三穗鸭组织中的重金属含量分布与安全性评价

为了解三穗鸭各组织中重金属蓄积与分布差异,了解三穗鸭中积累的重金属是否在人体的正常摄入中存在潜在危害,对三穗鸭的组织器官鸭胸肉、鸭腿肉、鸭肝、鸭心、鸭胗、鸭肠、鸭脚、鸭骨中重金属镉、铅、铜、砷的含量进行测定,采用数据处理软件分析三穗鸭组织内重金属含量水平及其分布特征,采用单因子污染指数法、内梅罗污染综合指数法和国家标准对各个组织进行安全性评价。结果表明：铜在鸭心中的含量最高,为7．0259 mg/kg;铅和砷在鸭脚中的含量最高,分别为0．4877 mg/kg 和0．2313 mg/kg;镉在鸭肝中的含量最高,为0．1565 mg/kg。通过与国家标准规定的范围比较表明,三穗鸭组织中各重金属含量均在国家限量范围内,其中,重金属铅比其他重金属综合污染指数高,但是污染程度均属于安全范围之内。     

石岐鸽不同部位营养成分分析及评价

为评价鸽肉品质,对石岐鸽不同部位(胸肉、腿肉和翅膀肉)的基础营养成分和氨基酸成分进行分析。通过氨基酸分析仪对不同部位氨基酸进行测定。结果表明,水分、灰分和蛋白质在3个部位中的含量差异不显著,脂肪在3个部位中的含量差异显著(P0.05)。氨基酸种类丰富,在3个部位中均检出17种氨基酸。精氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、酪氨酸、谷氨酸等的含量在胸肉和腿肉之间差异显著(P0.05),在胸肉与和翅膀肉、腿肉与翅膀肉之间差异均不显著;丝氨酸、缬氨酸、蛋氨酸和脯氨酸等的含量在3个部位中的含量差异均不显著;亮氨酸和苯丙氨酸的含量在胸肉与腿肉、胸肉与翅膀肉之间差异均显著(P0.05);组氨酸的含量在3个部位中差异显著(P0.05)。鲜味类中氨基酸含量在胸肉与腿肉之间差异显著(P0.05),在腿肉与翅膀肉之间差异不显著。因此选择胸肉和翅膀肉进行深加工可以提高鲜味。甜味类氨基酸在3个部位差异不显著。与人体必需氨基酸模式谱比对后发现,各部位的蛋白质接近理想蛋白质的要求,且无限制性氨基酸。石岐鸽氨基酸含量丰富,可以满足人体对蛋白质的需求。     

环丙沙星在鸡蛋中的残留消除规律

用高效液相色谱法检测鸡蛋中环丙沙星的残留量。鸡蛋经乙腈溶液提取,提取液真空干燥后用流动相溶解。以0.015mol·L-1四丁基溴化铵/乙腈(体积比为94/6)作流动相,用SymmetryC18柱(5μm,3.9mm×150mm),在激发波长280nm、发射波长455nm处用荧光检测器检测。结果表明:环丙沙星以0.05、0.50和1.00mg·kg-1分别添加到空白鸡蛋样品中,测得的鸡蛋样品中环丙沙星回收率分别为(82.2±6.8)%、(84.5±5.9)%和8(7.9±4.7)%,相对标准差均低于8.3%。用该法测定的鸡蛋中环丙沙星最低检测限为0.01mg·kg-1。各试验组产蛋鸡给药剂量分别按体重10.0、20.0mg·kg-1内服环丙沙星水溶液,每天给药1次,连续5d,鸡蛋中环丙沙星残留量逐渐增大,服药5d后停药,鸡蛋中环丙沙星残留消除缓慢,休药8-9d时鸡蛋中环丙沙星残留量低于0.03mg·kg-1,休药9-10d时鸡蛋中环丙沙星残留量均低于最低检测限;且随着环丙沙星给药剂量的增大,环丙沙星在鸡蛋中的残留量也相应增大。     

