嗜酸乳杆菌高密度发酵研究进展

嗜酸乳杆菌是一种具有重要商业价值的益生菌,嗜酸乳杆菌的高密度发酵技术对于该菌的工业化生产有重要应用价值。本文对嗜酸乳杆菌的营养需求、冷冻环境适应策略以及高密度发酵探索等方面的研究进行综述,旨在为嗜酸乳杆菌的生产提供理论参考。     

应用RT-PCR技术定量检测发酵物料中嗜酸乳杆菌菌体数

根据发酵物料中常见乳酸菌种的16S rRNA基因序列设计嗜酸乳杆菌的种属特异性引物,以单独嗜酸乳杆菌发酵样品中的细菌基因组DNA为模板,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术对发酵物料中嗜酸乳杆菌进行定量检测。通过RT-PCR图谱分析,准确地检测出样品中嗜酸乳杆菌菌体数的含量为15亿CFU/g。结果表明:该方法能够对发酵物料中嗜酸乳杆菌菌体数进行准确定量,是较好的检测发酵物料中嗜酸乳杆菌菌体数的方法。     

嗜酸乳杆菌的研究进展

嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)具有调节肠道菌群、抑制病原菌、增强免疫力、降低血脂等多种益生功效,其在食品、医药、饲料等领域中的应用日益增多。文章根据国内外嗜酸乳杆菌的研究与利用情况,对嗜酸乳杆菌的生物学特性、安全性、益生功能与应用等方面进行论述,并在此基础上探讨了嗜酸乳杆菌的发展前景。     

植酸酶基因在嗜酸乳杆菌中的表达

植酸酶和嗜酸乳杆菌是重要的饲料添加剂,为获得产植酸酶的嗜酸乳杆菌菌株,克隆了大肠杆菌植酸酶基因,构建表达载体并转化嗜酸乳杆菌,对重组嗜酸乳杆菌进行发酵产酶并测定所产酶液的酶学性质,进一步研究重组嗜酸乳杆菌的耐酸性及植酸酶液的抗蛋白酶活性。结果表明：重组嗜酸乳杆菌发酵24 h植酸酶活性为984 U/mL,植酸酶的最适催化pH为4.5,最适催化温度为60℃。重组嗜酸乳杆菌在pH 2.0～4.5有一定的耐酸性,在pH 2.0条件下2 h的存活率为76.4%。植酸酶液用胃蛋白酶处理160 min后植酸酶液剩余85%的相对酶活,用胰蛋白酶处理160 min后剩余29%的相对酶活。上述研究结果为重组嗜酸乳杆菌后续应用研究提供了重要依据。     

表达鼠源GLP-2重组嗜酸乳杆菌的构建

嗜酸乳杆菌是一种常见的肠道益生菌。嗜酸乳杆菌及其代谢产物可以调节肠道菌群的比例,增强肠道屏障功能,调节相关免疫反应,从而维护肠道内环境稳态,在一定程度上达到了治疗IBD的作用。胰高血糖素样肽-2(glucagon-like peptide-2,GLP-2)作为一种肠道营养因子,可促进肠粘膜增殖、抑制其凋亡,从而改善肠屏障功能,促进肠吸收功能恢复。本研究将GLP-2与嗜酸乳杆菌信号肽重组连接pMG36e质粒上,通过电转化转入感受态嗜酸乳杆菌中,构成重组嗜酸乳杆菌。结果表明,重组pMG36e质粒中扩增GLP-2基因与基因库公布的一致,通过Western blot检测到重组嗜酸乳杆菌上清液中有GLP-2蛋白表达。重组嗜酸乳杆菌的成功构建,使GLP-2与嗜酸乳杆菌对IBD发挥了双重疗效,为后续研究重组益生菌应用于临床治疗IBD奠定了基础。     

