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濒危药用植物延龄草RAPD反应体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
以濒危药用植物延龄草(Trillium tschonoskiiM.)的叶片为材料,采用改良的CTAB法提取基因组DNA进行RAPD扩增,优化了RAPD扩增反应的程序及模板、引物、dNTP、Taq酶浓度等参数。结果表明:适合延龄草的RAPD扩增程序为:94℃预变性5 min,然后执行40个循环,每个循环中94℃变性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸2 min,最后72℃延伸10min;适宜的反应体系为:25μL总体积中含DNA模板50 ng,Mg2+2.5 mM,引物0.6μM,dNTP 0.2 mM,Taq DNA聚合酶3 U。 相似文献
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在提取高质量八角基因组DNA的基础上,通过对其RAPD反应体系的Taq DNA聚合酶、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度等因子的优化,建立了稳定、重复性高的八角RAPD-PCR反应体系.研究结果表明,在25 μL PCR反应体系中,含1.0 UTaq DNA聚合酶,0.15 mmol·L-1 dNTPs,2.0mmol·L-1 Mg2+,2.0 μmol·L-1引物,20~ 80 ng模板.最佳反应程序为,94℃预变性5 min,扩增后94℃变性30 s,31 ~37℃退火30 s,72℃延伸30 s,35个循环;72℃完全延伸7 min,4℃保存.在建立RAPD-PCR反应体系的基础上,从240条RAPD引物中筛选出15条扩增条带清晰、稳定性好的引物,并通过各引物的退火温度梯度实验,确定了各引物的最适退火温度. 相似文献
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福建柏无性系ISSR-PCR反应体系的模板,引物,taq酶,甲酰胺及程序中的退火温度,循环数等优化实验结果表明:福建柏ISSR-PCR反应最适体系为2.0μL 5 μM引物,1.0μL 35ng/μL DNA模板,12.5μL 2×Reaction Mix,0.75U 2.5U/μL Golden DNA Polymerase,2.0%甲酰胺总反应体系为25μL.ISSR-PCR反应最适程序为:94℃预变性3min;94℃变性30s;48.5℃退火30s;72℃延伸1min,35个循环;72℃再次延伸5min. 相似文献
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油茶随机扩增多态DNA条件的研究 总被引:10,自引:0,他引:10
以改进的CTAB法提取油茶嫩叶总DNA,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,分别测试了Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度和TaqDNA聚合酶用量对反应结果的影响,确定了油茶RAPD分析的最适反应体系:在25μlPCR反应体积中,含20ng模板DNA,2 5mmol·L-1MgCl2,0 2mmol·L-1dNTP,0 3μmol·L-1引物,1UTaqDNA聚合酶。扩增程序为:94℃预变性180s;94℃变性60s,37℃退火90s,72℃延伸120s,反应40个循环;最后在72℃延伸5min。 相似文献
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鹅掌楸ISSR-PCR反应体系的建立及优化 总被引:2,自引:0,他引:2
为建立鹅掌楸简单序列重复区间扩增ISSR的PCR优化反应体系,以鹅掌楸叶片基因组DNA为材料,系统地测试了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量及退火温度对ISSR-PCR反应体系的影响。结果表明:优化的PCR反应体系为:20μL总体系中,含30 ng模板DNA,0.3μmol.L-1随机引物,0.2 mmol.L-1dNTPs,1.4 mmol.L-1Mg2+,0.8 UTaqDNA聚合酶;最佳退火温度为60℃;PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,60℃退火45 s,72℃延伸2 min;45个循环;72℃再延伸7 min。 相似文献
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以红花石蒜叶片基因组DNA为模板,分析了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2 的浓度及Taq DNA聚合酶的用量对ISSR-PCR扩增结果的影响.建立了石蒜ISSR分析最优化的反应体系及应用程序:即25 μL反应体系中,有20 ng模板DNA、0.5 μmol·L-1随机引物、150 μmol·L-1 dNTPs、2.0 mmol·L-1 Mg2 、1.0 U Taq DNA聚合酶.反应程序为:94 ℃预变性5 min;然后45个循环:每个循环94 ℃变性45 s,55 ℃退火60 s,72 ℃延伸2 min;循环结束后72 ℃延伸7 min. 相似文献
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模板DNA、引物、dNTPs、Mg^2+的浓度,Taq DNA聚合酶的用量以及退火温度是影响简单序列重复区间扩增(ISSR-PCR)结果的主要因素.以桉树叶片基因组DNA为试材,系统地测试了这6个因素对桉树ISSR反应结果的影响.结果表明:最优化的反应体系即20μL反应体系中,含20 ng模板DNA、0.4μmol.L^-1随机引物、0.15 mmol.L^-1dNTPs、2.0 mmol.L^-1Mg^2+、1.25 U TaqDNA聚合酶.最佳退火温度为55℃;PCR反应程序为94℃预变性5 min;94℃变性45 s,55℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃再延伸7 min. 相似文献
