中国被毛孢RCEF0273培养工艺的研究

以提高菌丝生物量为目的,对中国被毛孢RCEF0273菌株的固体和液体培养工艺进行研究.结果表明,固体培养的最佳氮源为奶粉,其后依次为黄豆粉、酵母粉和麸皮,最差的为蛋白胨和NH4NO3;碳源对此菌的生长影响较小,比较适合的碳源为葡萄糖、蔗糖和果糖,其次为乳糖、淀粉等.应用正交设计方法研究接种量、CMC浓度以及添加玻璃珠的数量对菌丝生物量的影响,结果显示,30%的接种量可显著提高菌丝的生物量,而添加CMC或玻璃珠不利于菌丝生长.     

不同氮源对中国被毛孢生长的影响

为了探讨不同类型的氮源对中国被毛孢生长的影响,摸索优化中国被毛孢人工培养的培养基配方,本研究将8种不同类型的有机氮源添加到基础培养基中,考察了不同的有机氮源对中华被毛孢的生长速度和总生物量的影响。结果表明,添加黄粉虫蛹粉作为氮源无论是在菌落大小还是总生物量上都具有明显优势。效果较好的前3种氮源依次是：黄粉虫蛹粉>牛肉蛋白胨>黄粉虫粉。而大豆蛋白胨效果最差,仅优于对照组（不添加任何氮源）。由此可以推断：中华被毛孢在生长过程中会优先利用和天然寄主蛋白类型更为接近的动物性有机氮源。     

中国被毛孢高产孢菌株的筛选

[目的]获得高产孢的中国被毛孢菌株。[方法]对比5株中国被毛孢菌株的产孢率,并结合菌株在固体培养基上的菌丝生长速度、菌落半径、菌落形态及菌丝生物量等性状表现加以筛选。[结果]菌株7B和8B产孢率明显高于其他菌株,但菌丝生物量与其他菌株差异不明显。[结论]菌株7B和8B可作为生产分生孢子的优良中国被毛孢菌株。     

中华被毛孢的液体培养条件优化

[目的]优化中华被毛孢的液体培养条件。[方法]通过18srDNA及系统进化树对中华被毛孢进行鉴定分析,然后以中华被毛孢菌丝体生物量为指标,采用单因素试验和正交试验研究菌丝体液深层发酵的培养条件。[结果]单因素试验表明,最佳的氮源为蛋白胨,其次为牛肉膏;最佳碳源为葡萄糖,其次为蔗糖和麦芽糖。正交设计试验表明,菌株的液体发酵的最佳配方:浓度1%葡萄糖+浓度0.5%蛋白胨+浓度0.1%酵母粉+浓度0.01%维生素B1+浓度0.05%KH2PO4+浓度0.05%MgSO4;在该浓度培养下,菌丝体生物量可达到20.8 g/L。[结论]该方法优化了中华被毛孢的液体培养条件,为中华被毛孢的的开发利用提供依据。     

长座虫草及其被毛孢无性型

本文报道了采自安徽省霍山县的中国新记录种长座虫草（Cordyepslongissima Kobayasi）,并且利用子囊孢子分离出被毛孢无性型,同时,在米饭培养基上得到了接受成熟的子座,它们的开状和颜色与天然虫草一致。另外,也观察到大量与天然虫草子座柄部相同的孢梗束。     

中国被毛孢有性发育启动前后cDNA文库的构建

构建了中国被毛孢有性发育启动前后的cDNA文库。采用Total RNA Kit Ⅰ法提取总RNA,磁珠法分离mRNA,反转录合成双链cDNA。获得的cDNA经蛋白酶K与SfiⅠ消化酶切并纯化,连接到载体pUC19上,采用电转化法将其转化到感受态细胞DH-5α中。之后测定文库的克隆数、重组率、插入片段大小。结果显示,文库1含1.09×10⁶个重组体,蓝白斑实验显示重组率为92.5%;文库2含1.13×10⁶个重组体,蓝白斑实验显示重组率为92%;两文库重组DNA片段的大小范围均在500~2 000 bp。说明本试验中所提取的 RNA 其纯度很好,完全可以达到后续研究的要求。     

中国被毛孢三种菌丝形态的超显微特征观察

为探究人工培养中国被毛孢Ophiocordyceps sinensis过程中出现的3种形态菌丝(基内菌丝、菌丝团与气生菌丝)的差别及产生机理,以分离自单子囊孢子的菌株为材料,分别用光学显微镜和扫描电子显微镜观察3种形态菌丝的显微与超显微形态.结果发现:菌丝直径和形态不同,表现为菌丝团>基内菌丝>气生菌丝;气生菌丝排列疏...     

