蓝莓FLC基因电子克隆及生物信息学分析

FLC基因是MADS-box家族的重要成员,参与调控植物花芽分化和开花过程,在春化作用中起关键作用。以拟南芥(Arabidopsis thaliana)FLC基因编码蛋白序列(Gen Bank登录号:AAN04056.1)为探针,运用电子克隆方法获得蓝莓(Vaccinium spp.)FLC基因(VaFLC)c DNA序列,对其编码蛋白的理化性质、亲/疏水性、保守序列、二级结构和三级结构特点进行预测分析,并对该编码蛋白与其他植物中FLC基因编码蛋白的相似性和进化关系进行研究。结果表明,蓝莓FLC基因c DNA全长1 303 bp,包含1个长度为753 bp的完整开放阅读框,编码250个氨基酸,编码蛋白含有MEF2-like MADS域、I域、K域和C域4个明显的结构域,属于MADS-box基因家族中植物Ⅱ型(MIKC型)基因。在蓝莓FLC基因编码VaFLC蛋白与其他植物FLC蛋白的相似性方面,除与大豆的相似性为38%之外,与其他植物的相似性均高于40%,其中与葡萄、柑橘具有47%的相似性,与拟南芥、可可树、白桦具有46%的相似性,与梨树具有45%的相似性。蓝莓VaFLC蛋白在系统进化树上归为木本植物分支,并形成独立的小分支,推测该基因及其编码蛋白在植物FLC进化过程中保留了部分原始特征。     

猪瘟病毒E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点整合载体的构建

 【目的】构建猪瘟病毒主要抗原E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点转化载体，为百脉根叶绿体的转化及用叶绿体生产动物可直接食用疫苗奠定基础。【方法】通过用BLAST、DNAMAN等分子生物学分析软件对百脉根叶绿体基因组序列进行分析选定同源重组片段，采用PCR、分子克隆技术进行载体构建和鉴定。【结果】在百脉根叶绿体基因组中选择合适的外源基因整合位点，设计引物用PCR扩增叶绿体同源片段，将同源片段克隆后，构建百脉根特异的叶绿体转化载体；构建的百脉根叶绿体定点转化载体pAKE2以扩增的1.35 kb psbA 和1.5 kb trnK两段相邻叶绿体 DNA为定点整合外源基因的同源重组片段，包含以叶绿体基因特异强启动子Prrn和终止子TpsbA为调控序列的E2基因表达盒和aadA壮观霉素抗性基因表达盒。【结论】经PCR和酶切验证，所构建的转化载体符合预期设计。叶绿体转化及后续工作目前正在进行之中。     

金柑LEAFY同源基因克隆与全序列分析

通过PCR扩增，从融安金柑基因组DNA中克隆出一条2361bp的DNA片段，该DNA克隆含有1个2081bp的LEAFY同源基因全长序列（FcLFY）。金柑LEAFY同源基因包含2个内含子和3个外显子，编码398个氨基酸。比对结果表明，金柑LEAFY同源基因与甜橙、枳的LEAFY同源基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性均为98％。该研究为今后从分子水平上研究金柑开花调控机理打下了坚实的基础。     

大白菜BrAGL19的克隆及表达分析

利用同源克隆的方法在大白菜中获得一条与拟南芥AGL19基因高度同源的cDNA序列,命名为BrAGL19.序列分析结果表明,该基因cDNA序列全长660 bp,编码219个氨基酸,与拟南芥AGL19 cDNA编码氨基酸的一致性为85.07%,具有典型的MADS-box和K-box结构.实时荧光定量PCR检测结果表明,在春化过程中,BrAGL19的表达量不断增加;在抽薹开花过程中,18 h的长日照较12 h的短日照更能促进该基因的表达.由此推测,BrAGL19基因对大白菜抽薹开花的调控起着重要作用.     

