牛初乳免疫球蛋白IgG单克隆抗体的制备

为了制备牛初乳免疫球蛋白IgG单克隆抗体,试验利用标准IgG蛋白作为免疫原,免疫6周龄Balb/c雌性小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术,通过间接ELISA法筛选,采用有限稀释法,经过3次克隆筛选,获得2株稳定分泌抗IgG蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为E7和D9,并进行了亚类鉴定.结果表明:该杂交瘤细胞培养上清液抗体效价抗体...     

牛初乳中免疫球蛋白IgG的检测

牛初乳中免疫球蛋白IgG的检测@马玉平$黑龙江省完达山乳业股份有限公司!黑龙江密山158308 @姜瞻梅$东北农业大学!黑龙江哈尔滨150030 @宋淑珍$黑龙江省完达山乳业股份有限公司!黑龙江密山158308     

牛初乳免疫球蛋白(IgG)的测定

实验用两种方法测定了牛初乳中IgG的含量 ,并对结果进行了比较。结果表明 :第 1天初乳中IgG含量最高 ,为43 2 7mg/ml,之后迅速递减 ,到第 6天基本降至常乳水平。两种方法测定的结果之间无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,但免疫比浊测定法稳定 ,重复性好 ,精确度高。     

哺乳仔猪口服牛初乳IgG效果观察

从22窝初生仔猪中选取120头,按品种、体重、性别均匀地分成3个组,24h内分别按0mg、1 000mg、2 000mg剂量灌服牛初乳IgG,测定仔猪21日龄断奶个体重,计算0-21日龄平均日增重,统计仔猪0-21日龄腹泻发病率和死亡率。结果表明,随牛初乳IgG饲喂剂量的增加,21日龄断奶平均个体重和0-21日龄平均日增重均逐渐降低,而腹泻发病率和死亡率则有所提高,但组间差异均不显著(p>0.05)。     

哺乳仔猪口服牛初乳IgG效果观察

从22窝初生仔猪中选取120头，按品种、体重、性别均匀地分成3个组，24h内分别按0mg、1000mg、2000mg剂量灌服牛初乳IgG，测定仔猪21日龄断奶个体重，计算0-21日龄平均日增重，统计仔猪0-21日龄腹泻发病率和死亡率。结果表明，随牛初乳loG饲喂剂量的增加，21日龄断奶平均个体重和0-21日龄平均日增重均逐渐降低，而腹泻发病率和死亡率则有所提高，但组间差异均不显著（p〉0．05）。     

牛初乳中活性物质IgG含量分析

通过对产犊后前四天内牛初乳活性物质(IgG)含量的检测，分析牛初乳中活性物质的变化规律及冻结、巴氏杀菌对其影响。     

抗鸽IgG单克隆抗体的制备及鉴定

鸽卵黄经硫酸铵盐析、酒精沉淀及凝胶（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００）柱层析后,得到较纯的鸽ＩｇＧ,以其免疫ＢＡＬ Ｂ／Ｃ小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０）进行细胞融合,经过酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）筛选,得到两株能稳定分泌抗鸽ＩｇＧ的单克隆抗体（以下称单抗）,分别命名为１Ｅ５和４Ｃ２。经亚类鉴定,该类抗均为ＩｇＧ１亚类。在鸽ＩｇＧ包被的９６孔板上用间接用ＥＬＩＳＡ方法测定单抗腹水的ＥＬＩ     

超滤法对牛初乳中IgG含量和活性的影响

本文研究了超滤分离牛初乳乳清中IgG的方法,测定不同超滤温度和压力条件下IgG含量和活性的变化情况。结果表明：通过超滤可将乳清中IgG含量提高一倍左右;超滤压力增加,IgG含量相应增加．IgG活性基本不变。在压力0．08MPa时,IgG含量为45．98mg／mL,活性未变,仍为1024;超滤温度增加,初乳中的IgG含量先有较小增加然后减少,IgG活性则下降。在超滤温度40℃时,IgG含量最高,达到46、85mg／mL,IgG活性未有变化。     

抗鸡IgG单克隆抗体酶结合物的制备

抗鸡ＩｇＧ单克隆抗体酶结合物的制备张春红，杜伟贤，伍惠卿等（广东省农科院兽医研究所广州５１０６４０）近年来，核酸探针等一系列新技术不断问世并逐步投入了生产应用，但在兽医临床体液免疫效果及疫病情况监测量方面，血清抗体（主要是ＩｇＧ）水平的测定仍以其准确...     