一种被毛孢菌丝体提取物的免疫调节活性研究

经多菌株的虫生真菌生物活性筛选,发现一株被毛孢菌株RCEF0851发酵物具有较强的免疫增强作用,进一步采用荧光定量PCR方法研究RCEF0851不同提取物对体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7的IL-1β、IL-6和TNF-a转录水平的影响.结果表明,乙酸乙酯提取物能显著提高TNF-a转录水平的表达,但对IL-1β和IL-6的转录调节作用不明显;水提物和甲醇提取物能明显提高小鼠巨噬细胞中IL-1β、IL-6和TNF-a的转录水平,表明它们具有免疫增强作用.     

一种潜在的褐飞虱生防真菌:桔形被毛孢的分离、鉴定与培养

分离、鉴定与培养了一种自然侵染褐飞虱的病原真菌,为褐飞虱生物防治提供科学依据。通过对病原真菌的形态和培养特征的观察,鉴定该菌种为桔形被毛孢(Hirsutella citriformis Speare)。该菌是中国的新记录种。该菌孢梗束从被感染的寄主各部分伸出,长7 mm,直径83.2~156.0μm。瓶梗基部椭圆形,(5.2~7.8)μm×(2.6~5.2)μm,向上突然变细呈长管状,(28.6~32.5)μm×(0.7~0.9)μm;分生孢子,无隔,纺锤形,(6.5～5.2)μm×(1.3~2.6)μm。在室内进行的温度和光周期对该菌生长的影响表明,该菌在15~30℃均可生长,最适生长温度25℃。全明和全暗两种光周期对菌落生长影响不显著。     

被毛孢属真菌防治植食性螨类的研究进展

被毛孢属真菌是一类重要的节肢动物和线虫的病原真菌。该文综述了被毛孢属真菌的研究现状,对该属真菌侵染节肢动物的机理和该属真菌能够感染植食性螨的种类进行了介绍。在防治植食性害螨方面,列举了国内外利用该属真菌防治螨类的研究和方法,同时也对该属真菌防治时存在的问题与对策进行了讨论,以为该属真菌的应用提供参考。     

不同营养液液体培养对交织顶孢霉形态和胞外多糖的影响

通过改变蔗糖浓度和选用不同的氮源对交织顶孢霉RCEF0260菌株液体发酵工艺进行研究.结果表明,不同的氮源对菌丝体的形态影响显著.以蛋白胨和黄豆粉为氮源时,菌丝较粗,分生孢子较宽,呈卵形、长卵形至椭圆形,且黄豆粉组可见大量分生孢子和具长芽管的孢子;而以硝酸铵为氮源时,菌丝细长,孢子一般较窄,呈梭形.不同浓度的蔗糖对菌丝体的形态影响不大,但对胞外多糖产量的影响显著.另外,不同氮源对菌重的影响显著.     

玫烟色棒束孢IF-1106菌株液体培养条件优化

以玫烟色棒束孢菌株为试验材料,首先确定菌株液体培养的最适碳源和氮源组合,然后在单因素试验的基础上,通过正交试验研究蔗糖质量分数、蛋白胨质量分数以及培养时间对菌株菌丝生物量和产孢量的影响,以明确玫烟色棒束孢最适液体培养条件。结果表明,菌丝生物量最大时的培养条件为:蔗糖质量分数5%、蛋白胨质量分数1.5%、培养时间6 d;产孢量最大时的培养条件为:蔗糖质量分数4%、蛋白胨质量分数0.5%、培养时间7 d。适合菌丝生长的培养条件与适合产孢的培养条件是不一致的,可以根据目的不同选用不同的培养条件。     

