金褐链霉菌发酵条件的优化

采用单因素实验分析和正交设计法找到金褐链霉菌较适合的发酵培养基配方:葡萄糖40 g/L,玉米淀粉20 g/L,蛋白胨3 g/L,黄豆粉10 g/L,MgSO4.7H2O 0.5 g/L,CaCO36 g/L,其产素单位为2 654.87μg/mL,比原用对照配方提高了12.32%。较优的发酵条件为:接种量为10%、pH为7.5、装量为16%、种龄为45 h、转速为220 r/m in、发酵时间为48 h,其产素单位达到2 940.49μg/mL。     

金属离子对褐黄孢链霉菌生长和纳他霉素生物合成的影响

【目的】研究不同金属离子对褐黄孢链霉菌菌体生长和纳他霉素生物合成的影响。【方法】用单因素摇瓶发酵试验方法,研究不同浓度Na+,Fe2+,Mg2+,K+,Ca2+,Cu2+,Mn2+,Zn2+和Co2+对褐黄孢链霉菌生长和纳他霉素生物合成的影响。【结果】在发酵培养基中添加Mg2+和Ca2+可促进褐黄孢链霉菌的菌体生长,添加Fe2+、Cu2+、Mn2+和Co2+可抑制菌体生长,而添加Na+、K+和Zn2+对菌体生长无显著影响;在发酵培养基中添加低浓度K+、Ca2+和Co2+可促进纳他霉素的生物合成,添加Na+、Fe2+、Cu2+和Zn2+抑制纳他霉素的生物合成,而添加Mg2+和Mn2+对纳他霉素的生物合成无显著影响。【结论】不同种类、不同浓度的金属离子,对褐黄孢链霉菌菌体生长和纳他霉素生物合成的影响差别较大;在培养基中添加适当浓度和种类的金属离子,有助于提高纳他霉素的产量。     

南昌链霉菌(Streptomyces nanchangensis)固体种子培养的研究

本研究进行了南昌链霉菌孢子培养基和培养条件的筛选。筛选到的培养基和培养条件,使南昌链霉菌每支斜面孢子达5亿多,是高氏培养基产孢量的7.5倍,培养时间缩短了7～10天。同时初步探讨了南昌链霉菌在固体培养基上孢子的消长变化及对摇瓶发酵产素的影响,发现该菌在固体培养基上能周期性地产生多代孢子;摇瓶发酵,接种第一代孢子南昌霉素 A 产量最多,接种第二代孢子则高效杀虫组分 B 的效价最高。     

长白山新记录种——金褐伞

笔者于1991年9月26日在长自山双目峰、圆池等地的红松阔叶混交林中,发现了金褐伞的生长。据文献资料记载,该种分布在我国的陕西省垃内,也分布于日本、欧州、北美等地。本种在与长自山区有关的志书上未曾有过记载。本文报道该种的形态特征及分布。     

鹤望兰组织培养的褐变因素及防止措施

对不同外植体类型、大小以及不同培养基成分和状态对鹤望兰组培褐变的影响进行研究。结果表明:开花株和一年生苗褐变严重,种子切段和无菌播种苗的褐变较轻;外植体较大有利于减轻褐变;纸桥液体培养可以有效降低外植体的褐变度。     

油菜菌核病诱抗菌桃褐腐病菌培养基的筛选及小规模生产

桃褐腐病菌在不同平板培养基上的生长能力证明,CA和PSA培养基效果最好,DPA和TA效果较差,SPA、VVA介于二者之间;以蔗糖为碳源远比葡萄糖效果好。桃褐腐病菌的液体发酵产量最高的是PCS和PS培养基,分别为0.053 g/ml和0.036 g/ml,是其他培养基的4倍以上。不同培养料固体发酵证明,产孢时间最早、产孢周期最短、孢子产量最高的是MCS培养基,其孢子产量为72.40%。试验还表明,马铃薯培养基最适宜诱抗菌菌丝生长,而棉籽壳、玉米粉则最适宜孢子生长。在油菜菌核病诱抗菌规模性生产中,生产孢子宜选择产量高、生产周期短、设备简单、成本低的棉籽壳、玉米粉为培养料的固体发酵法,生产菌丝宜选择马铃薯为培养基的液体振荡发酵法。     

褐口蘑原种培养基优化试验

人工栽培褐口蘑,其菌种生长好坏直接影响栽培效果。其菌丝发育所需的营养全部来自培养基,因此,培养基配料的科学与否,影响菌种质量。在相同培养条件下,通过对不同培养基上褐口蘑菌丝生长的形态观察,测定其生长速度等,综合比较不同培养基上的菌丝生长势,筛选最佳原种培养配方为高粱和牛粪再加上辅料,为优化褐口蘑原种培养基配方提供理论依据。     

史密斯桉组织培养技术及褐变问题研究

对史密斯桉(Eucalyptus smithii)的组织培养和褐变控制等进行探讨,结果表明:初接种采用MS BA 0.2 mg/L IBA 1 mg/L培养基,芽诱导率为40%;继代采用MS BA 0.2 mg/L IBA 0.8 mg/L培养基,增殖系数可达4,芽抽茎成苗率30.1%;生根采用MS IBA 2 mg/L培养基,根诱导率36.7%,平均生根2.4条.培养基中BA 质量浓度为0.2～1.0 mg/L,有利于芽的生长,但超过1.0 mg/L时反而抑制芽的生长.不同培养基添加物减轻褐变的效果不同,而同种添加物不同浓度的效果也不一样,加入50 mg/L PVP或100 mg/L V-C能显著减轻褐变,褐变率分别降低10%和8.3%.暗培养法虽能有效控制褐变,但严重影响愈伤组织和芽的生长,不宜采用.     

