大豆愈伤原生质体的制备和培养方式探究

具有植物细胞全能性的原生质体是探究植物遗传转化和基因功能的理想材料,为了高效率制备大豆原生质体及其稳定培养,以交大05-133大豆未成熟子叶诱导的愈伤组织为材料,采用正交设计,对纤维素酶、果胶酶和离析酶等酶解液成分进行分析,研究原生质体高效制备方法的酶解液配比,同时探讨不同酶解时间对原生质体产量的影响,以确定最佳的原生质体酶解条件;通过对比在低熔点琼脂固体液滴培养与液体培养这两种不同培养方式下细胞的增值速率,以期建立高效的愈伤原生质体再生体系。结果显示,最佳酶解液配比为:2%纤维素酶+0. 1%果胶酶+1%离析酶,在该酶解液配比下酶解5 h,所得到原生质体产量和活力最高,达到(3. 976±0. 86)×10~6个·g~(-1)。用KP8培养基对原生质体进行培养,结果显示固体液滴的培养方式更适合原生质体的分裂,原生质体植板率高于液体培养,并且在25 d内分裂形成致密的细胞团。     

毛叶枣与冬枣原生质体分离体系的建立

研究了毛叶枣及冬枣的原生质体分离条件,为以后应用体细胞融合技术创造优异的毛叶枣体细胞杂种材料提供技术支持。结果表明:枣叶片分离出的原生质体活性显著高于悬浮培养物,但是产量低于悬浮培养物分离出的原生质体。毛叶枣酶解所需酶液最佳浓度为纤维素酶10g/L 离析酶4g/L 甘露醇0.7mol/L;冬枣酶解所需酶液最佳浓度为纤维素酶15g/L 离析酶4g/L 甘露醇0.7mol/L,酶解时间均为14￣16h。     

甲基氨草磷对橡胶树悬浮细胞同步化及微核诱导的影响

植物微原生质体融合(microprotoplast fusion)是将部分基因组转移而又避免染色体损伤的不对称融合技术,微原生质体成功诱导是微原生质体融合的先决条件。本研究在摸索甲基氨草磷(amiprophos-methyl,APM)对橡胶树悬浮细胞有丝分裂中期指数和染色体形态影响基础上,研究了酶解时间及酶解过程中添加APM对微原生质体产量的影响。结果发现,悬浮细胞随APM处理浓度和时间的增加,有丝分裂中期指数先升高再下降,处理12 h时达到最大值;染色体聚集程度也先增加再降低,处理16 h时染色体开始解聚。在酶解过程中添加APM和延长酶解时间会大大降低微原生质体的产量。悬浮细胞经过1 μmol/L APM处理10 h后,酶解10 h,中期细胞可达到79.4%,微核化细胞指数达到7.3%,从而建立了APM诱导橡胶树悬浮细胞同步化及高效获得橡胶树微化细胞的方法。     

番木瓜种子原生质体制备技术的研究

以番木瓜（Carica papaya L.）成熟种子为材料,通过正交和单因素实验研究不同酶液浓度、甘露醇浓度、酶解时间、酶解pH等因素对番木瓜种子原生质体分离的影响。结果表明,高存活的番木瓜种子原生质体分离最佳条件是酶液组成为2.2％纤维素酶+0.6％离析酶、甘露醇浓度为0.7 mol/L、酶解9 h、酶解pH值为5.5。本研究奠定了原生质体遗传转化的基础,为番木瓜种子相关活性物质代谢途径的研究创造了良好的条件。     

咖啡叶片原生质体分离条件的研究

以中粒种咖啡（Coffea. canephora）叶片组织为材料,研究酶液组合、酶解时间、酶液渗透压及预处理措施对其原生质体分离效果的影响,以期确定能够酶解出高数量且高活力的原生质体的酶解条件。结果表明：获得有活力原生质体的最佳酶液组合为2％纤维素酶+0.5％果胶酶+0.3％离析酶,同时酶解时间为20 h、酶液渗透压即甘露醇浓度为0.7 mol/L,预处理措施为黑暗24 h的咖啡叶片组织得到8.1×105个/g、活力达到73％的原生质体。     

大豆幼苗根和叶片原生质的分离与纯化

研究了大豆幼苗根和叶片原生质体的分离、纯化方法及其影响因素.结果表明:适宜大豆根和叶片原生质体分离的酶种类、浓度分别为CPW-13M{CPW(细胞清洗液)+13%(W/V)甘露醇}+3%纤维素酶(cellulose R10)+1.1%果胶酶(macerozyme R-10)+1.0%半纤维素酶(hemicellulase)和0.15%CaCl2·2H2O+9%甘露醇+1%cellulase R-10+0.20%pectolase Y-23,pH 5.8,酶解温度为28℃.在根酶解时间为16 h时,原生质体产量可高达1.46×105个·g-1FW,活力达57.8%;叶片酶解时间为4 h时,原生质体产量可高达1.74×106个·g-1FW,活力达70.3%.对于根而言,从产量和活力两方面考虑,其原生质体用23%蔗糖和CPW-18M混合后的下沉法纯化效果较好,而叶片用25%蔗糖的上浮法纯化效果较好.     