萝卜抽薹开花相关基因的研究进展

通过构建萝卜抽薹开花相关基因的cDNA文库,获取大量的EST序列,并与十字花科模式植物拟南芥、白菜等进行比较基因组学研究,研究结果显示:萝卜与拟南芥、白菜等植物基因组具有很高的同源性,控制抽薹开花的相关基因在不同物种中具有保守性。拟南芥抽薹研究表明,抽薹开花过程受多基因控制,具有多种调控途径。抽薹开花是一个复杂的过程,其中FLC、FT、LFY等基因处于关键位置。目前这些关键基因在萝卜EST序列中已经发现了同源片段,并进行了一些基因克隆,结合萝卜基因组测序的完成,未来萝卜抽薹研究将进入基因功能验证和全基因组调控模式研究之中。     

BraSDG8 RNA干扰载体的构建及其对拟南芥的遗传转化

BraSDG8是拟南芥SDG8的同源基因,同属于ASH1家族,与开花调控相关。在克隆得到BraSDG8全长cDNA序列的基础上,选取其中一段保守片段构建RNA干扰载体pFGC5941-BraSDG8,并通过农杆菌GV3101介导,浸花法转化野生型拟南芥Col,获得了1株稳定遗传的转基因植株,为进一步研究BraSDG8的基因功能奠定了良好的基础。     

高羊茅春化基因RNAi表达载体的构建

[目的]用RNAi干扰技术沉默高羊茅FaVRN1。[方法]将拟南芥内肌动蛋白含子（145bp）插入到表达载体pBI121已构建能形成发夹的中间载体。设计带有限制性内切酶位点的特异性引物,扩增高羊茅春化基因351bp长的外显子靶标序列,限制性酶切后以正向和反向插入到RNA干扰中间载体内含子两端,构建带发夹结构的RNA干扰表达载体。[结果]双酶切结果表明内含子（145bp）已成功连入表达载体。PCR和酶切验证证实目的基因（351bp）已连入中间表达载体。[结论]该研究为培育RNAi转基因开花抑制型高羊茅新品种奠定基础。     

小麦抗白粉病基因Pm4b的RGA分析

为克隆抗性基因和发展Pm4b的特异分子标记奠定基础。利用10对RGA引物,对小麦抗白粉病基因的一些载体品种(系)进行扩增,将引物对R11F/R11R从Pm4b基因的载体品种VPM中扩增出的稳定多态性条带回收、克隆、测序,获得与小麦Pm4b基因的相关抗病基因的同源片段,并对不同的小麦Pm基因载体品系作了检测分析。该稳定多态性条带全长1 321 bp。序列分析表明这个片段属于RGA类序列。用该标记检测小麦不同Pm基因载体品种(系),发现该多态性片段仅出现在Pm4b基因载体品种中。该研究可为分离抗性基因和发展Pm4b的特异分子标记奠定基础。     

木本果树开花相关基因的研究进展

开花是植物从营养生长向生殖生长的转变过程。拟南芥中存在多条调控开花时间的信号途径如光周期途径、春化途径、赤霉素途径和自动途径等。与草本植物相比,木本植物成花调控研究进展较缓慢。本文综述了木本果树中开花综合基因,即综合不同成花调控途径信号的关键基因,如CO、FLC、SVP、FT、LFY、TFL、AP1、SOC1等的研究进展,以期为进一步探索木本植物成花的分子调控机制提供参考。     

遮阴对栽培川贝母光合特性的影响

为了对川贝母（Fritillaria cirrhosa D．Don）的规范化栽培提供试验数据支撑,以青藏高原高山草甸区川贝母树儿子和灯笼花期植株为材料,设置荫蔽度、棚高和遮阴网颜色3个因素,每个因素设置3个水平,以不遮阴为对照,研究不同遮阴条件对川贝母光合特性的影响。结果表明：遮阴导致川贝母树儿子期植株净光合速率降低,光量子效率和蒸腾速率提高,对其气孔导度、胞间二氧化碳浓度的影响不显著;遮阴显著降低了川贝母灯笼花期植株净光合速率、胞间二氧化碳浓度、蒸腾速率,显著增强了其植株的气孔导度和光量子效率。结论：遮阴不利于青藏高原地区栽培3年生及以上的川贝母植株净光合速率的提高及其物质的积累,不采用遮阴措施栽培川贝母更经济和环保。     

红鳞蒲桃开花物候特性研究

对红鳞蒲桃种群的花期物候，单株、单个花序、单花的开花动态进行系统的观测研究，详细测量并记录花部构件，同时调查红鳞蒲桃种群的同花期植物。结果表明：红鳞蒲桃种群的花期物候为8月1日～9月15日（2008年），持续时间46d；单株花期从23d到33d不等；单花序的花期情况较为复杂，总体表现为花朵数越多，该花序持续时间越长，但也有个别情况出现，在开花中期花序持续时间长，开花后期花序持续时间最短，开花前期花序持续时间介于两者之间；在整个种群花期内单花平均开花时间约5．2d，种群开花前期单花的持续时间约为6．7d，开花中期约为4．7d，末花期约为4．3d，种群开花前期单花的持续时间显著大于种群中后期的持续时间。红鳞蒲桃种群的同花期植物隶属于16科21属22种。     