高效液相色谱法测定石岐乳鸽中氟喹诺酮类药物残留

研究了石岐乳鸽中环丙沙星、达氟沙星、沙拉沙星和恩诺沙星4种氟喹诺酮类药物残留量的高效液相色谱测定方法。采用磷酸缓冲液提取,水饱和正己烷除脂,C_(18)固相萃取小柱净化分离,LC-FLD检测器检测。结果表明,氟喹诺酮类药在15 min内获得良好的分离,线性相关系数r2为0.999 5~0.999 6,检测限可达0.02 mg/kg,回收率范围为74.2%~93.2%。该方法净化效果良好,操作简便。     

不同加热温度对三穗鸭肉品质的影响

以三穗鸭胸肉和腿肉为原料,对不同温度处理的鸭胸肉和腿肉的色泽、保水性、蒸煮损失、剪切力、质构和微观结构的变化情况进行研究.结果显示:不同部位间色泽变化不大,而保水性、蒸煮损失、剪切力、质构指标等存在显著差异;相同部位随加热温度的不同L*值与a*值显著呈正相关,保水性与蒸煮损失呈负相关.随加热温度升高三穗鸭肉保水性降低,蒸煮损失逐渐升高,剪切力在70℃时降至最低后显著升高.相同处理间不同部位的质构变化差异显著.加热使三穗鸭肉肌束膜溶解,温度上升对溶解效果影响显著,70℃以上加热使三穗鸭肉机械强度降低,肉质变软.     

山东地方鸭与北方鸭的产肉性能及肉质特性研究

将山东地方品种微山麻鸭（Ⅰ组）、文登黑鸭（Ⅱ组）以及北京鸭（Ⅲ组）分别饲养120d屠宰，测定各组胴体的产肉率和肉品品质。结果表明：鸭种是影响产肉力的主要因素，而胸肉、腿肉的物理特性、化学成分和肌纤维结构决定鸭肉的食用价值；Ⅰ、Ⅱ组与Ⅲ组肉鸭相比，胴体重较轻，胸腿肉比例低，肉嫩度较差，但胴体脂肪较少，肉色略深，系水力高，蛋白质和肌间脂肪丰富；胸肉与腿肉相比，胸肉较重，且二者在pH值、嫩度、组织结构等方面存在明显差异。研究结果分析表明：山东地方鸭种与肉用型北京鸭相比，其产肉性能较低，但肉质却较好，因此，地方鸭种用北京鸭进行杂交改良，将会优势互补，有助于肉用性能的综合利用。     

不同方法测定牛奶中环丙沙星的残留

采用微生物法、酶联免疫法、高效液相色谱法同时测定鲜奶中环丙沙星的残留,结果表明:微生物法适合牛奶收储时抗菌药物残留的初筛;酶联免疫法能够较精确地测定奶中环丙沙星的残留,但其费用昂贵,高效液相法适合质监部门和大型企业应用。     

高效毛细管电泳法测定鸡蛋中环丙沙星的研究

[目的]建立高效毛细管电泳测定鸡蛋中环丙沙星含量的方法。[方法]通过对电泳缓冲液类型、离子浓度和pH值、样品溶剂种类、分离电压、分离温度和冲洗程序等电泳条件进行考察,确立测定鸡蛋中环丙沙星的高效毛细管电泳法,并测定电泳参数对检测结果的影响。[结果]在检测波长为277 nm时,最佳电泳条件为:电泳缓冲液为30 mmol/LNa2B4O7-10 mmol/LKH2PO4溶液(pH值8.53),未涂层石英毛细管(50μm×47 cm,有效长度38.5 cm)为分离通道,分离电压为18 kV。在鸡蛋中对环丙沙星的检测结果显示,在最佳电泳条件下,环丙沙星在11 min内实现基线分离,在0.25～80.00μg/ml浓度范围内其浓度和峰面积呈良好的线性关系(R2=0.999 2),平均加标回收率为101.48%,平均RSD为2.466 4%(n=5)。[结论]该方法快速简便、灵敏度高、重现性好,可用于鸡蛋中环丙沙星含量的测定。     

液质联用法同时测定猪粪便中１６种（氟）喹诺酮类药物残留

为检测猪粪便中氟喹诺酮类药物残留,建立了高效液相色谱-串联质谱方法,可同时测定猪粪便中环丙沙星、诺氟沙星等16种氟喹诺酮类药物的残留量.样品经50%硝酸镁-4%氨水混合溶液提取,过HLB固相萃取小柱净化,HPLC-MS/MS多反应监测模式下进行定性及定量分析,16种氟喹诺酮类药物在40～200 ng·mL-1浓度范围内呈现良好线性关系,西诺沙星和沙拉沙星检出限为0.005μg·g-1,其他FQs药物检出限均为0.002μg·g-1.添加浓度为0.05、0.5、1.0μg·g-1时,方法平均回收率为51.4%～109.3%,RSD小于20%.该方法前处理简单、快速、灵敏、准确,仅使用少量有机试剂,检测成本低,对环境危害小.     

