仔猪腹泻源大肠杆菌贵州株K88菌毛研究

通过玻片凝集试验、抗Ｄ－甘露糖微量血凝试验（ＭＲＭＨ）、离体细胞粘附试验、菌体蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫印迹、质粒ＤＮ民泳等。分析了仔猪腹泻源大砀杆菌贵州株（４０９－１１）所产Ｋ８８菌毛的血凝谱、对肠上皮细胞粘附特性、菌毛蛋白单位分子量,并对其Ｋ８８基因进行了初步定位。结果表明：其所产Ｋ８８菌毛的血凝谱能凝集豚鼠和允许红细胞;能介导细菌粘会于仔猪离体肠上皮细胞,这种粘附作用     

仔猪腹泻源大肠杆菌贵州株K_(88)菌毛研究

通过玻片凝集试验、抗D_甘露糖微量血凝试验 (MRMH)、离体细胞粘附试验、菌体蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS_PAGE)和免疫印迹、质粒DNA提取及电泳等 ,分析了仔猪腹泻源大肠杆菌贵州株 (4 0 9_11)所产K88菌毛的血凝谱、对肠上皮细胞粘附特性、菌毛蛋白亚单位分子量 ,并对其K88基因进行了初步定位。结果表明 :其所产K88菌毛的血凝谱能凝集豚鼠和鸡红细胞 ;能介导细菌粘附于仔猪离体肠上皮细胞 ,这种粘附作用能被特异的K88抗血清阻断 ;菌毛蛋白亚单位的分子量为2 35 0 0Da;K88基因位于一个分子量为 85kb(5 4× 10 6Da)的大质粒上。当菌株于 18℃生长时 ,其K88菌毛不能表达     

K88-K99-987P-F41菌毛疫苗预防仔猪黄痢的效果

仔猪大肠杆菌性腹泻是养猪场最常见的疾病之一。而肠毒源性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病菌之一。其致病的前提是必须能在小肠黏膜定居、繁殖并产生肠毒素。ETEC表面能产生菌毛粘附因子使得这些菌株很容易吸附并定居于小肠黏     

产肠毒素大肠杆菌K88ab/K88ad菌毛操纵子fae全基因的克隆、表达及生物学活性的初步研究

为研究K88ab/K88ad菌毛对细胞的黏附作用,本研究分别以产肠毒素E.coli (ETEC) K88ab C83901株和K88ad C83903株基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增这两种K88菌毛操纵子fae基因(均约7.9 kb).将其分别克隆于表达质粒pBR322中构建pBR-K88ab和pBR-K88ad重组质粒,并将其分别转化至不含任何菌毛的E.coli SE5000株中.该重组菌能够分别与鼠抗K88菌毛阳性血清和抗K88菌毛单克隆抗体(MAb)产生凝集反应;在电镜下观察到重组菌表面大量表达K88菌毛.采用热抽提法提取其体外表达的K88ab和K88ad菌毛,SDS-PAGE电泳检测结果显示,菌毛蛋白的分子量约为26 ku.玻板凝集试验和western blot结果表明:重组表达的K88ab及K88ad菌毛与K88+参考株菌毛均能够被抗K88菌毛阳性血清和MAb识别.以猪小肠上皮细胞系IPEC-J2为模型进行黏附和黏附抑制试验,结果表明表达K88菌毛的重组菌及K88+参考株均能够黏附于IPEC-J2上皮细胞表面;而且阳性血清和MAb能够有效抑制重组菌或K88+参考株对猪小肠上皮细胞系的黏附结合.     