天女木兰组织培养的抗褐化研究

从外植体类型、外植体预处理方法、培养基类型、抗褐化剂类型及培养条件等方面研究了天女木兰(Magnolia sieboldiiK.Koch)组织培养过程中的褐化问题.结果表明,B5培养基对防止外植体褐化效果好,外植体在MS培养基中褐化严重.外植体的取材部位与天女木兰的褐化程度密切相关,侧芽褐化率相对较低,其次是顶芽,带芽的茎段褐化率最高.在B5+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA培养基中添加适宜浓度的抗氧化剂、吸附剂有利于抑制天女木兰的褐化,抗褐化效果是聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)＞维生素C(VC)＞活性炭(AC).用1 g/L VC浸泡外植体4·h可有效减轻褐化.培养初期一定的低温和暗培养可以减轻天女木兰的褐化.     

木霉菌对橡胶树褐根病菌的拮抗作用

探讨9个木霉菌株的生长与产孢特性,并通过对峙培养法,测定了9个木霉菌菌株对橡胶树褐根病菌的拮抗作用。结果表明,HCS、DJ1和ACCC31757生长速度最快,平均生长速度在4.5cm·d-1以上,ACCC30536平均生长速度最慢,只有1.5cm·d-1;9株木霉菌对橡胶树褐根病菌的拮抗作用差异较大,其中有3株木霉菌对橡胶树褐根病病原菌具有显著的拮抗作用,在第8d,ACCC31642和HCS对褐根病病原菌的抑制率达到100%,ACCC31639对褐根病病原菌的抑制率达到93.33%。     

“金薄香”核桃组培中灭菌及防止褐变的研究

以"金薄香"核桃的茎段为外植体试验材料,对其外植体材料灭菌和组织培养过程中褐变的防止措施做了探讨。结果表明:于较细的外植体A用0.075%HgCl2处理4 min效果最佳;对于较粗的外植体B用0.1%HgCl2处理4 min效果最佳。采用前期暗培养、缩短转瓶时间(以10 d期)和培养基中添加活性碳2.0 g.L-1的方法能使褐变得到有效控制。     

游离氨基酸对褐鳟和金鳟精子活力的影响

为探究体外储存条件下游离氨基酸(FAA)对鳟鱼精子活力的影响,分析褐鳟(Salmo trutta)和金鳟(Oncorhynchus mykiss)精液中FAA组成,通过向人工精液保存液(ASP)中添加不同种类氨基酸孵育褐鳟和金鳟精子,孵育1、24、48、72和96 h后,研究FAA对精子活力的影响(定义为孵育后可激活活力)。结果表明,褐鳟精浆FAA主要为缬氨酸、亮氨酸、精氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、丝氨酸及甲硫氨酸,其精子FAA主要为天冬氨酸、精氨酸、谷氨酸及丝氨酸。金鳟精浆和精子中主要FAA为精氨酸。当精子与精浆孵育48 h后,两种鱼的氨基酸含量与组成模式均发生变化,发生新陈代谢。丝氨酸、异亮氨酸及甲硫氨酸+异亮氨酸对两种鱼的精子活力有积极影响,在一定时间内能够通过添加可FAA延续精子活力,解决鳟鱼雌雄成熟不同步问题,提高受精效果,对鳟鱼苗种繁育及养殖具有重要意义。     

防止甘蔗组织培养褐化初探

新台糖22号接种在不同的培养基上,观测培养基的褐化时间及程度等.结果表明采用培养基改良MS+NAA 0.1 mg/L+6一BA 1 mg/L+生物素+硅酸钠配方对新台糖22号培养基褐化的防止有明显的效果,其褐化出现的时间最迟,褐化程度较浅,增殖系数最高.     

