鸭肝蛋白酶的分离纯化及其部分性质研究

经Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析,得到鸭肝蛋白酶电泳纯制品．纯化倍数为650.16倍,回收率为19.23%．经SDS-PAGE和凝胶过滤测得该酶的分子量为35kD．该酶在pH6.0～11.0,温度低于25℃稳定,当温度上升到55℃时活性迅速下降．该酶在pH10和60℃时达到最高活性．进一步研究得知：Cu^2＋离子对该酶有明显促进作用,而Mn^2＋却使酶几乎失活．以酪蛋白为底物,在pH10.0、37℃时测得米氏常数Km值为1.33%．     

大蒜蛋白酶抑制剂的分离纯化与部分性质研究

以大蒜为原料,经酸性溶液提取、盐析、脱盐、洗脱、凝胶过滤等步骤分离得到蛋白酶抑制剂AS-1。对该抑制剂理化性质进行分析,结果表明:蛋白酶抑制剂AS-1是一种分子量约为3 000、具有较高热稳定性、可溶于水的弱酸性蛋白质。     

鸭肝蛋白酶的分离纯化及其部分性质研究

经Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析,得到鸭肝蛋白酶电泳纯制品. 纯化倍数为650.16倍,回收率为19.23%. 经SDS-PAGE和凝胶过滤测得该酶的分子量为35 kD. 该酶在pH 6.0～11.0,温度低于25 ℃稳定,当温度上升到55 ℃时活性迅速下降. 该酶在pH 10和60 ℃时达到最高活性. 进一步研究得知: Cu2+离子对该酶有明显促进作用,而Mn2+却使酶几乎失活. 以酪蛋白为底物,在pH 10.0、37 ℃时测得米氏常数Km值为1.33%.     

灰树花多糖的分离、纯化与理化性质

灰树花子实体用热水提取，乙醇沉淀，透析冻干得灰树花多糖粗品，再经Sevag法脱蛋白，DEAE－Sephadex A-25柱层析纯化得到4种多糖分别为PGF－1，PGF－2，PGF－3和PGF－4。4种多糖经纸层析，Sephadex G-200柱层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明都为单一均匀组分：PGF－1经纸层及气相色谱分析证实它是一种葡萄糖；凝胶渗透色谱测定其分子量为11万。红外光谱揭示PGF－1含β－型糖苷键。     

日本鳗鲡肠道蛋白酶的分离纯化及其酶学性质研究

【目的】从日本鳗鲡(Anguilla japonica)肠道中分离纯化蛋白酶并分析其酶学性质,为日本鳗鲡饲料的科学研制提供理论依据。【方法】通过硫酸铵沉淀分级分离及Sephadex G-100和Sephadex G-75两级凝胶柱层析纯化日本鳗鲡肠道蛋白酶,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和SDS-PAGE鉴定蛋白酶纯度和亚基分子质量,利用凝胶层析法测定酶的分子质量,用等电聚焦电泳法测定酶的等电点,并研究以酪蛋白为底物时蛋白酶催化反应的动力学参数及pH、温度、金属离子和修饰剂对蛋白酶活力的影响。【结果】日本鳗鲡肠道蛋白酶亚基分子质量为65.3ku,酶分子质量为260.3ku,等电点为8.23;该蛋白酶的最适pH为8.2,最适温度为55℃,米氏常数(Km)为4.832mg/mL,最大反应速度(Vmax)为0.269U/min。日本鳗鲡肠道蛋白酶在pH为6.6~9.0时表现稳定,在20~55℃时具有较好的热稳定性,在60℃以上稳定性迅速下降。Mg2+、Ca2+、Co2+、Ba2+、Mn2+、Cu2+、Zn2+和Hg2+对日本鳗鲡肠道蛋白酶的活力表现出不同程度的抑制作用,其中以Hg2+的抑制作用最强,1 mmol/L Hg2+可使酶活力丧失87.63%;而Fe2+有激活作用,5mmol/L Fe2+可使酶活力提高134.53%。修饰剂EDTA、对氯汞苯甲酸(pCMB)和Cys对酶活力没有影响,苯甲酰基磺酰氟(PMSF)和二硫苏糖醇(DTT)对酶活力则有不同程度的抑制作用。【结论】日本鳗鲡肠道蛋白酶由4条相同肽链组成,属于丝氨酸蛋白酶类,二硫键是维持其活性所必需的,酶活力易受环境中酸碱度、温度和金属离子调控。     

