沙门氏菌的基因工程减毒以及在DNA疫苗载体中的应用

沙门氏菌是最常见的人畜共患的重要病原菌,引起人和动物肠热症、胃肠炎、败血症等,呈全球性分布.通过基因工程技术对沙门氏菌进行减毒,感染宿主细胞后可在体内长期存活并诱导产生保护性免疫反应.同时,沙门氏菌是一种侵袭性胞内菌,减毒沙门氏菌运载编码有外源基因的真核表达质粒可在体细胞内进行持续表达,诱导产生特异性的体液和细胞免疫应答.因此,减毒沙门氏菌既可作为针对同源抗原的活疫苗,也可作为诱导针对其他病原微生物产生保护性反应DNA疫苗的载体[1].本文综述了沙门氏菌的基因工程减毒以及在DNA疫苗载体中应用方面的最新进展.     

减毒鼠伤寒沙门氏菌载体在兽医疫苗中的运用

重组疫苗的研究中,减毒鼠伤寒沙门氏菌可以作为真核表达载体。其原理是将免疫原基因片段连接到某种真核质粒中,然后将质粒导入减毒鼠伤寒沙门氏菌,构建针对该特异病原的重组活疫苗。本文介绍了减毒鼠伤寒沙门氏菌作为DNA载体,在动物细菌、病毒和支原体重组活疫苗中的运用。     

减毒猪霍乱沙门氏菌作为疫苗及载体的研究进展

猪霍乱沙门氏菌是引起仔猪副伤寒的主要病原之一,同时也是食物中毒的重要病原,因此在养殖业和公共卫生上均有重要意义。本文就其疫苗及疫苗作为载体的研究进展作一综述。     

减毒沙门氏菌为载体传递DNA疫苗诱导对新城疫病毒的免疫保护

探讨了以减毒鼠伤寒沙门氏茵为栽体传递新城疫病毒DNA疫苗的安全性、免疫原性和可行性。将含新城疫病毒(NDV)F48E9株融合蛋白(F)基因的真核表达质粒pcDNA3-F的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ZJ111株(ZJ111／pcD-NA3一F菌株)，以10^8CFU进行首免，2周后二免，三免后4周攻击强毒株F48E9，观察其安全性和免疫原性，同时设只含空载体pcDNA3的ZJ111／pcDNA3菌株对照及口服PBS对照。结果表明：重组ZJ111／pcDNA3-F菌株具有良好的安全性。对强毒株攻击的保护率达64．7％。重组ZJ111／pcDNA3-F菌株不仅能诱导雏鸡产生NDVELISA抗体，而且诱导产生的法氏囊B淋巴细胞和胸腺T淋巴细胞增殖反应显著高于ZJ111／pcDNA3时照组。这些结果提示，减毒沙门氏菌为载体不仅可直接将NDVF基因呈递给鸡体细胞进行表达，产生抗NDV的体液免疫，而且还可诱导细胞免疫应答。     

减毒沙门氏菌在疫苗和疫苗载体方面的研究进展

沙门氏菌不仅可以用作疫苗,也是理想的疫苗载体,已受到医学与兽医学的广泛重视。沙门氏菌可以经黏膜途径免疫(口服或鼻内),操作方便,对接种对象刺激小;此外,沙门氏菌为胞内侵袭细菌,能有效递呈抗原,激发抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的特异性体液免疫反应与细胞免疫反应,并能同时诱导黏膜免疫与全身免疫。文章对沙门氏菌的入侵机制、免疫机理及其在疫苗中的应用状况进行了综述,为新型疫苗的研究提供参考。     

减毒沙门氏菌为载体的口服生长抑素DNA疫苗对草鱼的安全性

幼草鱼灌服10^8、10^9、10^10cfu／mL减毒沙门氏菌为载体的口服生长抑素DNA疫苗ZJ111／pcDNA3-SS，另设野生型鼠伤寒沙门氏菌（10^9cfu／mL）和PBS对照组，试验期20d，观察并比较各组死亡率。另取150g左右的草鱼灌服PBS、10^8cfu／mL ZJ111／pcDNA3-SS和10^8cfu／mL野生型鼠伤寒沙门氏菌组，7d后屠宰取肝和脾脏，做透射电镜切片观察。结果显示，灌服10^9cfu／mL ZJ111／pcDNA3-SS的幼鱼在试验期间死亡2尾，灌服10^8cfu／mL ZJ111／pcDNA3-SS和PBS的幼鱼采食和生长正常，灌服野生型S．typhimurium和10^10cfu／mL ZJ111／pcDNA3-SS的幼鱼死亡率分别为76．67％、26．67％。灌服10^8cfu／mL ZJ111／pcDNA3-SS的草鱼肝、脾细胞形态正常，肝脏线粒体略微肿胀，内质网间距略有增大，但病变特征不明显；10^8cfu／mL的zJ111／pcDNA3-SS对草鱼具有相对安全性。     