浙江省主要野鸭品种(系)生产性能及肉质性状比较分析

对70日龄斑嘴野鸭(Ⅰ组)、野生绿头野鸭×绍兴鸭(Ⅱ组)、西湖野鸭(Ⅲ组)以及野生绿头野鸭×西湖野鸭(Ⅳ组)进行屠宰试验,并测定各组的若干肉质指标.结果表明鸭种是影响产肉力的主要因素,胸肉和腿肉的物理特性决定鸭肉的食用价值;4组野鸭相比,Ⅱ组全净膛重最轻,胸腿肉比例高,胸肉最大,肉色最深,肉嫩度最好;Ⅰ组、Ⅲ组肉用性能和肉质次之,Ⅳ组最差.     

高温堆肥对鸡粪中氟喹诺酮类抗生素的去除

由于抗生素不能被完全吸收而大部分随禽畜粪便进入环境将严重威胁生态环境及人类健康,探讨了高温堆肥去除鸡粪中氟喹诺酮类(Fluoroquinolones,FQs)抗生素(诺氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、恩诺沙星、沙拉沙星)的可行性以及接种外源耐高温菌对去除FQs的影响。结果表明:高温堆肥可去除鸡粪中48.4%~77.1%的FQs,且FQs的降解在堆肥初期(0~14 d)较快;堆肥中FQs的降解可用一级动力学方程进行拟合,降解速率与鸡粪中FQs的初始浓度正相关;接种外源耐高温菌种后FQs的去除率为60.3%~76.4%,比未接种时提高了3.3%~7.2%,且诺氟沙星和洛美沙星的去除率显著提高。鉴于高温堆肥未能实现畜禽粪便中残留FQs的高效去除(90%以上),因此还有待于堆肥过程和外源添加菌种的进一步优化研究。     

罗非鱼竖鳞病病原菌的分离鉴定及药敏试验

[目的]对广西南宁市邕江(石埠段)网箱养殖患竖鳞病的罗非鱼进行病原菌分离鉴定及药敏试验,为有效防控罗非鱼竖鳞病提供参考依据.[方法]用常规方法从患病濒死罗非鱼的腹水、肝脏、心脏及脑等组织中分离病原菌,然后通过人工感染试验、氧化酶试验及API 20NE生化鉴定系统进行鉴定,并采用K-B药敏纸片扩散法进行药敏试验.[结果]从患竖鳞病的罗非鱼中分离出4株病原菌NNSB1、NNSB2、NNSB3和NNSB4,其中NNSB1和NNSB4为温和气单胞菌,NNSB2和NNSB3为嗜水气单胞菌.4株病原菌对复达欣、菌必治、氟哌酸、恩诺沙星、环丙沙星、先锋必、特治星、氟苯尼考、盐酸沙拉沙星和复方磺胺嘧啶等20种药物高度敏感,对青霉素G和氨苄青霉素不敏感.[结论]广西南宁市邕江(石埠段)网箱养殖罗非鱼的竖鳞病是由嗜水气单胞菌与温和气单胞菌共同感染引起,可选用复达欣、菌必治、氟哌酸、恩诺沙星、环丙沙星、先锋必、特治星、氟苯尼考、盐酸沙拉沙星和复方磺胺嘧啶等20种药物进行防治,若同时在网箱内吊挂三氯异氰脲酸片,其效果更佳.     

