连翘提取液中连翘苷和总黄酮的含量测定与抗氧化活性的研究

[目的]测定连翘不同部位中连翘苷和总黄酮的含量,研究其抗氧化活性,并分析连翘苷和总黄酮含量与连翘提取液抗氧化活性的关系。[方法]采用超声波辅助法提取连翘提取液中连翘苷和总黄酮,采用HPLC法测定连翘苷的含量,采用比色法测定总黄酮的含量,采用DPPH.清除法评价其抗氧化活性。[结果]连翘不同部位提取液中连翘苷含量大小顺序为新叶老叶花果实,总黄酮含量大小顺序为花新叶老叶果实;连翘不同部位提取液都具有较高的抗氧化活性,抗氧化性大小顺序为花果实新叶老叶。[结论]连翘花、果实和叶提取物都具有较强的抗氧化活性。连翘花、叶提取物中主要抗氧化活性成分是总黄酮;连翘果实中主要抗氧化活性成分是总黄酮和连翘酯苷。     

洛南连翘果实连翘苷和连翘酯苷提取方法研究

以洛南连翘果实为材料,用甲醇和乙醇分别作溶剂,超声波辅助下进行单因素试验及正交试验,对溶剂浓度、提取时间、料液比、超声功率进行研究,旨在优化连翘苷、连翘酯苷A提取工艺。得出影响连翘苷、连翘酯苷A得率的因素重要性为:料液比超声功率溶剂浓度提取时间。甲醇法最佳提取条件为1∶10料液比、70%甲醇、80w功率、70min;乙醇法最佳提取条件为1∶10料液比、70%乙醇、100w功率、60min,且甲醇法优于乙醇法。     

商洛连翘果实紫云英苷提取方法研究

本文旨在研究商洛连翘果实紫云英苷提取工艺的较优方案。以乙醇和丙酮作为两种提取溶剂并采用超声波辅助对商洛连翘果实中紫云英苷进行提取,进行单因素试验和正交试验;紫外分光光度法测定紫云英苷含量;考察提取时间、提取温度、料液比3个因素对提取率的影响程度,选取较优提取方案。结果表明:乙醇法和丙酮法中各因素对紫云英苷得率影响程度为:料液比提取时间提取温度。采用乙醇提取法得出在70℃下,以1∶25的料液比提取50 min为最佳提取工艺方案,紫云英苷得率为0.526 mg·g~(-1)。采用丙酮提取法得出在75℃下,以1∶20的料液比提取70 min为最佳提取工艺方案,紫云英苷得率为0.213 mg·g~(-1)。比较两种提取方法得出乙醇法优于丙酮法,研究结果可作为商洛连翘果实中紫云英苷提取的技术参考。     

微波辅助提取贯叶连翘总黄酮的工艺研究

[目的]探讨贯叶连翘中总黄酮的微波辅助提取优化工艺条件。[方法] 采用正交试验方法,考察微波功率、提取溶剂浓度、液固比、提取时间对总黄酮含量的影响,确定微波辅助提取贯叶连翘总黄酮的最佳工艺条件,并与超声波提取法、索氏提取法进行比较。[结果] 微波辅助提取贯叶连翘总黄酮的最佳条件为乙醇溶液的体积浓度为70%、液固比为30∶1、微波功率450 W、微波提取时间5 min,在该条件下贯叶连翘总黄酮得率为6.02%。微波辅助提取5 min与索氏法提取4 h、超声波法提取1 h得率相当。[结论] 微波辅助提取法具有快速、高效、节能、选择性好等特点。     

HPLC测定连翘叶不同提取物中连翘苷的含量比较

采用C18柱,(250× 4.6mm,5μm),选用乙腈—水(21∶79)为流动相,检测波长为277nm,测定连翘叶三种提取物中连翘苷的含量.结果表明连翘苷的量在0.475fg—2.375μg之间线性关系良好,相关系数r=0.9986,平均回收率为100.1％,RSD=1.88％.结论:运用高效液相色谱法测定连翘叶不同提取物中连翘苷的的含量,结果表明三种连翘叶提取物中甲醇提取物的连翘苷含量最高,与乙醇提取物含量接近,而与水提物含量差异较大.     