琼脂单、双扩散法测定牛初乳IgG的应用分析

对琼脂单、双扩散法在牛初乳IgG测定中的应用进行分析，建立的单扩散标准曲线为y=17.193x 8.005，r=0.9913，板间变异系数2.8%-5.5%，板内变异系数2.63%-5.33%，回收率87.0%-127.0%。双扩散中标准牛IgG标记为效价1：2222.2，批内变异系数0-22.2%，批间变异系数18.8%，回收率87.5%。统计分析表明两种方法测定值无显著差异（α=0.05）。相比而言，单扩散法精密度好，双扩散方法更简便，抗体试剂用量为单扩散法的2%-5%，检测成本低。生产企业可以根据需要选择应用。     

抗鸡IgG单克隆抗体的研究

利用小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞系与纯化鸡IgG免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,成功地建立了5株能持续分泌抗鸡IgG单克隆抗体(McAbs)的杂交瘤细胞株。选择产生抗体效价高、生长快的C_(44)株,扩大培养后注射于小鼠制备腹水,经硫酸铵盐析粗提后,用HRP标记,制备出McAbs酶结合物。将制备的McAbs酶结合物和多克隆抗体(PcAbs)酶结合物,采用间接ELISA,对35份鸡血清中鸡新城疫病毒(NDV)抗体以及19份鸡血清中鸡嗜血杆菌(HG)抗体进行检测,McAbs和PcAbs两者的相关系数分别为0.928和0.921,证明制备的抗鸡IgG McAbs具有特异性强、效价高的特点.     

牛初乳免疫球蛋白对仔猪血清IgG含量和增重的影响

试验选用120头大白仔猪,随机分为3组。A组为对照组,饲喂生理盐水,其余各组均于出生后24 h之内饲喂不同剂量的牛初乳免疫球蛋白制剂,观察对仔猪5、10日龄血清中牛IgG和猪IgG含量以及断奶时增重的影响。结果表明,饲喂牛初乳免疫球蛋白制剂4 g的仔猪,其5、10日龄血清中牛IgG和猪IgG含量显著高于对照组(P<0.05),断奶时增重显著高于对照组(P<0.05)。     

牛初乳中常规成分及免疫球蛋白含量的测定

对得益乳业牛场的中国荷斯坦奶牛1-7d内初乳中的常规成分及免疫球蛋白含量进行测定。结果表明：牛初乳中蛋白质、脂肪、乳糖、灰分、密度以及免疫球蛋白含量均在分娩后48h内发生显著变化（P〈0．05），72h后趋于平稳，到第5天时乳中各种营养成分接近常乳水平（P〉0．05）。     

牛初乳乳清制备的研究

本试验研究了牛初乳乳清的实验室提取制作方法,并通过调整凝乳温度、CaCl2及凝乳酶的添加量,考查不同条件对凝乳时间的影响;通过正交试验,得到了最佳的试验条件,并对试验中出现的问题及可能在生产中出现的情况进行了分析。     

牛初乳IgG对仔猪增重和血液指标的影响

选取10窝1日龄大白仔猪60头,随机分为3组。按不同剂量(0、500mg、1000mg)灌服牛初乳IgG,分别测定不同处理组仔猪日增重、血清总蛋白含量、血清牛IgG浓度,旨在探讨新生仔猪吸收异源IgG能力及异源IgG对仔猪生产性能及机体免疫功能的影响。结果显示,灌服IgG1000mg的仔猪,0～15日龄日增重、5、10日龄血清总蛋白含量显著高于对照组(0)(P<0.05),实验组5日龄血清牛IgG浓度较高,并能有效降低仔猪腹泻头次。     

三聚氰胺IgG型单克隆抗体的制备及鉴定

采用改进的重氮法合成三聚氰胺免疫抗原(三聚氰胺-BSA)和三聚氰胺包被抗原(三聚氰胺-OVA),以三聚氰胺-BSA免疫BALB/c小鼠,选取间接ELISA测定效价达8000以上的BALB/C小鼠进行融合,用HAT和HA选择性培养基筛选后,得到一株稳定分泌抗三聚氰胺抗体的杂交瘤细胞株命名为3G4,经多次传代培养和反复冻存复苏后能够稳定分泌抗体,在BALB/C小鼠体内诱生腹水,用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化腹水。用间接ELISA方法测定杂交瘤培养上清效价为1:1600,腹水效价为1:2.048×10~6,抗体亚类为IgG2b。     

牛初乳乳清制备工艺研究

为优化乳清制备工艺,以脱脂牛初乳为原料,研究通过酸沉酪蛋白方法制备高质量乳清。综合考虑酸的种类、强弱和乳清中IgG的活性变化,确定了酸沉酪蛋白的最佳工艺条件为：0．8mol／L乳酸调脱脂乳pH值至4．3,加水至干物质终质量分数为10％,45℃水浴15min,4000r／min离心5min。经检测所制备的乳清中IgG活性含量仅损失3．05％。     

三聚氰胺IgG型单克隆抗体醛制备及鉴定

采用改进的重氮法合成三聚氰胺免疫抗原（三聚氰胺-BSA）和三聚氰胺包被抗原（三聚氰胺-OVA）,以三聚氰胺-BSA免疫BALB／c小鼠,选取间接ELISA测定效价达8000以上的BALB／C小鼠进行融合,用HAT和HA选择性培养基筛选后,得到一株稳定分泌抗三聚氰胺抗体的杂交瘤细胞株命名为3G4,经多次传代培养和反复冻存复苏后能够稳定分泌抗体,在BALB／C小鼠体内诱生腹水,用辛酸一硫酸铵沉淀法纯化腹水。用间接ELISA方法测定杂交瘤培养上清效价为1：1600,腹水效价为1：2．048×10^6,抗体亚类为IgG2b。