Studies on Preparation and Characteristics of Monoclonal Antibodies Against Enrofloxacin and Cross-Reactivity of Related Fluoroquinolones

An ester activation method was employed to couple enrofloxacin(ENFX) to the carrier proteins BSA and OVA. The conjugates ENFX-BSA and ENFX-OVA were identified with an UV spectrophotometer and amino acid automation analysis instrument, and resulted in conjugates with 48 ENFX molecules per carrier molecule(BSA). Splenocytes from mice immunized with ENFX-BSA were fused with SP2/0 myeloma cells and hybridomas secreting antibodies against enrofloxacin were selected and cloned. Two stable monoclonal antibodies, 2C5, 5D5 of the subclass IgG2a, were isolated. Using antibody 5D5, an indirect competitive inhibition enzyme-linked immunosorbent assay (Ci-ELISA) was developed for the quantitative detection of enrofloxacin and its metabolites. The IC50 of the standard curve was 21.67 ng mL-1 and the limit of detection for enrofloxacin was 0.13 ng mL-1. This method was sensitive and had a linear range from 0.13 to 10 000 ngmL-1 (r=-0.9782). Monoclonal antibody 5D5 exhibited high relative affinity to enrofloxacin, and the cross-reactivities with ciprofloxacin,marbofloxacin, sarafloxacin and danorfloxacin were 110.8, 27.40, 71.05 and 37.41%,respectively. Three non-fluoroquinolones of cefadroxil, chloramphenicol, sulfadimethoxine were tested and there was no cross-reaction between them.     

恩诺沙星单克隆抗体的制备及鉴定

 碳二亚胺法合成了2种恩诺沙星(enrofloxacin,ENFX)人工抗原ENFX-BSA和ENFX-OVA,用紫外扫描和分析载体蛋白的氨基酸组成等方法对人工抗原进行鉴定,ENFX与BSA的结合比约为48∶1。用ENFX-BSA免疫BALB/C小鼠,采用显微克隆技术最终筛选出2株特异性分泌细胞2C5和5D5并获取腹水,纯化后腹水效价分别为1∶3200和1∶6400。2C5和5D5均属IgG2a型抗体。单抗5D5间接竞争ELISA(Ci-ELISA)的工作浓度为1∶1000,ENFX的抑制曲线在0.13～10     

液相色谱法测定饲料中氟喹诺酮类含量方法研究

以2％甲酸乙腈溶液为提取液,采用MCX固相萃取,荧光检测器检测,激发波长280nm,发射波长450nm,外标法定量,本项目建立了同时测定饲料中4种氟喹诺酮类药物的反相高效液相色谱分析方法。4种药物在5—500μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数R。大于0．99996。添加药物水平20--500μg／kg的回收率在75．6％一97．2％。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星的定量检出限为20μg／kg,达氟沙星为4μg／kg。试验结果表明：该方法快速简便,准确可靠,重现性好,可用于监测饲料中氟喹诺酮类含量。     

恩诺沙星及其代谢产物在奶牛乳中的消除规律

 【目的】研究乳房炎奶牛单剂量乳房灌注1%恩诺沙星（50 ml/头）后乳中药物浓度的变化规律。【方法】采用HPLC法测定乳中恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星的浓度,用统计矩原理处理药物浓度—时间数据。【结果】在给药区恩诺沙星和代谢产物环丙沙星均于给药后2ｈ左右乳中浓度达到最高值,分别为（13.16±3.10）μg?ml-1和（2.79±0.94）μg?ml-1,然后逐渐下降;12 ｈ后检测不到恩诺沙星,24 ｈ已检测不到环丙沙星。对于非给药区,恩诺沙星给药后1ｈ左右乳中浓度达到最高值（0.19±0.02）μg?ml-1,然后逐渐下降;6 ｈ后检测不到恩诺沙星,而代谢产物环丙沙星于给药后4 ｈ乳药浓度可达最高峰（0.51±0.07）μg?ml-1,24 ｈ已检测不到乳药浓度。给药区代谢物环丙沙星的消除半衰期较恩诺沙星长,平均为（1.67±0.20）h,平均滞留时间（MRT）亦长。在本试验条件下,建议临床休药期不少于3 d。【结论】恩诺沙星吸收较迅速 ,代谢较快、清除较快 ,表明恩诺沙星与环丙沙星在乳中不会形成残留。     