连翘果实连翘酯苷提取及复配保鲜喷洒液应用研究

以商洛连翘果实为原料,采用超声辅助乙醇提取响应面优化连翘酯苷提取工艺,在连翘酯苷提取物抑菌实验的基础上,以氯化钙、植酸、柠檬酸为复配物,确定最佳保鲜喷洒液配方。结果表明:固定乙醇体积分数为60%、提取温度为50℃的前提下,优化后的提取条件为超声功率150W、提取时间50 min、料液比1∶15,连翘酯苷提取率为5. 852%;最佳保鲜喷洒液配方为2%连翘酯苷提取物+1%氯化钙+0. 15%植酸+2%柠檬酸,对圣女果具有较好的保鲜效果,可适当延长保藏时间。研究结果可为商洛连翘果实中连翘酯苷在食品保鲜方面的应用提供技术参考。     

高效液相色谱法同时测定连翘中连翘酯苷A、连翘苷和表松脂素含量

目的:采用高效液相色谱仪,同时测定连翘中3种活性成分:连翘苷、连翘酯苷A和表松脂素含量。方法采用Thermo C18Column(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-水进行梯度洗脱;柱温30℃;流速1 m L·min-1;检测波长为203 nm。结果 3种活性成分(连翘苷、连翘酯苷A和表松脂素)具有良好的线性关系:连翘酯苷A 0.168~4.200μg(r=0.9998)、连翘苷0.00975~0.24375μg(r=0.9995)和表松脂素0.03~0.75μg(r=0.9999);平均加样回收率分别为:99.44%、99.84%、100.17%,RSD分别为1.82%、2.13%和1.50%。结论:该法测定样品,具有结果准确、重复性好、操作方便和实验条件易于满足等优点。     

商洛连翘中连翘苷和连翘酯苷A含量比较研究

使用高效液相色谱法(HPLC),对比8、9和10月份商洛连翘叶和果实中连翘苷及连翘酯苷A的含量,以探究主要次生代谢产物在连翘成熟期中积累量的变化。研究显示,8-10月连翘苷和连翘酯苷A在叶中的积累逐步增加,而果实中含量则变化不大;连翘同一部位中连翘苷和连翘酯苷A比例的动态变化显示,连翘果实中连翘酯苷A是连翘苷的13倍左右,而在连翘叶中则只有3倍左右。通过比较连翘叶和果实中连翘苷和连翘酯苷A含量变化,可以更加清楚了解主要有效成分的积累变化,为商洛地区连翘采收期选择及规范化生产提供借鉴。     

甲醇提取连翘苷的工艺优化研究

以连翘为原料,通过单因素试验及正交试验研究了不同因素对提取连翘苷得率的影响,确定了甲醇提取法提取连翘苷的最佳工艺参数。结果表明,影响连翘苷的最佳提取工艺因素为提取时间料液比提取次数,最佳提取工艺条件为A2B2C2。即,提取条件在提取时间2 h,料液比1∶20,提取次数为3次的条件下得率最高为1.21%。     

不同产地连翘中连翘苷含量差异比较

[目的]对不同产地连翘中的主成分连翘苷的含量进行比较。[方法]用薄层色谱法对连翘中主成分进行定性分析并用高效液相色谱法对不同产地的连翘中连翘苷含量进行测定。[结果]从连翘中分离得到一种化合物,经鉴定为连翘苷,并测定到来自山西的连翘中连翘苷含量接近河南的2倍,来自云南的连翘中连翘苷含量略低于河南,说明不同产地的连翘中连翘苷含量有明显的差别。其主要原因是由于连翘生产地生态环境的影响以及栽培管理措施的不同。[结论]试验结果对扩大连翘产区,保证连翘的质量和提高连翘临床应用等有着重要的意义。     