大粒车前子多糖的分离纯化及理化性质测定

沸水法提取得到的大粒车前子粗多糖经Sevag法脱蛋白后,再经葡聚糖凝胶层析柱反复纯化得到3个均一组分,即PLP-1、PLP-2、PLP-3,并对3个组分进行分子量及理化性质的测定。结果表明:PLP-1的相对分子量为3 292 494 u,PLP-2的相对分子量为1 725 889 u,PLP-3的相对分子量为1 286 790 u;糖含量分别为82.08%、87.32%和79.18%;蛋白含量分别为0.54%、1.16%和0.72%;糖醛酸含量分别为17.46%、14.66%和20.13%。3个组分进行紫外光谱和红外光谱扫描结果显示,3个组分中均有蛋白质存在。     

南美白对虾丝氨酸蛋白酶的分离纯化及性质研究

通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose、Phenyl-Sepharose、Hydroxyapatite、Superdex75等方法,从南美白对虾消化腺中分离得到一种丝氨酸蛋白酶.SDS-PAGE结果显示,其分子质量约为28ku,最适pH值与最适温度分别为9.0和40℃,且pH值在7.0～10.0之间以及温度在40℃以下有较高的稳定性.底物特异性实验与抑制剂实验结果表明,该酶属于类胰蛋白酶的丝氨酸蛋白酶.动力学实验显示,以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物时,Km=0.69μmol/L,Kcat=0.33S-1,Kcat/Km=4.78×105（mol/L）-1S-1.     

香菇菌盖多糖的提取纯化及其理化性质的研究

采用水浸法,碱浸法从香菇菌盖中提取粗多糖,经乙醇沉淀,Ｓｅｖａｇ法脱蛋白,ＣＴＡＢ络合沉淀,氯化钠溶液溶解,透析,得到２种多糖：Ｌｅｗ（水浸物）和Ｌｅａ（碱浸物）。经ＰＡＧＥ电泳,纸层析,紫外光谱分析鉴定,两都为均一组分。Ｌｅｗ的纯度为７９．１％,Ｌｅａ为８３．２％。改良型膜渗秀压法测分子量,Ｌｅｗ分子量为８．３１×１０＾４,Ｌｅａ为９．４０×１０＾４。经红外光谱分析,Ｌｅｗ,Ｌｅａ具有相似结构     

大孔径树脂分离纯化无花果多糖工艺研究

目的:优选无花果多糖分离与参数及纯化工艺大孔径树脂类型。方法:通过不同树脂比较,筛选最佳树脂类型及最佳吸附和洗脱条件。结果:AB-8树脂在pH值=8时吸附能力最佳,0.02 mg/mL NaC l洗脱液在流速为2mL/m in时,获得多糖最佳纯度(73.12%)和回收率(71.30%)。结论:AB-8型树脂是分离纯化无花果多糖的适宜大孔径树脂。     

生姜蛋白酶的部分纯化及酶学性质研究

对姜块中的生姜蛋白酶进行部分纯化，并对其主要酶学性质进行了研究。以酪蛋白为底物时，其最适pH值为6.0最适温度为60℃，30℃下保温30min，酶活力不变，高于72℃酶活力迅速下降，60℃、75℃、80℃时，该酶的半衰期分另为17、12和3min，Km值为0.270mmol/L；二硫苏糖醇（DTT）、乙二胺四乙酸二钠（EDTA）对酶有激活作用；对氯汞苯甲酸（PCMB）、氯化锌、硫酸铜等对酶有抑制作用；氯化钙、硫酸镁、三氯化铝对酶活影响不大。     