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光皮树无性系ISSR-PCR反应体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
以光皮树基因组DNA为材料,采用单因素实验,测试了退火温度、模板用量、dNTP浓度、Taq酶用量、Primer浓度、Buffer用量和Mg2+浓度等因素对ISSR-PCR的影响.优化的反应体系和条件:总体系为25 μL,引物0.2 μmol/L,模板20 ng、Mg2+2.5 mmol/L、Taq酶0.5 U、dNTP为0.1 mmol/L和Buffer为2.5 μL.扩增程序:94 C预变性5 min,1个循环;94 C变性50s,52 C退火1 min,72 C延伸1.5 min,40个循环;72C后延伸10min,1个循环.该体系的建立为今后利用ISSR进一步研究光皮树遗传连锁图谱构建、遗传多样性、种质资源鉴定与和基因定位奠定了技术基础. 相似文献
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A new method of simultaneous determining Cu(II), Zn(II), Fe(II), Mn(II), Co(II) and Ni(II) with a single sweep polarography
was developed. The experiment condition was studied and the results show that the optimum base solution is that the residue
got from evaporating 25 mL mixed solution, 2.5 mL 1.0 mol/L ethylenediamine, 3.0 mL 1.0 mol/L ammonia-ammonium chloride, 5.0
mL 10 % sodium sulfite and 0.5 mL 0.5 % gelatin were mixed and diluted to 25 mL with water. Under the condition of this base
solution, the polarography wave shapes of the six cations are ideal and without overlap of the peaks. In this base solution,
Cu(II), Zn(II), Fe(II), Mn(II), Co(II) and Ni(II) in synthetic samples were determined with relative errors 0.4–9.4% and relative
standard deviations 0.8%-12.2%. Under this experiment condition, one fold of Pb(II), Cr(VI) and Mo(VI) do not interfere with
the determination for Cu(II). This method has been used to the simultaneous determination of the amount of the six cations
in the samples of soil and Beiqi Tea. The relative standard deviations were 0. l%-2.1% and recoveries were 93.5%-99.0 %. 相似文献
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3S技术在中国湿地研究、调查与管理中的应用 总被引:10,自引:0,他引:10
CUI Li-juan Anna van Paddenburg ZHANG Man-yin 《林业研究》2005,16(4):317-322
This paper introduces the state of waterlands in China and discribes the applications of Remote Sensing (RS), Geographical Information System (G1S) and Global Positioning System (GPS) in wetland research, including land-coverclassification and change detection, wetland evolutionary processes, landscape-change analyses, channel migration, flood and wetlands resource monitoring and spatial quantitative analyses/modeling, ecosystem service evaluation, ecological processes and risk assessments, disease control, water quality monitoring/modeling, pollution monitoring/modeling, wetlands hydrology, wetland information systems and WebGIS. The limitations and needs for optimal use of these technologies are discussed, such as the limited advanced technical knowledge and skills, low awareness and capacity, unclear link between GIS output and policy making, lack of supporting policies and standards, lack of a wetlands geo-information networklimite, and the use of these techniques in wetland research. It is suggested that for realising true applications of RS, GIS and GPS technologies, the availability, accessibility, reliability, homogeneity, and continuity of wetlands-related geo-information enabling environment, policies and standards, and funding are needed. 相似文献
