大豆体细胞胚胎发生系统组织学研究

通过对栽培大豆品种体细胞胚胎发生频率组织学进行研究,了解在农杆菌和卡那霉素存在的条件下,大豆未成熟子叶胚性细胞的发生、分化、发育过程和胚胎发生规律,为大豆未成熟子叶诱导体细胞胚发生高效转化体系提供理论依据。     

高等植物体细胞胚胎发生的研究进展

植物体细胞胚胎发生是一个复杂的发育过程,受到多种内、外因素的影响与调节,研究体细胞胚胎发生诱导与调节是一个基本的理论问题。通过介绍高等植物体细胞胚胎发生过程中生长素对胚胎发育的影响以及体胚发生中的基因表达,展示体胚发生已经成为研究植物胚胎发生发育的一条重要途径。同时体胚发生中分离到的基因研究为理解细胞分化与发育,形态发生与建成以及植物合子胚的发育提供了重要参考。     

紫花苜蓿体细胞胚胎发生及其细胞组织学观察

通过对紫花苜蓿（ Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）外植体愈伤组织进行诱导及对体细胞胚胎发生过程的组织学观察,得出以下结果：１）外植体在 Ｍ Ｓ附加１．０ｍ ｇ／ Ｌ６－ Ｂ Ａ 和１０．０ｍ ｇ／ Ｌ Ｉ Ａ Ａ 的培养基上愈伤组织生长良好,而愈伤组织转入 Ｍ Ｓ附加５００ｍ ｇ／ Ｌ水解酪蛋白的培养基中胚状体的分化能力较强。２）紫花苜蓿的体细胞胚大多是由单个具胚状体发生能力的胚性细胞发育而来,发育过程与合子胚的发育过程相似。在早期原胚发育过程中胚体外一直包围有厚壁。原胚时期和子叶胚时期出现两次淀粉积累现象。     

爬山虎体细胞胚的发生及组织学研究

该文以爬山虎子叶的叶片和叶柄为试验材料 ,对爬山虎体细胞胚发生进行了研究 .结果表明 :爬山虎子叶在MS附加 6 BA 0 3mg L和NAA 0 1mg L培养基上或 1/ 2MS附加 6 BA 0 5mg L和NAA 0 1mg L培养基上都能诱导产生体细胞胚 ,子叶叶柄在 1/ 2MS附加 6 BA 0 3mg L的培养基上也产生了体细胞胚 .胚性愈伤组织转移到无植物生长调节剂的MS或B5培养基上均能发育成正常植株 .组织学观察表明 ,爬山虎体细胞胚的形成经历了球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚等几个阶段 ,逐渐发育成正常植株 ,这与合子胚的发育途径相似 .体细胞胚在发育过程中出现了连体胚、芽端畸形胚、超度含水状胚等几种畸形胚     

大豆体细胞胚胎发生影响因子的研究

 采用正交试验设计方法研究了MS微量元素、2 ,4 D、萘乙酸、脯氨酸和腺嘌呤的浓度对 5种基因型大豆未成熟子叶愈伤形成和体细胞胚胎发生的影响。结果表明 ,MS微量元素的浓度对出愈率和胚胎发生率均有显著的作用 ;在MS培养基中附加 2 ,4 D、萘乙酸、脯氨酸和腺嘌呤对愈伤的形成有明显的促进作用。微量元素浓度对大豆体细胞胚胎发生有明显的影响 ,各基因型间在胚胎发生时所需激素种类和浓度不尽相同     

可可子叶外植体的体细胞胚胎发生

本文就可可子叶、叶片及茎段体细胞胚状体离体诱导及发育的标准化技术和培养基进行了初步探讨。以将近成熟种子的子叶为外植体,在附加0．5mgINAA＋0．5mg／lBAP＋椰子水（15％）的MS培养上可以最大程度地诱导出能大量发生体细胞胚胎的愈伤组织。至于叶片及茎段,则仅能诱导出非胚性愈伤组织。分离并培养于相同成分液体培养基上（使用滤纸桥）的体细胞胚状体会发育出一条明显的在其顶端带有一冠状覆盖物的主根。当转移到含0．5mg／l玉米素＋0.1mg／l激动素的培养基上其主根开始伸长时。该冠状覆盖物则脱落。     

日本落叶松体细胞胚胎发生的研究

[目的]对日本落叶松体细胞胚胎发生进行系统研究。[方法]以日本落叶松5个品种的未成熟合子胚为外植体,研究基本培养基、品种基因型、杂交系和纯系品种对日本落叶松愈伤组织诱导的影响,以及ABA对体细胞胚成熟及植株再生的影响。[结果]通过对日本落叶松胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚的成熟培养获得再生植株。2种基本培养基中,DCR对胚性愈伤组织的诱导频率最高,达54.0%;落叶松品种之间的愈伤组织诱导率有差异,以杂交品种愈伤组织的诱导率最高,达71.4%,优于纯系的落叶松品种（27.3%～50.0%）;在体细胞胚的成熟培养过程中,ABA可严重影响体细胞胚的发育,并影响到其以后的萌发能力和植株再生。[结论]杂交品系更有利于胚性愈伤组织诱导,ABA对日本落叶松体细胞胚胎发育起重要作用。     