检测K88~+肠毒素性大肠杆菌PCR方法的建立

以K8 8菌毛结构基因保守序列为靶序列 ,设计合成了一对可扩增长 2 0 1bp的目的片段的引物 ,成功地建立了检测肠毒素性大肠杆菌(ETEC)K88菌毛基因的PCR方法。进行了PCR方法的特异性试验和敏感性试验。对K99+ ,F41 + ,987p+ 参考菌株和鼠伤寒沙门氏杆菌 ,链球菌 ,金黄色葡萄球菌和猪肺疫巴氏杆菌的检测结果均为阴性 ;该检测方法的敏感度可达 1 0个细菌。用此方法对 1 0株腹泻仔猪粪便分离物进行检测 ,结果有 2株阳性 ;与血清学检测的结果一致。结果表明此方法特异性和敏感性都很高 ,可用于临床K88+ 肠毒素性大肠杆菌病的快速诊断和流行病学调查     

肠毒性大肠杆菌(ETEC)蛋黄抗体防治仔猪腹泻病试验

肠毒性大肠杆菌(ETEC)蛋黄抗体是将K88、K99、987P和HRV的大肠杆菌抗原免疫产蛋母鸡后,使血清产生相应抗体,产蛋母鸡又以产蛋方式将含有抗大肠杆菌K88、K99、987P和HRV的高效价血清免疫球蛋白(IgG)有效地转移到蛋黄中,即免疫球蛋白,简称IgY,再采用理化方法从高免鸡蛋中提取纯化IgY,即肠毒性大肠杆菌蛋黄抗体粉.     

抗仔猪腹泻产肠毒素大肠杆菌疫苗的研究进展

仔猪腹泻(piglet diarrhea)是国内外养猪业面临的一大难题,每年因此造成的经济损失十分巨大。导致仔猪腹泻的主要致病菌是产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC),其致病过程依赖黏附素和肠毒素的共同作用。随着研究手段的创新,国内外学者在研制ETEC疫苗方面已取得了突破性进展。作者介绍了ETEC的致病特点,并对各类ETEC疫苗的研究进展作一综述。     

仔猪大肠杆菌K88ac-ST1-LTB三价基因工程灭活苗Ⅲ.实验室生产与检验

由产肠毒素性大肠杆菌引起的新生仔猪黄、白痢 ,在我国乃至世界许多国家的广大养猪地区流行十分严重 ,有较高的发病率和死亡率 ,即使是病愈存活的仔猪 ,其生长发育和生产性能也会受到严重的影响 ,给养猪业造成了巨大的经济损失。仔猪黄、白痢的药物治疗不但价格昂贵、费工费力 ,而且效果不好 ;更因致病菌的抗药菌株日趋增多 ,用药往往无效 ,因而免疫预防是控制这类疫病的最佳选择[1,2 ] 。我们在原来从事ＳＴ1-ＬＴＢ 双价基因工程灭活苗的基础上[3～ 6] ,进一步利用基因工程技术将大肠杆菌菌毛Ｋ88ａｃ抗原基因与肠毒素ＳＴ1和ＬＴＢ 基因…     

鸡卵黄抗体在防治仔猪大肠杆菌性腹泻中的应用

仔猪大肠杆菌性腹泻病的致病过程主要与产肠毒素型大肠杆菌菌毛介导的粘附作用和产肠毒素密切相关，用禽菌毛抗原免疫产蛋母鸡制备卵黄抗体，在初生仔猪和断奶仔猪的人工感染实验中，口服卵黄抗体能降低腹泻程度和仔猪的死亡率；在商业性猪场的实验表明，卵黄抗体能降低提前断奶仔猪的腹泻发生率，并且有利于仔猪的增重，鸡卵黄抗体是仔猪大肠杆菌性腹泻病的一种新的防治方法，本文就国内外鸡卵黄抗体防治仔猪大肠杆菌腹泻的研究概况作了简要介绍。     

仔猪腹泻的原因及防治

1断奶仔猪腹泻的原因 1．1致病性大肠杆菌引起的腹泻 大肠杆菌通过菌毛、黏附素（细菌表面头发样结构）黏附或定居在肠上皮细胞,并产生肠毒素,使水和电解液大量流入肠内,从而引起腹泻。     

断奶仔猪腹泻综合防治

1断奶仔猪腹泻预防 1.1强化疫苗接种为控制断奶仔猪腹泻,可根据猪场实际情况,对母猪进行免疫接种。可用猪传染性胃肠炎弱毒苗、猪轮状病毒弱毒苗、猪流行性腹泻灭活苗等,在初产母猪产前30d及15d各接种一次;经产母猪产前15d注射一次大肠杆菌K88、K99,987P,     

