当前中国农民增收困难的分析与探讨

当前中国农民增收困难的根源除了农业生产的自身特点和中国人均耕地资源不足外，最主要的是长期以来政策上的重工轻农。因此，加强对农业的政策扶持，推进农村城镇化进程，全面减轻农民的税费负担，是解决农民增收的关键。     

溴氰菊酯人工抗原合成及鉴定

以二溴菊酸和3-[(4-硝基苯)氧基]苯甲醛为原料经4步反应合成了溴氰菊酯半抗原1-氰基[3-(4-氨基苯)苯基]甲基-2,2-二甲基3-(2,2-二溴乙烯基)环丙烷羧酸酯;用重氮化法将溴氰菊酯半抗原分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）相偶联制备免疫抗原和包被抗原,紫外吸收法估算偶联比分别为11:1和8:1;以BSA偶联物作免疫抗原免疫日本大耳白兔制备溴氰菊酯多克隆抗体,间接非竞争ELISA法测定2个抗血清效价分别为100000和80000,间接竞争ELISA法初步测定农药浓度50μg/ml时抑制率达到80%以上,为研究建立溴氰菊酯农残免疫快速测定方法奠定了基础。     

氰戊菊酯特异性人工抗原的合成与鉴定

基于农药小分子人工抗原设计合成的基本原则,以氰戊菊酯的特征菊酸部分——氰戊菊酸作为半抗原,与载体蛋白BSA偶联合成了氰戊菊酯免疫特异性人工结合抗原,并对抗原合成条件进行了探索。结果表明,抗原合成反应温度以室温为宜,偶联时缓冲液的最佳pH值为8.0;通过紫外分光光度仪扫描,合成抗原的紫外图谱相对于半抗原和载体蛋白均发生了偏移,表明偶联成功;SDS-PAGE电泳结果表明,合成产物蛋白条带明显在载体蛋白条带之后,即合成产物的分子量大于相应的载体蛋白分子量,从而判定偶联是成功的。     

GA1,3,4,7酶联免疫检测法（ELISA）的建立

用碳二亚胺法将赤霉素Ａ４与卵清蛋白连接，形成ＧＡ４－ＯＶＡ复合物用于包板，利用ＧＡ４－Ｍｅ与ＧＡ４－０ＶＡ对兔抗ＧＡ４－ＰＡｂｓ竞争结合反应，建立了ＧＡ１，３，４，７间接酶闻免疫检测法。其灵敏度，检测范围和最小检测样品量分别为４５ｐｇ，０．２－２００ｎｇ和５０－５００ｍｇ，样品的平均回收率为９７％，批内和批间的变异系数分别为４．２％和４．８％。     

建立我省小杂粮种子基地的必要性和可行性

建立我省优质小杂粮种子繁育基地，可以最大限度地满足山西省小杂粮作物的生产，有效地提高全省小杂粮的单产水平和质量，对保证农民增收，保障粮食安全，促进我省农业整体可持续发展具有十分重要的意义。     

有机磷特异性人工完全抗原的合成与鉴定

将含有苯环结构和硫代膦酸键的杀螟硫磷作为基本机构,经氨基化衍生反应,制备得到了有机磷半抗原。通过紫外、质谱、核磁共振鉴定,表明半抗原合成成功。通过重氮化反应,将半抗原偶联到载体蛋白上,进行紫外扫描、红外波谱和PAGE电泳鉴定,结果显示半抗原和载体蛋白偶联成功。利用紫外可见分光光度法,测得半抗原和载体蛋白的偶联比为7.61∶1,达到免疫要求。该方法为研究有机磷农药多残留免疫检测奠定了基础。     

叶酸人工抗原合成及免疫抗血清的鉴定

叶酸是人体必需的营养物质,叶酸的缺乏可以引起神经管畸形等多种疾病,建立叶酸的快速检测方法对营养强化食品的质控以及临床研究具有重要意义。本实验通过活化酯法合成叶酸-牛血清白蛋白（FA-BSA）人工免疫原,通过混合酸酐法制备叶酸-卵清蛋白（OVA）包被原。通过紫外扫描和免疫动物进行人工抗原的合成鉴定。根据BSA、OVA的含量以及人工抗原、BSA、OVA及叶酸（FA）的紫外吸收曲线在280nm处的摩尔吸收值,计算出叶酸与BSA的偶联比为1：3.84, 叶酸与OVA的偶联比为4.70。利用合成的叶酸人工抗原免疫小鼠,三免后眼眶内眦静脉采血,采用间接ELISA方法测定免疫小鼠多抗血清效价在128,000以上,叶酸对抗血清的IC50为14.82ng/ml;由此表明叶酸人工免疫原合成成功,为进一步研究叶酸单克隆抗体奠定基础。     

花生蛋白饮料中花生蛋白免疫检测方法的建立

建立基于竞争酶联免疫分析(ELISA)的花生蛋白饮料中花生蛋白定量方法。以变性的花生Ara h 1,Ara h 2,Ara h 9为抗原,分别制备抗这3种蛋白的多克隆抗体,构建竞争ELISA方法。分析了9个花生品系的Ara h 1,Ara h 2和Ara h 9的含量。基于花生Ara h 1与可溶蛋白的比例关系,得出了植物蛋白饮料中花生蛋白含量的计算方法。该方法线性范围均为1.0~50.0μg/m L(R2=0.99);花生Ara h 1蛋白含量除以系数0.15可换算得到蛋白饮料中花生蛋白含量;使用巴氏杀菌、超高温瞬时灭菌和高压灭菌的蛋白平均回收率分别为95%,93%,80%;方法相对标准偏差14%。     