观赏植物花期调控分子生物学研究进展

花期对于植物的观赏价值具有重要影响,调控观赏植物的花期对其开发推广和园林应用具有关键性的作用.近些年来,随着观赏植物成花分子机理的研究的逐渐深入,揭示了观赏植物花期调控的多条新途径,主要包括光周期途径、温度途径、赤霉素途径、.自主途径和年龄途径等.本综述系统总结了观赏植物不同开花期调控途径的成花机理及其分子生物学研究进展,并对观赏植物花期调控的技术做了基础分析和展望,以期为植物花期调控的理论研究和技术方案提供参考.     

苗期温光因子对烟草现蕾时间及激素的影响

用人工气候箱控制温光条件研究温光因子对烟草早花的影响,目的是确定烟草早花对温光因子影响的强度范围,温光因子处理持续时间的长短,以探索烤烟开花与温光条件关系的规律,为防止早花提供依据.结果表明:不同处理时间对烟草早花影响显著;低温对烤烟现蕾时间及赤霉素含量影响显著,协同作用影响更大;短日照是烟草早花影响因子之一.     

桃花花期预报的探讨

该文根据北京市植物园１９８３～１９９２年气温资料和同期桃花开花的物候期，通过回归分析，发现桃花的始花期与花前２～３旬的平均旬积温和平均最高旬积温关系非常密切，相关系数分别为－０．９６２０，－０．９４０５，－０．９２３１，－０．９１６２，在此基础上建立了桃花花期预报模式，经检验拟合率较高。在实际应用中应根据该年３月份温度情况，采用相应的花期预报模式进行开花始期的计算。     

氯酸钾对龙眼催花的效应及其机理研究综述

综述氯酸钾对龙眼催花的效应及其机理,概述应用氯酸钾促使龙眼开花应注意及存在的问题。     

赤霉素对‘粉红朱砂’和‘虎丘晚粉’开花的影响

该文研究了不同时间、不同浓度的赤霉素处理对‘粉红朱砂’和‘虎丘晚粉’两种露地栽培梅花的花期、展叶期和落蕾率的影响。结果表明 :2 0 0 0mg L的赤霉素在 10月底至 11月处理可使‘粉红朱砂’的花期提前约 1个月 ,展叶期提前 30～ 4 1d ,但同时出现明显的落蕾效应 ;而 1月处理使‘虎丘晚粉’始花期、末花期均延迟 ,同时开花量增加 ,且观赏期延长。研究还探讨了温度作为梅花开花的主导因子对试验研究的影响。     

桂林市桂花花期与气候因子关系研究

[目的]探索桂林市桂花开花规律,预测桂花开花时间,为桂林市开展桂花观赏旅游活动提供技术支持.[方法]采用普查和定期观测法,记录1999～2011年桂林市桂花的花期,并与桂林市历年的温度、湿度、降水量、雨日、日照时数等气象资料进行比较分析,采用逐步回归法,建立桂花花期预测模型.[结果]桂花花期与部分月份的降水、水气压、日照、雨日、最高温度等相关度较高,其中9月最高温度（x1）对桂林市桂花花期的影响最大,其次是2月中旬雨日（x2）.采用逐步回归方法,得到桂林市桂花花期的预报模型为：y=-166.680＋6.546x1-0.184x2.利用模型对桂花开花日期进行回测,结果表明预测模型的准确率较高,误差在0～3 d.[结论]花前温度是影响桂林市桂花开花的关键因素,花前温度越高,开花越晚;在桂花春梢萌发时期,雨日对桂花花期影响也显著,雨日越多,越有利于春梢生长,桂花开花越早.     

玉米制种花期不遇的原因及预测方法研究

根据玉米杂交制种科研实践,研究分析了玉米杂交制种过程中诸多导致花期不遇的因素,针对性的提出了叶龄预测法和可见叶、未出叶、幼雄穗分化观察法等花期预测的有效方法,对指导玉米制种生产和提高制种量具有重要意义。