生防链霉菌gCLA4遗传转化体系的建立与优化

【目的】建立生防菌淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendularectus)gCLA4的遗传转化体系,为定向改造基因、提高基因表达水平及其生防分子机制研究奠定基础。【方法】以具有安普霉素(Apramycin)抗性基因标记的整合型质粒pSET152为出发质粒,Escherichia coli ET12567(pUZ8002,pSET152)为供体,淡紫灰链霉菌gCLA4为受体进行接合转移试验,并对影响接合效率的培养基、热激温度、接合转移时间和筛选转化子培养基等因素进行优化。【结果】成功地将质粒pSET152转入到了生防链霉菌gCLA4中,明确了可用于筛选链霉菌gCLA4转化子的抗生素为安普霉素或四环素;链霉菌gCLA4孢子50℃热激时转化效率较高,接合效率在16,18,20h下没有明显差异,MS培养基作为接合转移培养基时转化效率最高,接合产物涂布到高氏一号抗性培养基上进行阳性转化子筛选的效果最好。【结论】建立了生防链霉菌gCLA4的遗传转化优化体系。     

甜叶悬钩子植物组织培养褐化现象控制研究

[目的]寻求甜叶悬钩子组织培养中的最佳抗褐化剂。[方法]以甜叶悬钩子的茎和叶为外植体,必MS为基本培养基,加入不同浓度的抗褐化剂（20％Na2S2O3、Vc和AC）,研究不同抗褐化剂对甜叶悬钩子组织培养的影响。[结果]AC和Vc都能对不同外植体起到抗褐化作用,在加入20％Na2S2O3的培养基上,外植体的褐化程度与Na2S2O3的浓度成正比,培养基中20％Na2S2O3的添加量达20ml时,外植体褐化最为迅速;在加入Vc的培养基上,随着Vc添加量的增加,培养基变成液体或半固体培养基,接入的外植体容易死亡;在加入AC的培养基上,AC的添加量为5g／L时,外植体的褐化率可控制在5％以下。抗褐化控制处理后,可以在诱导愈伤组织的培养基上培养出大量的愈伤组织。1结论IAC是较为理想的抗褐化剂,用量为5g／L。     

几种培养基对褐口蘑菌丝生长的影响

探讨了几种不同配方培养基对褐口蘑菌丝生长的影响.结果表明,含有8%燕麦的培养基对褐口蘑菌丝生长有明显促进作用;PDA培养基中添加不同浓度的白灵侧耳菇脚水对褐口蘑菌丝生长也有明显促进作用.     

大花蕙兰外植体组培褐变的控制

对大花蕙兰离体繁殖中外植体的褐变进行了研究,结果表明：①假鳞茎切块和花茎切段褐变严重,选用茎尖褐变较轻。②在MS、改良MS和1/2MS三种培养基中,以无机盐浓度较低的1/2MS培养基、采用液体培养方式抑褐效果最好,但分化率差异不大,采用固体培养的材料,其分化率略高于液体培养。③在培养基中加入聚乙烯吡烙咯烷酮（PVP）、硫代硫酸钠、活性炭和维生素C,均能减轻褐变程度,其中以500mg/L PVP效果最好。④对褐变严重的外植体,进行接种前的抑褐剂预处理是有必要的,试验中以PVP（2g/L）和硫代硫酸钠（2g/L）预处理20min效果较好。     

褐环粘盖牛肝菌多糖发酵工艺研究

为提高褐环粘盖牛肝菌发酵产多糖的能力,通过单因素试验和正交试验对褐环粘盖牛肝菌的培养基组成和发酵条件进行了优化.结果表明,最佳发酵培养基为:10.0％马铃薯、3.0％葡萄糖、0.5％牛肉膏、0.3％ KH2PO4、0.2％ CaCO3、0.1％ ZnSO4· 7H2O;最适发酵条件为:初始pH值5.6,250 mL三角瓶装100 mL培养液,温度25～28℃,摇瓶培养9d.在该工艺下,褐环粘盖牛肝菌多糖的产量达62.10 mg/g.     

龙眼组培的褐变抑制研究

[目的]探求有效抑制龙眼组培时外植体褐变的方法。[方法]以龙眼嫩梢茎段为材料,采用多种抗褐变方法,筛选对龙眼组织培养中的外植体褐变抑制效果最好的方法。[结果]采用6.00g/LPVP溶液进行预处理对龙眼外植体褐变的抑制效果最好。当6-BA浓度为1.92～1.93mg/L、KT浓度为0.88～1.93mg/L、NAA浓度为0.05～0.06mg/L时,外植体的褐变程度最轻。添加2.00g/L的PVP和活性炭的培养基对外植体褐变的抑制效果最好。[结论]选取培养基MS+NAA0.05～0.06mg/L+6-BA1.92～1.93mg/L+KT0.88～1.93mg/L+PVP2.00g/L,结合6.00g/LPVP溶液的预处理,对龙眼组织培养时外植体褐变的抑制效果最好。     

玫瑰孢链霉菌NRRL11379产达托霉素前体物A21978C的发酵培养基优化

[目的]对玫瑰孢链霉菌NRRL 11379进行发酵培养基优化,寻找产物A21978C较好的发酵培养基配方。[方法]从16种发酵培养基中筛选较好的培养基,通过单因子试验和正交试验进行优化。[结果]得到玫瑰孢链霉菌NRRL 11379产达托霉素前体物A21978C组分的最佳发酵培养基为:葡萄糖1%、可溶性淀粉4%、黄豆粉1%(、NH4)2SO40.3%、MOPS 6%、K2SO40.8%、NaCl 0.1%。[结论]优化后的产量约为60 mg/L,比优化前提高9.2倍。