氮源对不同寄主来源的球孢白僵菌菌株液体培养特性的影响*

 对从小菜蛾(Plutella xylostella)、斜纹夜蛾(Spodoptera litura)和马铃薯块茎蛾(Phthorimaea opercula)3种鳞翅目昆虫罹病虫体上分离纯化的球孢白僵菌DBM001, XWYE001和PTM001菌株在液体培养基(萨氏葡萄糖培养基)及其在不同氮源添加物培养基中菌丝产量、产孢量、孢子形成等特性进行了研究。结果表明：3菌株中,分离自斜纹夜蛾的XWYE001菌株培养物浓度及菌丝生长量略高于分离自小菜蛾和马铃薯块茎蛾的DBM001和PTM001菌株,但差异不显著(P>0.05）。而不同类型氮源物质对分生孢子的形成及菌丝生长影响显著(P＜0.05）,加入(NH4)2SO4 后液生分生孢子产量较高,菌丝产量相对较低;加入NH4NO3 或L-酪氨酸后菌丝产量较高,液生分生孢子产量相对较低。研究结果为球孢白僵菌高毒力菌株的筛选及液体培养提供理论依据。     

杏鲍菇液体培养微量元素对其菌丝生物量的影响

[目的]研究杏鲍菇液体培养微量元素对其菌丝生物量的影响,以期为杏鲍菇培养条件优化提供理论依据。[方法]通过在杏鲍菇培养液中添加不同微量元素,考察其菌丝生物量的变化,分析微量元素对其生长的影响,优化杏鲍菇培养条件。[结果]培养液中添加镁、钙以及少量的铁可以促进杏鲍菇生长,添加锌和过量的铁会导致杏鲍菇生长抑制。[结论]该研究结果为杏鲍菇液体发酵的进一步优化提供了参考依据。     

光照处理对冬虫夏草单孢菌株生长代谢的影响

为了探究光照处理对中国被毛孢生长代谢的影响,通过分离单子囊孢子获得单孢菌株,并对该菌株进行光照处理。观察记录光照处理30 d后菌落和菌丝形态的变化,测量菌落鲜质量、干质量以及分生孢子量,通过比色法检测甘露醇、多糖、尿素和多酚4种代谢物含量的变化,并通过UPLC检测腺苷含量的变化。结果表明,光照处理后中国被毛孢菌落形态发生显著变化;菌落鲜质量显著低于黑暗处理组,干质量无明显差异;菌丝的延伸被抑制并出现扭结现象;分生孢子数量显著高于黑暗处理组;多糖和尿素含量均显著低于黑暗处理组;甘露醇和多酚含量无显著变化;腺苷含量显著高于黑暗处理组。     

增加被孢霉菌丝体中γ—亚麻酸含量的研究

为增加被孢霉产生γ亚麻酸的含量,给出了最佳培养基配方和生产条件,实验证明,新的培养基配方及生产条件使被孢霉脂肪油中γ－亚麻酸的质量分数由原工艺的４．０５３１％增加到７．２６９７％。     

温度和糖驯化对高山被孢霉SM96γ-亚麻酸产生的影响

采用不同糖浓度和温度2个因子共同驯化高山被孢霉SM96.通过驯化发现20℃驯化最佳,较高温度驯化结果不稳定,各温度下8%糖驯化绝对产量最高.选出了2个驯化结果较优的菌株：M230、M920.两者的γ-亚麻酸（GLA）产量分别为240 mg/L和303 mg/L,比出发菌株SM96分别增加了108.696% 和92.994%.     

金针菇液体培养生产多糖的研究

对不同菌株、不同培养基和培养时间对金针菇菌丝体产量和金针菇多糖产量的影响进行了研究,并对金针菇胞外多糖进行了紫外和红外分析。结果表明,金针菇12号菌株在液体培养基中培养10～11 d时金针菇菌丝多糖含量和金针菇菌丝体产量最高,金针菇胞外多糖产量较高。紫外和红外分析结果表明,本研究所分离的金针菇胞外多糖为一种含β-型吡喃糖苷键的纯多糖。采用不同的培养基对金针菇胞外多糖的主体结构影响不明显,均有相似的多糖特征峰和β-型吡喃糖苷键吸收峰。但采用玉米、黄豆等配制的培养基更有利于工业化生产金针菇多糖。