贯叶连翘中金丝桃素的提取分离方法

贯叶连翘(Hypericum perforatum L.)是藤黄科(Clusiaceae)金丝桃属(Hypericum L.)植物贯叶连翘的全草,为多年生草本植物,具有抗菌消炎、收敛止血、消肿止痛等功效[1].国外研究发现,金丝桃素(Hypericin)是贯叶连翘中最具生物活性的物质,其医用价值很高.     

贯叶连翘提取物中金丝桃素的含量测定

本试验旨在建立一种高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定贯叶连翘提取物中金丝桃素含量的方法。采用YMC-Pack ODS-A色谱柱(5μm,150 mm×4.6 mm),以乙腈-0.02M磷酸二氢钠(85∶15)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长588 nm,柱温25℃。结果表明,金丝桃素在6~36μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 6),平均加样回收率为98.86%(n=6),峰面积的相对标准偏差(RSD)为3.15%。此方法专属性强、重复性好,可用于贯叶连翘提取物中金丝桃素的含量测定。     

贯叶连翘中金丝桃素纯化工艺研究

目的:本实验主要对金丝桃素的纯化工艺进行研究。方法:用无水乙醇从贯叶连翘中提取金丝桃素,再用大孔吸附树脂分离金丝桃素,后分别采用明胶水溶液法、pH值法及明胶水溶液+pH值法分离纯化金丝桃素。结果:采用明胶水溶液+pH值法样品中金丝挑素含量最高,平均含量为1.42%。结论:该方法操作简单,成本低廉,金丝桃素收率高,便于规模化生产。     

贯叶连翘提取物中金丝桃苷的含量测定

为建立一种高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定贯叶连翘提取物中金丝桃苷含量的方法。采用博纳艾杰尔Venusil MP C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-1%磷酸(42:58)为流动相,流速1.0 m L/min,检测波长350 nm,柱温25℃,结果表明金丝桃苷在0.025~0.25。mg/m L范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均加样回收率为97.66%(n=6),峰面积的相对标准偏差(RSD)为2.68%。该方法专属性强、重复性好,可用于贯叶连翘提取物中金丝桃苷的含量测定。     

金丝桃素提取、分离方法的研究

目的:研究贯叶连翘中有效成分金丝桃素提取方法。方法:应用有机溶剂溶解法、薄层色谱法、紫外检测、高效液相色谱(HPLC)等方法探讨贯叶连翘中金丝桃素提取方法。结果:用石油醚除叶绿素、花青素,以丙酮为溶剂在60℃水浴中提取贯叶连翘中金丝桃素和酮类衍生物,在真空度为0.07MPa、温度为60℃水浴条件下浓缩。后用100-200目硅胶分离金丝桃素,钢瓶冻干,得含金丝桃素为1.08%深红色产品。     

贯叶连翘研究概况

贯叶连翘（Hypericum perforatum L.）为藤黄科金丝桃属的草本植物,分布于我国河北、河南、陕西、甘肃、山东、新疆、四川等地.传统中医认为贯叶连翘具有清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎的功效.欧洲民间用于治疗创伤.现代研究表明，贯叶连翘具有抗抑郁、抗病毒、抗菌、镇痛等作用。据报道，金丝桃素、伪金丝桃索还具有抗AIDS作用。笔者等从贯叶连翘的化学成分、活性成分提取工艺、贯叶连翘组织培养方面进行论述，为进一步研究贯叶连翘提供参考。     

大孔吸附树脂分离纯化贯叶连翘中的金丝桃素

以贯叶连翘粗提浸膏为材料,考察六种大孔吸附树脂分离纯化金丝桃素的性能。采用静态、动态吸附方法筛选树脂,以中压分离方法确定分离纯化的条件。结果表明:HZ-801树脂以其高吸附率、高洗脱率成为优选的分离填料,其最佳分离纯化条件为:进样液质量浓度为0.1125 g/m L,进样速度为5.0 m L/min、洗脱速度为20 m L/min,0~95%乙醇溶液梯度洗脱,金丝桃素的纯度为79.11%。HZ-801可以较好分离纯化金丝桃素,纯化工艺具有较大实践性及参考价值。     

高效液相色谱法测定贯叶金丝桃粉剂中金丝桃素的含量

为了有效控制贯叶金丝桃粉剂的质量,试验采用高效液相色谱(HPLC)法,流动相为乙腈-水-乙酸铵(三者比例为50∶40∶10;乙酸铵浓度为0.30 mol/L,pH值为3.75),流速为1 mL/min,检测波长为588 nm,测定贯叶金丝桃粉剂中金丝桃素的含量。结果表明:金丝桃素的检测浓度在10～80μg/mL范围内与峰面积的线性关系良好(r=0.999 6),平均回收率为98.3%,RSD=1.14%。说明该方法简便、准确、快速、重复性好,可用于贯叶金丝桃粉剂的质量控制。     