玉米大斑病菌原生质体遗传转化体系的建立

以玉米大斑病菌菌株01-23为出发菌株,对影响原生质体遗传转化的主要条件进行了研究,包括原生质体制备的材料、酶解系统、稳渗剂、载体浓度及线性化程度等。结果表明,改良Fries培养基中培养24 h的分生孢子悬浮液是原生质体制备的首选材料;2%溶壁酶和1%蜗牛酶两种酶混用是最佳的酶解系统;0.7 mol/LNaCl是最适的稳渗剂;环状载体比线性载体转化效率高5倍以上;在载体浓度为100μg/mL时转化效率最高。     

香蕉枯萎菌原生质体形成与再生条件

通过对菌丝菌龄、酶液浓度、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂的种类和浓度等因素的实验研究,得到了一种制备香蕉枯萎菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)原生质体的有效方法,并在固体再生培养基上实现了原生质体的再生,再生率为22.5%。     

橡胶树PR107原生质体的分离和培养研究

以橡胶树PR107花药愈伤组织建立的胚性悬浮细胞为材料,进行原生质体的酶解分离和培养研究。结果表明：在酶组合为纤维素酶1.5 %+果胶酶0.15 %+离析酶0.5 %的酶解处理下,继代培养第6天、直径小于0.5 mm悬浮细胞团获得最高产量的原生质体,达到2.2×107个/mL PCV;原生质体在看护培养基上培养1周后观察到细胞开始发生分裂,培养2周后细胞分裂形成含8-10个细胞的小细胞团。看护培养45 d后原生质体持续分裂并发育成肉眼可见的小愈伤组织。     

拮抗性大豆根瘤菌原生质体制备研究

选用具有拮抗作用的根瘤菌L396,对影响该菌原生质体制备的几个重要因素进行了研究。结果表明:制备原生质体的最佳菌龄为对数生长中期,培养液中加入0.5%青霉素可以促进原生质体的形成,在溶菌酶浓度1.5 mg.mL-1、酶解温度为35℃的情况下可以较快较好的产生原生质体,同时显微观察了原生质体的释放过程。     

花生几个品质性状与农艺性状的相关研究

不同类型（龙生型、普通型、珍株豆型）花生几个品质性状与农艺性状的相关研究表明：花生品质性状与农艺性状间的相关性各异。在龙生型、普遍型有可能同时获得高产高蛋白质的材料；在龙生型和珍珠豆型中有希望选育出高产高亚油比的材料。在普通型、珍珠豆型中存在获得高脂肪高油亚比材料的可能性。     

我国花生产量波动与气象条件关系的初步分析

分析全国和某一省、市、自治区的花生产量时间序列,花生产量曲线上升而在年际间有波动。对产量负波动随时间的变化进行估算求得了负波动显著的年份。明确降水和温度的波动所引起的灾害性气象是产量波动的原因。     

花生高产种质的耐铝毒能力评价

以人工模拟铝毒胁迫盆栽试验,研究了８个不同花生高产早熟种质对铝毒胁迫的反应,吕毒胁迫对花生的主要性状有的抑制作用,鉴定出具有较强耐铝毒胁迫的９３－８１等材料,并通过分析不同性状与铝毒胁迫下产量稳定性的相关性,明确了根系体积和重量是花生耐酸性评价和选择最重要性状,提出了花生耐酸性的综合评价方法 。     

预处理方式对大豆原生质体产率及其脂肪酸类型的影响

本文研究了不同预处理条件对大豆原生质体的产率和脂肪酸类型的影响。研究结果指出:新生叶片及子叶的原生质体产率较高。缺水处理使子叶细胞、原生质体中的脂肪酸脱饱和程度减弱,不饱和脂肪酸向饱和脂肪酸转化,饱和脂肪酸含量增加。而叶肉细胞原生质体中则不存在这种变化趋势。     

不同花生品种经济用水指标研究

研究了水分对3个花生品种(鲁花11、鲁花14号、花育16号)农艺性状及耗水特点的影响，在此基础上对各水分处理的经济效益进行了综合评价。结果表明：花生的荚果产量均随土壤相对含水量的上升呈先升后降的趋势，其中鲁花11号和花育16号在土壤相对含水量70％时荚果产量最大，而鲁花14号的荚果产量在土壤相对含水量60％最大。耗水量与水分生产率呈负相关，鲁花11的抗旱性最强，鲁花14号次之，花育16号最差。就经济效益而言，鲁花14号在土壤相对含水量为60%时经济效益最佳，而鲁花11和花育16号均在土壤含水量为70％时最佳，因此鲁花11号和花育16号的高产高效适宜土壤相对含水量为70％，而鲁花14号的为60％左右。     