商洛连翘种子品质检验与质量标准研究

为了建立商洛连翘种子质量分级标准,以便控制其质量,规范种子供需市场,采用连翘种子检验方法,测定不同来源连翘种子的发芽率、千粒重、净度、含水量和生活力等指标,结果表明:商洛地区连翘种子的净重为50%~58%,平均值为48.35%;千粒重为2.7244~2.8312 g,平均值为2.7687 g;含水量为5.69%~6.37%,平均值为6.12%;发芽率为26.69%~50.00%,平均值为42.0%;5 d内的发芽势为0~20%,平均值为8%。种子的颜色为褐色和黑色2种,其中以褐色种子为佳。根据K类中心聚类分析结果,最终确定了以发芽率和千粒重2项指标为主要标指,以净度和含水量为参考指标的4项指标3个等级的连翘种子质量分级标准,分为1、2、3三个等级。     

不同加工方式对连翘药材品质的影响

为明确不同加工方式对连翘药材品质的影响,以生晒法为对照,研究了煮-晒、蒸-晒、煮-烘和一体化机器加工方式对连翘水分、总灰分、醇溶性浸出物、连翘苷和连翘酯苷A含量的影响。结果表明:不同加工方式下,连翘药材水分和总灰分含量与对照差异不显著;一体化机器加工的连翘药材中醇溶性浸出物、连翘苷和连翘酯苷A含量显著高于其他加工方式;煮-晒、蒸-晒和煮-烘加工方式下,连翘药材中醇溶性浸出物和连翘酯苷A含量均显著高于对照。不同加工方式对连翘药材品质影响差异较大,各指标都达到《中国药典》规定范围内,一体化机器加工的连翘药材品质最优,煮-晒、蒸-晒和煮-烘方式次之,生晒方式效果最差。     

连翘适宜采收期研究

[目的]确定连翘的适宜采收期。[方法]以太行山道地产区连翘为研究对象,对不同时间采收的连翘进行鉴别和分析。[结果]随着采收时间的延后,连翘中浸出物、连翘苷、连翘酯苷A含量均呈现降低趋势,但6月中旬到7月初采收的连翘的性状和理化鉴别不符合《中国药典》2015年版要求。[结论]综合考虑连翘药材的性状、理化鉴别、水分、总灰分、浸出物、连翘苷、连翘酯苷A等指标,确定连翘适宜的最佳采收期为7月中下旬。     

氟苯尼考单用及联用对爱德华氏菌的体外抑菌试验

为进一步了解爱德华氏菌的药物敏感性,采用肉汤稀释法测定氟苯尼考、恩诺沙星、多西环素、环丙沙星、大黄、黄连、连翘、黄芩等8种药物单用或分别与氟苯尼考联用对斑点叉尾鮰爱德华氏菌的最小抑菌浓度（MIC）,并计算氟苯尼考与其他7种药物联用的抑菌浓度指数（FIC）。结果表明,8种药物体外单用对爱德华氏菌均具较强杀菌能力,其MIC依次为：氟苯尼考0.13μg/mL、环丙沙星0.03μg/mL、恩诺沙星0.25μg/mL、多西环素0.31μg/mL、黄芩13.33mg/mL、连翘20.00 mg/mL、黄连30.00 mg/mL、大黄33.33 mg/mL;药物联用时,氟苯尼考分别与多西环素、黄连联用时呈相加作用;分别与恩诺沙星、环丙沙星、大黄、连翘及黄芩联用则均呈无关作用。     

连翘叶活性成分不同提取方法的研究

[目的]探讨连翘叶活性成分的最佳提取方法。[方法]分别以黄酮类、木脂素类和三萜酸类提取率和含量为指标，考察有机溶剂回流提取法、索氏提取法、微波提取和超声提取方法进行对比研究。[结果]超声提取法对黄酮类和木脂素类的提取效果最佳；有机溶剂回流提取法对三萜酸的提取效果最佳。[结论]试验探讨了连翘叶活性成分的最佳提取方法，为工业生产提取提供了理论依据。     