沙门氏菌载体在疫苗应用中的研究进展

沙门氏菌不仅可以用作疫苗,也是理想的疫苗载体,已受到医学与兽医学的广泛重视。其主要优点包括:沙门氏菌可以经黏膜途径免疫(口服或鼻内),操作方便,对接种对象刺激小。此外,沙门氏菌为胞内侵袭细菌,能有效递呈抗原,激发抗沙门氏菌和诱导外源蛋白的特异性体液免疫反应与细胞免疫反应,并能同时诱导黏膜免疫与全身免疫。作者对沙门氏菌的入侵机制、免疫机理及其在疫苗中的应用状况进行了综述,为新型疫苗的研究提供参考。     

减毒沙门氏菌作为口服活疫苗载体的研究进展

文章就沙门氏菌相关基因的特点、减毒沙门氏菌载体激发的免疫应答、进入机体免疫系统的机制、减毒沙门氏菌的应用、载体疫苗的优越性及潜在危险性几方面综述了减毒沙门氏菌作为口服疫苗载体的研究进展,为新型菌苗的研制提供一种新的思路。     

减毒沙门氏菌载体构建策略研究进展

减毒沙门氏菌能诱导粘膜、体液及细胞免疫,不仅其自身能够产生免疫效应,而且还能携带外源基因诱导宿主特异性应答,是具有广泛应用前景的疫苗载体。本文从减毒致弱菌株构建、外源基因高效表达等方面综述了减毒沙门氏菌载体构建策略的新进展,进而对减毒沙门氏菌活载体应用中待解决的科学问题进行了归纳。     

减毒沙门氏菌为载体的草鱼口服生长抑素DNA疫苗的构建及其稳定性

将生长抑素(SS)和乙肝表面抗原基因(HBsAg)融合后，插入真核表达载体pcDNA3，构建成pcDNA3-SS，再转化减毒沙门氏菌(S．typhimurium,dam^-和phop^-)，构建了以减毒沙门氏菌为载体的生长抑素口服DNA疫苗ZJ111／pcDNA3-SS，并通过体外传代、灌服草鱼检验了ZJ111／pcDNA3-SS的侵袭力及体外和侵入草鱼体内过程中的德定性。对草鱼肝脏和脾脏分离菌的生化特性检验和特异性PCR鉴定表明，ZJ111／pcDNA3-SS能很好地侵入草鱼体内；对在Amp^ 、Amp^-平板上传5、10代和灌服7d后草鱼肝、脾脏分离的减毒菌抽提重组质粒进行PCR和酶切鉴定表明．减毒菌中的重组质粒在体外和侵入草鱼体内过程中具有较好的稳定性。     

减毒沙门氏菌载体的研究进展

减毒沙门氏菌作为载体具有无可比拟的优越性,同时也有很多缺点,在不断解决这些缺点的同时使其更加完美,下面就减毒沙门氏菌载体的优缺点及应用作一个简要的总结。     

细菌重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗研究进展

鼠伤寒沙门氏菌 ( St)是一种肠道致病菌 ,通过基因突变可构建许多鼠伤寒沙门氏菌减毒株 ,例如 :X40 72、X42 17、X45 5 0、X4989、X4990、 X40 64、 SL 3 2 61、 GID10 1、 GID10 5、GID10 6和 BRD5 0 9等 ,它们均是两个或多个基因的精确突变 ,其基因型和表型均很稳定 ,可用作构建细菌性疫苗的表达载体。国内外学者相继研制了肺炎链球菌、结核杆菌、百日咳杆菌、产单核细胞李斯特菌、鼠疫耶尔森菌、土拉弗郎西斯菌、铜绿假单胞菌、淋病奈瑟菌、牛布氏杆菌、破伤风梭菌、炭疽芽孢杆菌、沙眼衣原体和猪肺炎支原体等细菌的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗。文章着重讨论了这些疫苗的构建及其免疫机制等方面的研究进展 ,从而为新型菌苗的研制提供一种新的思路     