无花果蛋白酶对不同蛋白质水解能力的研究

无花果蛋白酶对牛血清蛋白、核糖核酸酶、干酪素、蛋白胨、胎盘白蛋白、叶蛋白均具水解能力。与胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比较，对６种纯蛋白水解能力的顺序基本一致。无花果蛋白酶对猪肉、鸡肉、鲫鱼肉、鸡蛋白、黄豆粉等食用蛋白也具有水解能力。     

泥质海岸防护林土壤酶活性与理化性质关系的研究

通过对泥质海岸防护林土壤酶活性和理化性质关系的研究得出：（１）四种土壤酶（蔗糖酶、碱性磷酸酶、脲酶、蛋白酶）与土壤水稳性团粒含量、容重、孔隙率、有机质含量、盐分含量、全氮含量、速效磷含量、ｐＨ值有着密切的关系，而与物理性粘粒含量、含水量、速效钾含量不相关；（２）通过典型相关分析，土壤酶与理化性质之间关系密切，第一对典型变量的相关系数达０．９４４３。在土壤酶中起主要作用的是脲酶和蛋白酶，在理化性质中     

无花果系列食品加工技术的研究

主要研究了无花果糖水罐头，果酱，果脯的制作工作。     

营养液的组成及理化性质对红榕生长的影响

试验研究了无土栽培营养液的组成、电导率和pH对红榕幼苗生长的影响,结果表明：3种配方营养液都可用于红榕幼苗无土栽培,但C配方最节省成本。电导率为1．5mS／cm时,植株生长优于电导率为0．5mS／cm和1．0mS／cm处理,但对根的影响不大。营养液的pH为5．5时有利于植株生长。     

葡萄皮天然紫色素的理化性质研究

本文研究了葡萄皮紫色素的可见吸收光谱、光稳定性、热稳定性、耐氧化性、耐糖性及金属离子对色素稳定性的影响。结果表明：葡萄皮紫色素色质优良，有广阔的开发应用前景。     

营养液的组成及理化性质对红榕生长的影响

试验研究了无土栽培营养液的组成、电导率和pH对红榕幼苗生长的影响,结果表明:3种配方营养液都可用于红榕幼苗无土栽培,但C配方最节省成本.电导率为1.5 mS/cm时,植株生长优于电导率为0.5 mS/cm和1.0mS/cm处理,但对根的影响不大.营养液的pH为5.5时有利于植株生长.     

茄子皮红色素理化性质的研究

对茄子皮红色素的理化性质作了较全面的研究，结果表明，茄子皮红色素属水溶性色素，且在酸性条件下很稳定，宜在酸性食品（ｐＨ〈５）中应用故有望成为一种新型天然食品色素。     

同羊春毛理化特性的研究

研究结果表明,同羊春毛纤维类型数量比例较30年前有所改善.比秋毛弯曲明显整齐,弯曲率大,光泽好,摩擦效应大;17种氨基酸含量及总量也多于秋毛;伸度和强度的集中性及含硫量差于秋毛;表面结构也不及秋毛好,特别是含硫量还低于羊毛一般水平.     

芽孢杆菌纤溶酶的纯化及其生物活性研究

芽孢杆菌2^#（Bs-2）的发酵液经过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤层析、Q-Sepharose阴离子交换层析、电泳制备和电源洗脱。获得一种具有纤溶性的蛋白酶;该蛋白酶由3个亚基组成,分子量分别为23KD,SSKD,19KD,全酶分子量约为64KD;经纤维蛋白平板测定表明,该酶既具有纤溶酶作用,又具有激活纤溶酶原的作用。