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运用Cytb 和12s rRNA 基因鉴别梅花鹿(Cervus nippon)和马鹿(Cervus elaphus)的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究介绍了运用细胞色素b基因和12s核糖体RNA基因部分序列的系统学和核甘酸距离分析来鉴别降解的梅花鹿和马鹿样品。采用PCR和直接测序技术获得了8份嫌疑样品402bp细胞色素b基因序列,并与来自GenBank数据库27份同源的细胞色素b基因序列进行比对。3份嫌疑样品与梅花鹿的核甘酸距离值相同(0.026±0.006),小于梅花鹿与东部马鹿间最小的核甘酸距离值(0.036)。并且梅花鹿和马鹿的系统学分析表明这些样品与梅花鹿聚为一枝,因此可以推测它们来源于梅花鹿。同样的方法得出另3份嫌疑样品来源于马鹿。该结果被387bp12s核糖体RNA基因序列的系统学和核甘酸距离分析进一步证实。该方法是有效的,花费的时间少,能帮助减少同类野生动物案件的发生。图2表1参13。 相似文献
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本文对乌鞘岭地区天然分布的中国沙棘和西藏沙棘果实生长与成熟期间维生素C,PP,E等含量的动态变化进行了系统的调查和分析测定。结果表明:V_C主要存在于果肉中,且随果实发育而增加,果实变色期(花后107—110天)达到最高值,随后急速下降。但完熟后果肉中V_C减少时种子内V_C却有所增加。中国沙棘V_C水平远较西藏沙棘为高(5倍以上)。果实发育前期果肉中V_(PP)含量很高,以后逐渐下降,完熟期中国沙棘果实内V_(PP)再度升高,其变化与呼吸速率的变化表现出相同的消长规律。V_E主要存在于种子里,总趋势是随成熟而增加。种子变色期V_E上升至第一高峰值,随后下降,果实完熟后达到第二高峰值。西藏沙棘V_E含量高于中国沙棘。本文对不同维生素可能起的生理作用也进行了讨论。 相似文献
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松材线虫侵染对马尾松苯丙烷类代谢的影响 总被引:9,自引:1,他引:9
1.5年生马尾松植株接种松材线虫后,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性水平均高于对照,活性高峰通常出现在症状表现前夕,并在植株发病后下降.叶内PAL和POD活性高峰的出现晚于茎,与叶部病害发展一致.茎中酚类物质的含量随着线虫侵染时间的延长逐渐增加,至发病时达到高峰.酚类物质含量的变化与PAL、POD、PPO 3种酶活性的变化趋势基本一致.松材线虫的侵染明显影响寄主植物的苯丙烷类代谢,由此可知,松材线虫病的发生发展与松材线虫诱导感病寄主苯丙烷类代谢的异常变化有关. 相似文献
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株洲市生活污水污染特征研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在一年中,分4个季度(每季度3天,每天4次)对株洲市区具有代表性的4个不同地点的生活污水水质进行了监测.结果表明生活污水中的主要污染物是BOD5和Inorg-P;污染物浓度有明显的时空变化规律,中午和傍晚前后的浓度较高,早晨和半夜则较低,冬、春季节的污水污染物浓度皆高于夏、秋两季,居民、餐饮业密集区的污水中污染物浓度显著高于商业区和混合区;污水中氮、磷主要以无机盐形式存在;目前株洲市生活污水排放量与主要工业污染源废水年排放量相当,CODcr、BOD 相似文献
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This paper depicted the physiographic landscape features and natural vegetation situation of study area (the eastern Jilin
Province), and expatiates the definition, basic characters and its development of Ecological Land Classification (ELC). Based
on the combination of relief map, satellite photography for study area and vegetation inventory data of 480 sample sites,
a 5-class and a 15-class ecological land type map was concluded according to 4 important factors including slope, aspect,
vegetation and elevation. Ecological Classification System (ECS) is a method to identify, characterize, and map ecosystems.
The Ecological Land Type (ELT) was examined and applied initially in eastern Jilin Province.
Foundation item: This paper was supported by Chinese Academy of Sciences “100 people” project and the Open Research Station of Changbai Mountain
Forest Ecosystem.
Biography: XIAO Bao-ying (1974-), female, postgraduate in Institute of Applied Ecology, Chinese Academy of Sciences, Shenyang 110016,
P. R. China
Responsible editor: Zhu Hong 相似文献