金丝桃素的提取纯化工艺研究

用乙醇从贯叶连翘中提取金丝桃素并对其进行纯化,考察了金丝桃素的工艺流程.用乙醚作为除杂剂,用乙醇热浸贯叶连翘,后浓缩浸提液为浸膏;用热水溶解浸膏,乙酸乙酯萃取,浓缩萃取液为浸膏(粗提物).然后再用乙醇溶解,利用树脂柱层析分离纯化金丝桃素,减压浓缩洗脫液,干燥,即得金丝桃素产品.经HPLC测定,结果表明:该产品中金丝桃素的含量高达1.2% ;该工艺不但有效改善了金丝桃素产品易吸湿、易发粘的缺点,而且具有操作简单,经济易行的特点.     

HPLC法测定金丝桃素浸膏及其预混剂中金丝桃素的含量

金丝桃素是一种天然蒽醌类化合物，其在贯叶连翘中含量仅占万分之几，却具有显著的抗抑郁、抗病毒活性，同时其光敏活性和光动作用也为光化学治疗癌症提供了新的手段，金丝桃素的多种药理作用，使其成为当今国际研究开发热点课题之一。     

RP-HPLC测定贯叶连翘中的金丝桃素含量

采用反相高效液相色谱法测定了贯叶连翘提取物金丝桃素浸膏中金丝桃素的含量。用Kromasil C18(5μm,250×4.6 mm)色谱柱为固定相,乙腈-水(140∶10)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为284 nm。结果金丝桃素的含量为0.914%,平均回收率为96.76%,日内精密度RSD为2.67%,日间精密度RSD为3.65%。     

金丝桃素的提取分离及其药理活性研究现状

金丝桃素为贯叶连翘中抗病毒的活性单体,属二蒽酮类。植物化学和药理学研究发现,金丝桃素具有抗抑郁、抗肿瘤、抗病毒、止血消炎以及光动活性等特点。目前关于金丝桃素的研究,国内多处于药理临床研究阶段,主要集中于肿瘤的辅助治疗和抗病毒研究方面,国外现已将其用于抑郁症、艾滋病等的临床治疗。鉴于金丝桃素突出的抗病毒作用,以及作为癌症的光化学治疗的一种有前途的内源性光敏剂,文章对金丝桃素的分离提取及其多种药理作用做了系统阐述,以期为金丝桃素的基础研究和临床应用提供借鉴和参考。     

金丝桃素的研究进展

金丝桃素是贯叶连翘中最具生物活性的物质,具有抗抑郁、抗肿瘤、抗病毒、止血消炎及光动活性等。在德国,将金丝桃素与蛋白结合,用于治疗艾滋病及甲、乙型肝炎;在美国作为食品添加剂已被广泛应用。金丝桃素具有多种药理活性,目前已成为国内外研究开发的热点。现将近几年金丝桃素的研究进展阐述如下。1金丝桃素的化学结构及特性金丝桃素名为4,4',5,5',7,7'-六羟基-2,2-二甲基-中位-萘并二蒽酮,分子式C30H16O8,属于二蒽酮类化合物,是一种蓝黑色针状结晶体,其熔点是320℃,易溶于吡啶和其它有机胺类,呈橙红色并带红色荧光,可溶于碱水溶液中。pH…     

金丝桃素注射液质量标准的研究

金丝桃素（hypericin，4.4，5，5，7，7一六羟基一2，2一二甲基一中位一萘并二蒽酮）是贯叶连翘Hypericum perforatum L．中最具有生物活性的物质，具有抗抑郁、镇静、抗菌消炎、光敏活性，尤其是抗病毒作用突出。研究表明，由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所从贯叶连翘中提取分离并合成的金丝桃素络合物，具有很强的杀菌和抗病毒作用。笔者等对金丝桃素注射液制备工艺进行了比较。从中选择一种最佳制备工艺，并按照中国药典要求对其质量标准进行了研究。以便将金丝桃素注射液进一步推广应用。     