携带新城疫病毒F基因DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性

根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光试验检测出F基因在COS-7细胞中的表达产物。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)。重组菌以109CFU/只的剂量2次免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDVF蛋白的血清抗体和小肠粘膜抗体应答,SL7207(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于SL7207(pVAX1)组(P<0.05)。将SL7207(pVAX1-F)以109CFU/只剂量口服免疫1日龄雏鸡,免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)免疫组对鸡具有良好的保护率(77.27%),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能成功释放所携带的质粒,并能刺激机体产生免疫应答,可对NDV强毒攻击提供良好的免疫保护作用,提示该疫苗候选株对新城疫的控制有重要应用前景。     

应用于兽用疫苗研发的病毒载体研究进展

对应用于兽用疫苗研发的病毒载体,包括痘病毒载体、疱疹病毒载体、腺病毒载体、杆状病毒载体、副粘病毒载体、弹状病毒载体、甲病毒载体、冠状病毒载体、反转录病毒载体、黄病毒载体等DNA和RNA病毒载体的研究进展进行了综述,以期为我国基因工程活载体疫苗研发工作提供参考.     

减毒沙门氏菌运送的口服DNA疫苗研究进展

DNA疫茁被誉为疫苗技术领域一场新的革命,但如何优化质粒DNA的免疫途径和运送方法以激发有效的免疫应答成为研究的热点.采用减毒胞内菌通过黏膜自然感染途径运送DNA疫苗成为近年来研究的热点[1].沙门氏菌是一类重要的人兽共患病原菌,目前利用它作为载体原核表达各种外源抗原已得到广泛的研究并取得良好的免疫效果;而利用沙门氏菌作为DNA疫苗运送载体的研究方兴未艾,已显示出诱人的前景.本文就减毒沙门氏菌作为外源DNA运送系统的入侵途径、诱导产生免疫应答的机制以及免疫预防传染病等方面的应用作简要综述.     

减毒鸡沙门氏菌疫苗株97A安全性评价

鸡白痢（pullorum disease）和禽伤寒（typhus avium）是分别由鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌感染引起鸡的一种败血性疾病，我国对其控制主要采用检疫淘汰的方法，并使用抗生素预防和治疗。但就目前现状而言，采取淘汰清除措施来消灭沙门氏菌，条件还不成熟，加之抗生素治疗也存在诸多弊端，因此，有必要探寻新的防制途径。     

减毒沙门菌在禽用疫苗应用中的研究进展

减毒沙门菌感染宿主细胞后,可诱导机体产生强烈的体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫反应,不仅可以用作疫苗,而且也是理想的疫苗载体.文章对禽用疫苗中的减毒沙门菌活疫苗、减毒沙门菌携带的重组疫苗和DNA疫苗的研究进行了综述,以期为新型禽用疫苗的研究提供参考.     

核酸疫苗的运送载体-减毒鼠伤寒沙门氏菌

以染色体-质粒平衡致死系统为特征的减毒鼠伤寒沙门氏菌是一种有效的基因递呈载体,突变菌体通过入侵到宿主的派伊尔氏结,进而被抗原递呈细胞如树突状细胞和巨噬细胞吞噬,最终将突变菌体携带的外原基因导入真核细胞并在其中表达,从而诱导机体产生针对外原基因的黏膜、体液和细胞免疫应答,期间,减毒沙门氏菌起到免疫佐剂的作用。这为发展高效免疫,低成本的口服活疫苗提供了一个新的思路。文章着重就沙门氏菌的减毒基因?平衡致死系统以及免疫应答的机制等做以综述。     

外源基因在减毒沙门氏菌载体中的遗传稳定性和表达

减毒沙门氏菌接种机体后,能够诱导自身及所携带的外源基因免疫,是具有前景的重组疫苗。文章简要介绍了减毒沙门氏菌菌株及外源抗原基因表达产物的免疫应答,重点讨论了提高外源基因在沙门氏菌中的稳定性和表达量这两方面问题。     

减毒沙门氏菌的研究动态及其在家禽业中的应用

沙门氏菌属（Salmonella）是一群寄生于人和动物肠道内的无芽孢直杆菌，革兰氏阴性，生化特征和抗原结构相似，兼性厌氧。绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性，能引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病，并为人类食品中毒的主要病原之一，在医学、兽医和公共卫生上均十分重要。肠道沙门氏菌（Salmonella enterica）是沙门氏菌属的主要成员之一，根据血清型和宿主不同，可引起不同的临床表现：从轻度腹泻到严重的系统感染如肠炎、伤寒等一系列疾病。