Digestion in the stomach and intestines of sheep receiving diets of red clover silage with various supplements

Three castrated male sheep fitted with rumen and duodenal re-entrant cannulae were used in a 3×3 Latin Square experiment to investigate the digestion of three diets of red clover silage with supplementary concentrates containing barley or barley and groundnut meal or barley and urea. The supplements were designed to be isocaloric and the groundnut meal and barley-urea mixtures to be isonitrogenous. There were no significant (P >0.05) differences between treatments in the digestibility of organic matter (mean value 71.2%) or in the percentage of dietary organic matter digested in the stomach (mean value 53.6%) and diiferences between treatments in the concentrations of total and individual short-chain fatty acids in the rumen were small. The nitrogen intake for the barley treatment was 19.41 g/d and that for the groundnut meal and barley-urea treatments were 23.36 g/d and 23.05 g/d respectively. Corresponding figures for the duodenal flows of nitrogen were 21.97 g/d, 21.48 g/d and 21.14 g/d and for the faecal losses of nitrogen were 7.09 g/d, 6.98 g/d and 6.92 g/d. As a consequence, although the diets supplied quite different amounts of digestible crude protein they supplied similar amounts of crude protein digested in the intestines.     

Land Equivalent Ratio of Groundnut-Fingermillet Intercrops as Affected by Plant Combination Ratio,and Nitrogen and Water Availability

Abstract

Field experiments were conducted to characterize intercropping advantages in groundnut-fingermillet intercrop in relation to crop combination ratios, soil moisture and nitrogen (N) availability. Three intercrops in 1 : 2, 1 : 1 and 2 : 1 alternating rows of groundnut and fingermillet were examined for their growth and yield in comparison with their respective sole crops in 1996. The effect of well watered (W) and water stressed (D) conditions on the intercropping advantage was also examined for 1 : 1 intercrops in 1995 and 1996. Fertilizer N was applied at the rate of 20 kg ha^?1 in 1995 and 50 kg ha^?1 in 1996. The total above-ground biomass (DM) and its land equivalent ratio (LER) were highest in the 1 : 1 combination ratio. The DM production of intercropped fingermillet was higher in 1996 with higher N than in 1995 with low N application, while those of groundnut were similar in both years. The intercropped groundnut exhibited significantly higher DM production after the fingermillet harvest. The LERs in grain yield were higher in 1996 (1.43 under W and 1.45 under D), than in 1995 (0.87 under W and 1.22 under D). Also, LERs were consistently higher under D than W conditions. Water stress severely reduced the leaf area index (LAI) of fingermillet at a low N, especially in the later stages, whereas higher N alleviated the water stress effect. A close linear relationship was observed between LAI and leaf area (LA) per unit leaf N both for groundnut and fingermillet, with intercrops producing larger LA per unit leaf N than sole crops. Intercropping maintained higher ability in leaf net photosynthesis and transpiration of groundnut up to later stages, and significantly reduced water evaporation from the soil surface under the canopy than sole cropping of fingermillet. These results suggest that three processes associated with the intercropping yield advantages in the groundnut-fingermillet intercrop; 1) higher leaf photosynthesis and vigorous growth of groundnut after the fingermillet harvest, 2) higher LA production per unit N and 3) efficient water use. In conclusion, interspecific shading was considered to be the key mechanism associated with these processes, leading to the intercropping advantages. The degree of the interspecific shade and its effect on growth and yield depended on the available soil N and water.     

豫北两熟区不同夏播作物对后茬冬小麦中后期群体微环境及产量的影响

为探讨不同夏播作物前茬对后茬冬小麦生长和产量的影响,在河南省新乡市获嘉县开展田间二因素试验,设置两个不同施肥水平(常规施肥和不施氮肥)和三种夏播作物前茬(玉米、大豆和花生),分析小麦拔节期至成熟期叶面积指数(LAI)、叶夹角(LA)、光合有效辐射(PAR)、叶片叶绿素含量(SPAD)、叶绿素荧光(F_v/F_m),以及土壤含水量(SWC)、土壤温度(Ts)和土壤呼吸速率(Rs)变化,并在成熟期测定小麦产量及其构成因素。结果表明,与常规施肥(CK)相比,不施氮肥条件下不同前茬的小麦LA略增,而LAI、IPAR、SPAD、F_v/F_m、SWC、Ts和Rs均有所降低。不施氮肥条件下,花生前茬的小麦LAI、IPAR、SPAD、F_v/F_m、SWC、Ts和Rs均显著低于其他两种前茬(P<0.05),其中花生、大豆和玉米前茬的SWC较CK的降幅分别为13.56%、13.39%和10.77%。与CK相比,不施氮肥条件下,花生前茬的小麦LA较CK的增幅在3种前茬中居中,小麦...