大豆原生质体愈伤组织的体细胞胚胎发生(英文)

在改良MS培养基上从5个大豆品种成熟种子来源的幼苗未展开叶片上诱导出愈伤组织,利用2个月月龄的这些愈伤组织在摇床上建立了细胞悬浮培养系,细胞悬浮培养系每1至2周转培1次,并用于原生质体分离,转培后3到5天的细胞经酶解后原生质体的产量最高,纯化后的原生质体用3种方法进行培养,即液体培养法、琼脂包埋法和琼脂底层法,在琼脂底层法中,培养皿底层先浇上无甘露醇的琼脂培养基,而原生质体则悬浮在2到4毫升含0.45 mol甘露醇的培养基中,3种方法以琼脂底层法最佳,原生质体在培养后2到3天内能见到第1次细胞分裂,在适当的条件下1周内高达80％的原生质体发生分裂,置板频率一般在40％到60％之间,5个供试品种中4个的原生质体愈伤组织在固体和液体培养中出现体细胞胚胎发生,在液体培养条件下得到了大量子叶和胚根发育良好的体细胞胚,但由于这些胚未进一步萌发,故未能得到完整的再生植株。     

籼稻离体胚培养中体细胞胚胎发生的研究

成熟稻胚在含2,4-D的MS培养基上产生胚性愈伤组织以及在胚性愈伤组织表面形成许多瘤状突起的原胚状体,组织学研究表明在诱导培养的不同时期,胚性愈伤组织的细胞分裂产生单核胚性细胞、2细胞、4细胞、多细胞及球形胚。随后移到不含2,4-D的分化培养基上培养,胚性愈伤组织产生与水稻合子胚结构相似的成熟体细胞胚状体。结果表明:2,4-D是胚性愈伤组织诱导的必要激素,但抑制球形胚的发育成熟。不同激素处理结果:Br明显抑制植株再生。研究生理生化指标结果表明:在愈伤组织生长分化过程中不同激素处理Br抑制氧化物酶活性;体细胞胚状体在形成、成熟阶段,酶活性及酶带相应增强和增多;当胚状体萌发形成植株时,酶活性及酶带相应下降和减少,随诱导培养时间延长植株再生率降低。     

药用植物平贝母(Fitillaria ussurieusis)组织培养的研究——Ⅱ.体细胞胚胎发生及细胞学观察

以平贝母(Fritillaria ussuriebsis Maxim)鳞茎为试材,建立了高频率体细胞胚胎发生体系。愈伤组织诱导培养基为 MN+2.5ppm 2,4—D+1.0ppmKT+5.0ppmA+500.0ppmcH,体细胞胚诱导培养基为 N6+1.0ppmKT十5.0ppmA。细胞学观察表明,体细胞胚起源于单个胚性细胞,经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚而形成具有苗端和根端的成熟胚。体细胞胚发生于胚性愈伤组织表面、外植体表层及胚性愈伤组织内部。     

大豆体细胞胚胎发生系统组织学研究(英文)

Soybean somatic cell could induce the development of embryoid which was similar to embryo morphologically and structurally. Somatic embryogenesis system of soybean was used to conduct genetic transformation of soybean because of its several advantages such as higher transformational efficiency,beetter synchronism and fewer plant chimeras among transgenic plants. After infected with agrobacterium tumefaciens,the initiation,differentiation and development of young cotyledon embryogenic cell of soybean which was cultured on selective culture medium with kanamycin were investigated through histological study. The result showed that somatic embryo was differentiated in non-bud differentiation way. The embryogenic cells were differentiated from epidermis of explant or cells in 1 layer or 2 layers,with the division of embryogenic cells and degradation and disorganization of surrounding cells,the embryogenic cells would form embryoid with analogous suspensor structure.Later,globular embryoid would extrude from epidermis then developed into heart-shape embryo.The experiment was expected to provide theoretical reference for the construction of high transformational system of using plant somatic embryogenesis induced by young cotyledon of soybean.     

Histological Study on Soybean Somatic Embryogenesis

Soybean somatic cell could induce the development of embryoid which was similar to embryo morphologically and structurally. Somatic embryogenesis system of soybean was used to conduct genetic transformation of soybean because of its several advantages such as higher transformational efficiency,beetter synchronism and fewer plant chimeras among transgenic plants. After infected with agrobacterium tumefaciens,the initiation,differentiation and development of young cotyledon embryogenic cell of soybean which was cultured on selective culture medium with kanamycin were investigated through histological study. The result showed that somatic embryo was differentiated in non-bud differentiation way. The embryogenic cells were differentiated from epidermis of explant or cells in 1 layer or 2 layers,with the division of embryogenic cells and degradation and disorganization of surrounding cells,the embryogenic cells would form embryoid with analogous suspensor structure.Later,globular embryoid would extrude from epidermis then developed into heart-shape embryo.The experiment was expected to provide theoretical reference for the construction of high transformational system of using plant somatic embryogenesis induced by young cotyledon of soybean.     