孕酮人工抗原的合成及间接ElISA法鉴定

摘要：本研究采用二环己基碳二亚胺法将孕酮衍生物P4-11α-半琥珀酸酯与载体BSA和OVA进行偶联,制备了孕酮人工完全抗原（免疫原和检测原）,然后免疫Balb/c小鼠,制备孕酮多克隆抗体。用紫外光谱扫描法鉴定偶联是否成功并用间接Elisa法对孕酮多克隆抗体进行鉴定;结果显示,孕酮和BSA、OVA的偶联比分别为18:1、10:1,免疫血清孕酮抗体效价高达1：25600,这说明成功制备了免疫原和检测原,为孕酮胶体金试纸条的研制奠定了基础。     

丙烯酰胺人工抗原的合成及其多克隆抗体的制备

摘 要：利用偶联方法合成丙烯酰胺人工抗原,通过免疫方法获得抗丙烯酰胺多克隆抗体;应用戊二醛法将丙烯酰胺与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,并对这两种物质及其复合物进行紫外扫描,并用此复合物免疫兔子,利用间接酶联免疫吸附法测定抗体的效价;应用牛血清白蛋白与丙烯酰胺偶联人工抗体成功,抗体效价大于8100;应用人工抗原免疫成功制备抗丙烯酰胺多克隆抗体。     

Synthesis and identification of the artificial antigens for pyrethrins

Six haptens of pyrethrins are synthesized by preparing carboxyl of a ketone group of five membered rings．Six complete antigens are made by conjugating haptens to Bovine serum albumin (BSA) using a carbodiimide method．Ultraviolet spectrophotometry is used to demonstrate that the molecule conjugation ratios of Pyrethrin I-II, Cinerin I-II, and Jasmolin I-II to BSA are 6∶1, 13∶1, 9∶1, 11∶1, 7∶1, and 9∶1, respectively．The complete antigens are used as immunogens to immunize BALB/c mice to prepare antiserum．The antibody titers exceed 105 when measured using indirect enzyme linked immunoassay (ELISA). The polyclonal antibodies against pyrethrins are obtained via saturated ammonium sulfate precipitation．This research is may improve enzyme linked antibody detection and immunosorbent assay of pyrethrins．     

Evaluation of sources of partial resistance to mildew in barley using enzyme-linked immunosorbent assay and other assessment methods

Summary Twenty-nine spring barley genotypes ranging from primitive landraces to modern cultivars were characterised for partial resistance to powdery mildew on detached leaves and in the field. Detached seedling and adult plant leaves were produced under spore-free glasshouse conditions and were assessed for infection frequency (IF) and then total mildew biomass using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and thereby biomass per colony (BMC), following controlled infection. Field plants were assessed visually for infection and for total mildew biomass using ELISA. Several genotypes were identified as having below average IF and BMC on both seedling and adult detached leaves and field scores of leaf area infected with mildew. IF at the seedling stage was highly correlated with IF at adult plant stage and with mildew biomass in the field. Adult plant IF was highly correlated with visual field scores. BMC data were often negatively correlated with other assessments.     

特布他林人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

合成并鉴定特布他林（Terbutaline,TBL）人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源TBL多克隆抗血清。分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原BSA-TBL和包被抗原OVA-TBL,并采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定,通过动物免疫试验获得鼠源多抗血清,并使用ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行了鉴定。结果表明半抗原TBL分别和载体蛋白BSA及OVA偶联成功;受免6只小鼠效价均达1×10-4以上,且1号小鼠多抗血清抗TBL的IC50为55.88 ng/mL。本试验成功合成了TBL人工抗原,并生产了高效价、高敏感性的鼠源多克隆抗血清,为TBL单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了坚实的基础。     

棉铃疫病人工接种方法优化及应用

【目的】棉铃疫病是严重危害棉花生产的铃部病害。本研究旨在优化棉铃疫菌(苎麻疫霉,Phytophthora boehmeriae)的人工接种方法并有效应用。【方法】在室内保湿培养条件下,比较了棉株不同部位健康成铃自身携带棉铃疫菌的情况;利用贴接棉铃疫菌菌盘的方法,比较了棉铃表面消毒和不消毒、有伤和无伤接种对棉铃疫病发病情况的影响;建立棉铃疫病人工接种方法并应用于防治棉铃疫病化学药剂筛选、棉花品种抗病性鉴定和棉铃疫菌致病力检测。【结果】田间棉株下部第1~3果枝铃的棉铃疫病发病率显著高于中部第4~6果枝铃、中部第7~9果枝铃和上部第10~12果枝铃;75%(体积分数,下同)酒精浸泡棉铃2 min能够有效杀死棉铃表面携带的棉铃疫菌和其他真菌等杂菌;有伤接种棉铃疫菌,棉铃疫病发病快且均匀。建立了棉铃疫病快速人工接种方法:选取棉株中部第4~9果枝上的健康带柄成铃,去掉苞叶,用75%酒精浸泡消毒2 min,在棉铃中上部铃缝处针刺接种棉铃疫菌,25℃保湿培养3~7 d即可完全发病。应用优化的棉铃疫病人工接种方法筛选、鉴定结果表明,12种化学杀卵菌剂中,对棉铃疫病防效理想的药剂为25%(质量分数,下同)甲霜·霜霉威可湿性粉剂、70%丙森锌可湿性粉剂和52.5%噁酮·霜脲氰水分散粒剂;16个棉花品种对棉铃疫病存在抗性差异;10个棉铃疫菌菌株中JP18-4的致病力最强,JP15-2对棉铃的致病力最弱。【结论】本研究优化建立了棉铃疫病人工接种方法。该方法在7 d内即可完成棉铃疫病相关试验的评价,为加快棉铃疫病防治药剂筛选、棉花品种抗病性鉴定和棉铃疫菌致病力检测提供可行的技术。