优化超高效液相色谱法对鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留的检测

为制定畜产品中沙星类药物残留高效实用的检测标准,建立一种测定鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物(环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、达氟沙星)残留的超高效液相色谱检测方法。结果表明:4种氟喹诺酮类药物峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,R2均大于0.999 8。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星的线性范围为0~500μg·L-1,达氟沙星的线性范围为0~100μg·L-1。鸡蛋样品中氟喹诺酮类药物的回收率为78.9%~95.3%,相对标准偏差为5.5%~8.7%,检出限为10μg·kg-1。     

喹诺酮类药物在麻鸡体内的转化和分布规律

采用经免疫胶体金法快速检测鸡蛋中喹诺酮类（QNs）呈阴性的雪山麻鸡为试验材料,分别注射5 mg·kg-1环丙沙星、5 mg·kg-1恩诺沙星和10 mg·kg-1诺氟沙星,每天2次,连用2 d,在停药后48 h和第9天分批屠宰取样,并利用LC MS/MS检测胸肌、肝脏、血液和卵泡中12种QNs的含量。结果表明：每种药物在麻鸡体内经转化后生成6种以上QNs;不同组织中QNs残留量差异较大,其中肌肉和血液中QNs代谢快、残留量低（休药9 d,残留量低于19 μg·kg-1）,肝脏和卵泡QNs残留量相对较高;环丙沙星和诺氟沙星及其转化产物均在肝脏富集,诺氟沙星在肝脏中代谢尤为缓慢（休药9 d,QNs残留量为1 773.7 μg·kg-1）;恩诺沙星在麻鸡体内快速转化成其他QNs,并在卵泡中高度富集,休药48 h在肝脏、血液和卵泡中转化率高达100%,卵泡中QNs残留量达8 327.3 μg·kg-1,因此,恩诺沙星在产蛋鸡上使用,可能在鸡蛋中会产生大量的QNs残留。     

泰国虎纹蛙红腿病病原菌的分离鉴定及药敏试验

从患红腿病的濒死泰国虎纹蛙肝脏、心脏、腹水及病变腿部肌肉组织分离获得4株菌株（TW0701、TW0702、TW0703和TW0704）,根据细菌形态、培养特性、人工感染试验及API半自动微生物鉴定系统鉴定,确定4株分离株均为嗜水气单胞菌,且为泰国虎纹蛙红腿病的致病菌。以TW0701菌株为代表进行药敏试验,结果表明,该致病菌对头孢呋肟、先锋噻肟、先锋必、复达欣、氟苯尼考、菌必治、链霉素、卡那霉素、妥布霉素、头孢孟多、舒普深、磺胺二甲嘧啶、盐酸沙拉沙星、头孢西丁、环丙沙星、左氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星和磺胺六甲氧嘧啶（钠）等19种药物高度敏感,但对青霉素G、氨苄青霉素、苯唑青霉素、氧哌嗪青霉素、万古霉素、复方新诺明、阿莫西林、头孢噻吩、克林霉素、阿洛西林、头孢氨苄、新生霉素和头孢克洛等低度敏感或不敏感。     

低剂量恩诺沙星对SPF小鼠肠道菌群的影响研究

 采用SPF小鼠动物模型研究了低剂量恩诺沙星对肠道菌群细菌数量、细菌耐药性和定植抗力的影响。连续饮水给药（1、10 和100 mg·L-1）48 d后，恩诺沙星对SPF小鼠肠道菌群的主要影响为：10和100 mg·L-1恩诺沙星可抑制部分需氧和兼性厌氧菌的生长（P＜0.05或P＜0.01）；100 mg·L-1恩诺沙星可抑制肠球菌和部分拟杆菌的生长（P＜0.05或P＜0.01）；1、10 和100 mg·L-1恩诺沙星使需氧和兼性厌氧菌对环丙沙星的耐药率增加（P＜0.05或P＜0.01）；100 mg·L-1恩诺沙星使拟杆菌对环丙沙星的耐药率增加；1、10 和100 mg·L-1恩诺沙星可降低部分SPF小鼠肠道菌群的定植抗力，使菌群对外源细菌的屏障作用下降。低剂量恩诺沙星对肠道菌群数量和定植抗力影响不大；恩诺沙星对肠道菌群的主要影响是使需氧和兼性厌氧菌的耐药率增加；中国现行规定的恩诺沙星和环丙沙星的日允许摄入量（ADI）可能也会对人体肠道菌群产生影响，主要为选择出耐药需氧和兼性厌氧菌。