嗜酸乳杆菌抗氧化活性评价及其对小鼠单核巨噬细胞氧化应激的影响

本试验旨在评价嗜酸乳杆菌抗氧化活性及其对小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7细胞)氧化应激的影响。制备嗜酸乳杆菌培养物上清液、完整细胞和胞内提取物,比较其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、羟自由基和亚油酸的清除能力。筛选抗氧化能力较强的嗜酸乳杆菌培养物上清液,设置4个剂量(5、25、50和125μL)分别作用于RAW 264.7细胞,对照组加入1 mL完全培养液,检测RAW 264.7细胞中一氧化氮(NO)含量、活性氧(ROS)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并进一步探究其对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞氧化应激的保护作用。结果表明:1)嗜酸乳杆菌培养物上清液的DPPH、羟自由基和亚油酸清除率均显著高于嗜酸乳杆菌培养物完整细胞和胞内提取物(P0.05)。2)将嗜酸乳杆菌培养物上清液作用于正常RAW 264.7细胞,与对照组相比,25、50和125μL嗜酸乳杆菌培养物上清液显著提高了RAW 264.7细胞的细胞活力(P0.05),125μL嗜酸乳杆菌培养物上清液显著提高了RAW 264.7细胞中NO含量(P0.05),25和50μL嗜酸乳杆菌培养物上清液显著提高了RAW 264.7细胞中SOD活性(P0.05),125μL嗜酸乳杆菌培养物上清液显著降低了RAW 264.7细胞中GSH-Px活性(P0.05)。3)将嗜酸乳杆菌培养物上清液作用于LPS诱导的RAW 264.7细胞,与LPS组相比,25、125μL嗜酸乳杆菌培养物上清液显著降低了LPS诱导的RAW 264.7细胞中NO含量(P0.05),25μL嗜酸乳杆菌培养物上清液显著提高了LPS诱导的RAW 264.7细胞中SOD和GSH-Px活性(P0.05)。综上所述,嗜酸乳杆菌培养物各组分均具有DPPH、羟自由基和亚油酸清除能力,作为其中抗氧化活性较好的嗜酸乳杆菌培养物上清液可调节LPS诱导引起的RAW 264.7细胞氧化应激。     

发酵乳中嗜酸乳杆菌的计数法

介绍了一种发酵乳中嗜酸乳杆菌的计数法.M17培养基能计数嗜热链球菌,MRS培养基能计数所有的乳杆菌,在MRS培养基中加入克林霉素,嗜酸乳杆菌能够生长,保加利亚乳杆菌不能生长,用这种方法可以专一地测出嗜酸乳杆菌数.     

基于PFGE技术的酸乳中乳酸菌的基因分型

采用选择性培养基分离酸乳中的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌,并利用生理生化和糖发酵实验结合16S rDNA同源性分析对分离所得菌株进行鉴定,获得保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分离菌株。利用脉冲场凝胶电泳（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）分别对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分离株进行基因分型。结果表明：所检测的酸乳样品中均含有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌;仅有2 种酸乳的嗜热链球菌为同一菌株,其余酸乳中的保加利亚乳杆菌及嗜热链球菌均为不同菌株。PFGE可以对保加利亚乳杆菌和嗜热     

热灭活嗜酸乳杆菌培养物在饲料工业中的应用

此文介绍了嗜酸乳杆菌生物学特性、热灭活嗜酸乳杆菌培养物作为饲料添加剂的优势及其在饲料工业中的应用研究进展。     

蒙脱石载嗜酸乳杆菌对断奶仔猪生长性能、肠道菌群和黏膜完整性的影响

文章旨在研究日粮添加嗜酸乳杆菌、蒙脱石、嗜酸乳杆菌和蒙脱石混合物及蒙脱石载嗜酸乳杆菌对断奶仔猪生长性能、肠道菌群、空肠形态和黏膜完整性的影响。试验选择500头(21±1)d、体重一致[(6.02±0.89)kg]的健康杜洛克×长白×大白断奶仔猪,随机分为5组,每组5个重复,每个重复20头猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,处理1~4组分别在基础日粮中添加8×10~8 cfu/kg嗜酸乳杆菌、1.5 g/kg蒙脱石、8×10~8 cfu/kg嗜酸乳杆菌和1.5 g/kg蒙脱石混合物、1.5 g/kg蒙脱石载8×10~8 cfu/kg嗜酸乳杆菌。试验共进行21 d。结果显示:与嗜酸乳杆菌相比,蒙脱石载嗜酸乳杆菌中嗜酸乳杆菌在胃酸中80 min和肠液中240 min的存活率显著提高(P0.05)。与对照组相比,处理1~4组显著提高了断奶仔猪平均日增重(P0.05)。与对照组相比,处理4组显著提高了空肠和结肠乳酸杆菌数量(P0.05);处理4组较处理2组显著提高了空肠和结肠乳酸杆菌数量(P0.05)。与对照组、处理1组和处理2组相比,处理4组显著提高了断奶仔猪空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(P0.05)。与对照组相比,处理4组显著提高了结肠的跨膜电阻(P0.05),同时显著降低了空肠和结肠葡萄糖荧光素4 k Da蛋白的含量(P0.05)。结果表明:在本试验条件下,日粮添加蒙脱石载嗜酸乳杆菌较单独添加蒙脱石、嗜酸乳杆菌或蒙脱石和嗜酸乳杆菌的混合物提高了断奶仔猪的生长性能、空肠形态和肠道屏障的完整性。