Histological Study on Soybean Somatic Embryogenesis

Soybean somatic cell could induce the development of embryoid which was similar to embryo morphologically and structurally. Somatic embryo-genesis system of soybean was used to conduct genetic transformation of soybean because of its several advantages such as higher transformational efficiency, beetter synchronism and fewer plant chimeras among transgenic plants. After infected with agrobacterium tumefaciens,the initiation, differentiation and de-velopment of young cotyledon embryogenic cell of soybean which was cultured on selective culture medium with kanamycin were investigated through histo-logical study. The resuh showed that somatic embryo was differentiated in non-bud differentiation way. The embryogenic coils were differentiated from epi-dermis of explant or cells in 1 layer or 2 layers, with the division of embryogenic cells and degradation and disorganization of surrounding cells, the embryo-genic cells would form embryoid with analogous suspensor structure, later, globular embryoid would extrude from epidermis then developed into heart-shape embryo. The experiment was expected to provide theoretical reference for the construction of high transformational system of using plant somatic embryogene-sis induced by young cotyledon of soybean.     

油棕体细胞胚的诱导和次生胚的增殖研究

油棕体细胞胚的诱导是油棕体胚发生技术体系中最关键的培养过程,通过建立油棕次生胚增殖培养方法可有效地实现油棕组培苗快速的增殖繁育。本研究通过系统的对油棕体细胞胚发生及次生胚再生途径中若干影响因子的比较研究,建立油棕体细胞胚和次生胚再生体系。结果表明:油棕体细胞胚再生体系在不同基因型的油棕品种内诱导率存在较大差别,其中植物外源激素二氯苯氧乙酸(2,4-D)对油棕胚诱导效果较好;油棕次生胚增殖在不同基因型的油棕品种内差异不显著,木本植物培养基(WPM)在油棕次生胚增殖中培养效果最好。     

毛泡桐体细胞胚胎发生及植株再生研究

以毛泡桐(Paulowniatomentosa)无菌苗叶片和茎段为外植体,在附加NAA0.3mg·L-1或2,4 D0.3mg·L-1与6 BA5～20mg·L-1植物生长调节物质组合的MS培养基上进行体细胞胚胎发生及植株再生的研究.结果表明,毛泡桐叶片和茎段在不同植物生长调节物质组合的12种培养基上愈伤组织诱导率可达100%,但在2,4 D与6 BA植物生长调节物质组合的MS培养基上,叶片和茎段胚性愈伤组织诱导率为0,而在MS+NAA0.3mg·L-1+6 BA17mg·L-1培养基上,叶片和茎段的胚性愈伤组织诱导率分别达到88.3%和46.7%.胚性愈伤组织在该培养基上可发育为成熟的体细胞胚胎,进而成为完整植株.     

烟草体细胞胚胎诱导发生初报

 以烤烟云烟85叶片诱导的愈伤组织为材料,通过不同的激素浓度配比进行试验,研究其体细胞胚胎的发生能力。结果表明:云烟85体胚诱导的最高频率为61.1%,其体细胞胚发生的最佳激素配比是NAA 2.0 mg/L,BA 0.2 mg/L,从诱导出的体胚中观察到体胚几个主要发育阶段。     

植物体胚成苗培养的研究进展

体胚成苗方式是愈伤组织成苗的主要方式之一，综述了植物体胚成苗培养中的主要问题及解决的方法。     

龙眼体细胞胚发生中期的蛋白质组学研究

 【目的】了解龙眼体细胞胚发生中期（球形胚至子叶形胚）蛋白质组的变化,为进一步阐明植物体细胞胚发生的机制提供依据。【方法】进行龙眼体细胞胚发生中期的同步化调控,采用双向电泳和质谱对龙眼体细胞胚发生中期的蛋白质组变化进行分析。【结果】龙眼体细胞胚发生中期表达蛋白的种类随着体细胞胚的发育逐渐减少,但在鱼雷形胚阶段其种类数量有所回升,且增加的蛋白分子质量小于66.0 kD,pI主要集中在5.00—7.00。成功鉴定了35个差异蛋白,发现了多个与体细胞胚发生密切相关的蛋白。1/2以上的蛋白与代谢途径有关,多个蛋白与氧化胁迫有关。RAN2 和 GTPase ObgE在龙眼体细胞胚发生中期发生了活跃的变化。【结论】随着体细胞胚的发育,细胞不断分化,体细胞胚中表达的蛋白种类减少。氧化胁迫相关蛋白、RAN2 和 GTPase ObgE与龙眼体细胞胚发生的调控有关。