以牡丹为材料,研究了不同外植体、激素对愈伤组织诱导和继代增殖的影响,结果表明:①牡丹子叶、胚轴是诱导愈伤组织的最佳外植体;②牡丹子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+Ca2+;③牡丹愈伤组织增殖的最佳培养基为:MS+2,4-D 0.5 mg.L-1+NAA 1.5 mg.L-1+Vc 500 mg.L-1;④在培养基中添加500 mg.L-1Vc或去除Cu2+,具有较好的抗褐化效果。     

牡丹愈伤组织的诱导及愈伤褐化抑制的研究

以凤丹为试验材料,比较不同外植体,不同基本培养基,不同激素组合对愈伤诱导率的影响;结果表明,以子叶和胚轴为外植体,在培养基1/2改良WPM+2,4-D1.0 mg·L-1+6-BA1.0 mg·L-1+水解酪蛋白500mg·L-1+L-谷氨酰胺150 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1的培养基中诱导率最高,可达100%。同时研究了愈伤褐化抑制,结果表明,以1/2改良WPM为最佳基本培养基;PVP和植物凝胶的效果最好,褐化指数分别为31.11%与30.00%;黑暗、低温、较短的继代周期都能不同程度的减缓愈伤褐化。     

3种鸢尾组织培养直接成苗培养基筛选

在仿自然气候条件下,采用培养苗形态指标综合分析的方法,对3种鸢尾组织培养直接成苗的培养基进行筛选。结果表明:最适合黄娃娃和不朽白一次性成苗的培养基为MS+KT 0.5 mg.L-1+IBA 1 mg.L-1+-αNAA 0.6 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1+琼脂粉8 g.L-1+活性碳0.3%,pH 6.7;最适合血石一次性成苗的培养基为MS+KT 0.5 mg.L-1+IBA 1mg.L-1+-αNAA 0.2 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1+琼脂粉8 g.L-1+活性碳0.3%,pH 6.7。     

Contamination and browning in tissue culture of Platanus occidentalis L.

Twigs of 2–3-year-old Platanus occidentalis L. were used as experimental material to find the causes for the contamination and browning in the initial stages of tissue cultures. To compare the degree of browning of explants picked off from different growing seasons, the experimental material was excised from trees on each of the first ten days in January, March, May and July, 2006. The results indicated that the contamination and browning rates of the material cut off in January (14.2% and 30.6%, respectively) and March were somewhat lower than those in July. The pretreatment of soaking the explants in different anti-oxidants and absorbents at the same time could diminish some side effects. The pretreatment of using 10 g·L–1 vitamin C reduced the contamination and brown-ing rate effectively. An orthogonal experiment showed that the optimal factor and level arrangement is 0.5 mg·L–1 BA, 2.0 g·L–1 ac-tive carbon and 1.5 g·L–1 PVP which resulted in a browning rate of only 16.5%. In general, sampling period, physical properties and pretreatment of explants are the main factors responsible for the contamination and browning of material in the initial stages of P. occidentalis tissue cultures.     

火焰卫矛组织培养及植株再生研究

以火焰卫矛成熟胚培养长出的子叶为外植体进行组织培养及植株再生研究,建立了火焰卫矛再生体系,成熟胚培养基为WPM+TDZ 0.5 mg.L-1;子叶愈伤组织诱导和不定芽分化培养基为WPM+6-BA 6 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg.L-1+活性碳0.5 g.L-1。     

宜昌百合的组织培养研究

试验以宜昌百合的鳞茎为外植体,研究宜昌百合组织培养快繁的最佳方法。结果表明:宜昌百合鳞茎的最适诱导培养基为:MS+6-BA 1.0 mg.L-1+NAA 2.0 mg.L-1,添加20%的椰乳和0.5%的活性炭,同时可以有效地防止宜昌百合在培养时产生褐化;较适的生根培养基为:1/2MS+0.6 mg.L-1IBA+0.5%AC。该实验结果为宜昌百合的快速繁殖及工业化生产提供了理论基础和技术支持。     

木荷组织培养技术研究

对木荷外植体取材母株提前1周喷杀虫剂和杀菌剂,外植体污染率明显降低。加入Vc可以减少外植体褐化,并采用全暗培养。选择MS+BA0.5 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+Vc 5mg·L-1作为木荷最佳外植体诱导培养基,MS+BA0.5 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+Vc 5 mg·L-1+B25 mg·L-1为木荷最佳增殖培养基,1/4MS+IBA0.25 mg·L-1作为木荷最佳生根培养基。     

路易斯安娜鸢尾组培和苗期生长规律初步研究

以路易斯安娜鸢尾顶芽为外植体,利用不同激素配比诱导不定芽,定期测量组培苗株高、蓬径、主茎长和叶片数,观察组培苗的染色体数、叶片结构和开花性状等。结果表明:路易斯安娜鸢尾顶芽诱导率最高的培养基为MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1,产生有效生产苗最多的培养基为MS+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.2 mg.L-1,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg.L-1+活性碳0.5 g.L-1。2年生组培苗平均株高达到71.6 cm,平均蓬径达到60.9 cm,叶片维持在6~12片,冬季仍有绿叶。组培苗染色体个数、叶片通气组织、开花性状等均与母株一致,表明路易斯安娜鸢尾组培苗可保持其母株的观赏性状和水生习性,可通过组培快速繁殖大规模生产优质种苗。     

小油桐外植体分化及植株再生影响因素的初步研究

研究发现在MS培养基中添加6-BA 3 mg.L-1+IBA 0.5 mg.L-1的激素对小油桐苗质及外植体分化有明显促进作用。15 d苗龄的小油桐幼苗外植体有较高的分化率。正交实验研究最佳分化激素浓度,发现6-BA+IBA组合对小油桐外植体芽苗诱导效果明显优于6-BA+NAA组合。子叶再生芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 3 mg.L-1+IBA 0.5 mg.L-1,最高诱导率为82.9%;下胚轴再生芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 2 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1诱导率为23.8%。在子叶和下胚轴再生培养基中添加1 mg.L-1的AgNO3能促进小油桐植株再生,并抑制褐化产生。小油桐再生苗最佳生根培养基为WPM培养基。