贯叶连翘引种驯化过程中生理生化特性、活性物质含量及抗氧化能力的变化

为了探明贯叶连翘引种驯化过程中生长适应能力以及活性物质的变化,以野生和栽培盛花期植株为材料,分别对生理生化特性、活性物质含量以及抗氧化能力进行了测定与分析,结果表明,栽培贯叶连翘的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、叶绿素含量和根系活力均高于野生植株,尤其是其盛花期和地上部分干重分别较野生植株提前了7 d和提高了16.67%。总黄酮和金丝桃素含量在栽培和野生植株同一器官中无显著差异;总酚类在野生花中的含量显著高于栽培花,而叶中的含量则相反;野生和栽培植株各器官中,总黄酮和酚类化合物含量在叶和花中的含量显著大于茎,而金丝桃素的含量表现为花>叶>茎。野生和栽培各器官抗氧化能力为叶>花>茎,其中,野生和栽培叶、茎提取液的抗氧化能力无显著差异,而栽培花的抗氧化能力显著大于野生花。以上研究结果表明,贯叶连翘野生转栽培后,不仅具有较好的生长适应能力,而且主要活性物质的积累量及抗氧化能力并未显著降低。该研究结果将对贯叶连翘种植栽培以及保护野生资源具有重要的参考价值和实践意义。     

金丝桃素络合物对大白鼠的亚急性毒性试验

金丝桃素（Hypericin）化合物广泛分布在藤黄科（Clusiaceae）金丝桃属（Hypericum L．）植物中，其中以贯叶连翘（Hypericum perforatum L．）中含量较高。现代研究表明，金丝桃素具有抗抑郁、扰病毒及辅助治疗肿瘤等多种药理作用。为了检测金丝桃素络合物的毒性，对其安全性给予客观的评价，特进行了其亚急性毒性试验，现报告如下。     

超临界CO_2萃取金丝桃素工艺的响应面优化研究

在实验条件下确立了贯叶连翘中金丝桃素超临界CO2萃取的最佳工艺条件。在单因素实验基础上,采用响应面分析法,对影响超临界萃取物中金丝桃素含量的主要因素包括萃取温度、萃取压力与夹带剂浓度(乙醇体积分数)进行优化,建立了影响因素与响应值(金丝桃素含量)之间的函数关系。根据回归方程寻优得出最佳工艺条件。最佳工艺条件为以体积分数78.6%的乙醇作动态夹带剂,萃取温度50.3℃、萃取压力25.29 MPa,在此条件下,设定乙醇流速0.5 mL.min-1、CO2流速2 L.min-1,萃取2 h,超临界萃取物中金丝桃素含量平均达到1.102%,大大高于传统提取方法(碱醇溶液提取),适用于贯叶连翘中金丝桃素的提取。     

金丝桃素的最新研究进展

综述了近年来国内外在金丝桃素的含量及测定方法、提取、毒性及不良反应、药理作用和临床应用等方面的最新研究进展,介绍了金丝桃素抗抑郁、抗癌抗肿瘤、抗病毒(尤其是抗禽流感病毒)等的药理作用及临床应用。金丝桃素对禽流感病毒有极强的杀灭活性,预示着金丝桃素在治疗禽流感方面有着广阔的前景。     

不同收获期贯叶连翘花中抗氧化能力、主要活性物质变化及挥发性组分分离鉴定

为了探明不同收获期(花蕾期、盛花期、结果期)贯叶连翘花中抗氧化能力、总黄酮、酚类和金丝桃素含量等的变化,以栽培花器官为实验材料,采用HPLC和GC-MS等方法对70%乙醇提取液进行测定与分析。结果表明,花蕾期和盛花期贯叶连翘花提取液自由基抑制率(inhibition percentage, I%)和铁离子还原/氧化能力(ferric reducing/antioxidant power, FRAP)均显著高于结果期,花蕾期和盛花期二者之间无显著差异;总黄酮和酚类化合物以及金丝桃素含量均呈现为盛花期>花蕾期>结果期,且在P<0.05水平下达到显著差异;盛花期花中分离鉴定得到37种挥发性化学组分,其中,主要成分有1,1-二乙氧基-乙烷(19.26%)、1-十六醇(17.85%)、β-衣兰烯(10.71%)、(Z, Z)-9,12-十八碳二烯酰氯(8.42%)、十六烷酸乙酯(8.40%)、叶绿醇(5.79%)、石竹烯氧化物(4.56%)等。以上研究结果表明,花蕾期至盛花期采集贯叶连翘花器官较佳,提取液抗氧化能力较强,主要活性物质含量较高,挥发性成分较为丰富,该研究结果将对贯叶连翘生产、大面积种植栽培具有重要的参考价值和实践意义。     

贯叶连翘中金丝桃素的薄层色谱检测

目的:建立贯叶连翘中金丝桃素含量的测定方法。方法:以硅胶GF254为固定相,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇(2:4:1)为展开剂,在588nm波长的条件下进行单波长薄层色谱扫描来测定贯叶连翘中金丝桃素含量。结果 :金丝桃素在0.15-7.5μg范围内呈线性关系,(R=0.99987),平均回收率97.92%,RSD=1.82(n=5)。结论:该方法操作简便、分离效果好、价廉,可用于贯叶连翘中金丝桃素的含量测定及质量控制。