预防仔猪大肠杆菌性腹泻卵黄抗体的研究进展

仔猪大肠杆菌性腹泻病的致病机理主要与产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)菌毛介导的粘附作用和肠毒素的产生与释放密切相关。通过特异性免疫生产的鸡卵黄抗体,是预防仔猪大肠杆菌性腹泻病的一种新的方法;而且能有效降低仔猪的腹泻发生率,并提高仔猪的增重。文中综述了国内外用鸡卵黄抗体防治仔猪大肠杆菌腹泻的研究进展,讨论了现阶段鸡卵黄抗体存在的不足,并提出基因工程技术在卵黄抗体研制开发中的应用前景。     

哺乳仔猪大肠杆菌性腹泻的防治

由大肠杆菌引起的仔猪腹泻会导致机体水分和电解质大量丧失而导致机体衰弱,甚至死亡,其发病机理复杂,危害性大,是困扰养猪生产、影响养猪经济效益的棘手问题之一. 1 病因①环境因素:气候多变、阴雨潮湿、饲养密集、通风不良等因素,都可引起仔猪产生应激.②病原因素:主要是产毒型大肠杆菌,由于吸附在粘膜表面进行繁殖并产生毒素,引起小肠分泌液体,导致腹泻.③仔猪自身因素:初生仔猪胃腺发育尚不完善,分泌胃酸机能很弱,胃内缺乏游离盐酸,唾液和胃蛋白酶的分泌不足,抑制细菌繁殖的能力较弱,在此期间大肠杆菌极易在胃中增殖并进入肠道而引起发病.     

表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白工程菌株的免疫原性研究

已构建的能表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白的工程菌株BL21（DE3）（pXKST3LT5)及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原，免疫小鼠，结果免疫小鼠至少能抵抗2MLD的大肠杆菌强毒株C83902（K88ac,ST^ ,L^ )的攻击，用提取的包涵体免疫家兔后，采集的血清能够中和天然ST1的毒性，这表明构建的工程菌株BL21（DE3）（pXKST3LT5)可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。     

鸡卵黄抗体在防治仔猪大肠杆菌性腹泻中的应用

仔猪大肠杆菌性腹泻主要是由产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)引起的仔猪的一种常见病,严重影响养猪业的发展。目前对该病的防治除加强综合性预防措施以外,生产上多采用ETEC的多价疫苗和基因工程苗免疫母猪,提高初乳中的抗体水平,以防治哺乳仔猪产肠毒素大肠杆菌性腹泻。然而母乳中的抗体     

新生仔猪大肠杆菌性腹泻的防治

(一)分类新生仔猪腹泻:0～7日龄;仔猪腹泻:7日龄到断奶;断奶后腹泻。(二)流行病学病原为肠毒素性大肠杆菌,如果产床、母猪皮肤感染肠毒素性大肠杆菌,仔猪容易发生腹泻。母猪的初乳中缺乏抑制肠毒素性大肠杆菌的特异抗体,会导致仔猪腹泻。一般3胎以内母猪多见。仔猪未吃到初乳或仔弱、母猪乳头不足或产后感染等,可发生腹泻。     

仔猪常见腹泻的病因及其防治方法

在养猪业中,仔猪腹泻是最严重的仔猪疾病之一,也是引起仔猪死亡的主要原因。长期以来仔猪腹泻引起仔猪成活率降低已引起人们的高度重视,其中,仔猪以大肠杆菌性和病毒性引起的黄痢、白痢、丙型魏氏梭菌引起的红痢以及冠状病毒引起的传染性胃肠炎或流行性腹泻较为常见。     

仔猪腹泻的综合防治措施

1疫苗预防 妊娠母猪于产前20～30天,每头猪后海穴注射猪传染性胃肠炎-猪流行性腹泻二联灭活疫苗4毫升,新生仔猪通过吃初乳获得被动免疫,可预防病毒性腹泻。妊娠母猪于产前40天和15天各肌肉注射仔猪大肠杆菌K88、K99、987P三价灭活疫苗1次,