3种园林灌木幼苗对干旱胁迫的生理响应

针对中国北方城市干旱缺水、园林绿地植物难以保证及时灌溉的现象,选择2年生灌木金叶女贞Ligustrum viearyi,连翘Forsythia suspensa,紫薇Lagerstroemia indica．采用盆栽方法测定了土壤自然干旱胁迫过程中影响各树种抗旱性的主要生理生化指标,利用隶属函数法对3种园林植物幼苗进行综合评定。结果表明：随土壤水分胁迫的加重,金叶女贞的叶绿素质量分数先升高后降低再升高,连翘先降低后升高．紫薇呈先升高后降低的趋势。金叶女贞和连翘在不同胁迫时期的叶绿素质量分数达到显著差异水平：金叶女贞在遭受干旱胁迫后叶肉组织相对电导率呈升高—降低—升高,连翘先降低后升高,紫薇则是逐渐升高的趋势,紫薇和连翘在不同胁迫时期,相对电导率均达显著差异水平;金叶女贞的超氧化物歧化酶活性先升高后降低,紫薇则呈先降低后升高,连翘呈升高—降低—升高趋势,3个树种均达到显著差异;可溶性蛋白质量分数均呈先下降后上升的趋势,连翘达差异显著水平;脯氨酸质量分数金叶女贞呈降低—升高—降低,连翘和紫薇则是一直升高的趋势．紫薇在不同时期达到显著差异水平。综合评价结果表明,3种灌木的抗旱性强弱为：金叶女贞＞连翘＞紫薇。图5表1参17     

黄皮与山黄皮不同部位黄酮、多酚含量及抗氧化活性比较

【目的】对黄皮与山黄皮共5个品种的不同部位进行黄酮、多酚含量及抗氧化活性比较,为黄皮属植物资源的开发利用提供理论依据。【方法】以香蜜黄皮、鸡心黄皮、龙州山黄皮1号、YYS-002和龙州单核山黄皮为试验材料,对其叶、茎、果核及果皮部位采用NaNO₂-AlCl₃-NaOH测定总黄酮含量、Folin-Ciocalteu法测定总多酚含量,再以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+)清除率评价其抗氧化活性,并采用Pearson相关分析法分析其总黄酮、总多酚含量与各项抗氧化活性指标的相关性。【结果】5个品种中叶、茎、果核和果皮各部位的总黄酮含量介于0.34~86.23 mg/g,总多酚含量介于0.54~43.33mg/g,其中黄皮品种的含量普遍低于山黄皮品种,不同部位的含量排序整体表现为果皮>叶>茎>果核。综合对比,龙州单核山黄皮的总黄酮、总多酚含量均高于其他品种,果皮和叶部位的总黄酮和总多酚含量显著高于其他部位(P<0.05)。抗氧化活性结果表明,龙州单核山黄皮果皮的DPPH·、·OH和ABTS+清除率均最高,分别为96.01%、92.23%和76.96%,分别与0.03、0.03和0.01 mg/g抗坏血酸(Vc)清除率相当,对应半清除率浓度(IC₅₀)分别为0.33、0.45和0.52 mg/mL;不同部位的各抗氧化活性强弱也整体表现为果皮>叶>茎>果核。相关分析结果表明,总黄酮、总多酚含量与各抗氧化活性指标均呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】龙州单核山黄皮果皮抗氧化能力最高,可作为天然抗氧化剂资源加以深入研究开发。黄酮和多酚类物质均为黄皮与山黄皮发挥抗氧化活性的相关物质基础,且多酚对抗氧化活性影响较大。     

不同花型连翘花粉活性比较

[目的]比较不同花型连翘花粉的活性.[方法]应用TTC液染色法、I2-KI染色法和醋酸洋红染色法3种方法测定连翘短花柱二雄蕊花、短花柱三雄蕊花、长花柱二雄蕊花和长花柱三雄蕊花4种花型的花粉生活力,并应用离体培养法比较短花柱二雄蕊花与长花柱二雄蕊花在不同条件下的萌发率.[结果]浓度1％醋酸洋红染色法是连翘花粉活力的最佳检测方法.二雄蕊花的花粉活性高于三雄蕊花;当雄蕊数相同时,短花柱花的花粉活性高于长花柱花.短花柱二雄蕊花和长花柱二雄蕊花2种花型花粉离体萌发的适宜组合为浓度15％蔗糖＋浓度0.01％硼酸＋浓度1.5％琼脂.[结论]试验比较了不同花型连翘花粉的活性,为连翘的进一步开发利用提供了依据.