多粘类芽孢杆菌LRS-1对辣椒疫霉菌胁迫下根系分泌物的影响

通过选取多粘类芽孢杆菌LRS-1作为生防材料,应用温室盆栽试验,检测疫霉菌胁迫下辣椒根系分泌物成分与类型,目的在于探明“生防菌—疫霉菌—辣椒根系”的互作机理。结果表明,与阴性对照相比,疫霉菌胁迫下辣椒根系分泌物中有机酸、蛋白质与可溶性糖的含量均显著增加;疫霉菌胁迫下接种多粘类芽孢杆菌LRS-1处理的有机酸与可溶性糖含量比胁迫处理显著降低,蛋白质含量明显提高。GC-MS鉴定出辣椒根系分泌物主要为酯类、酸类、胺类、醇类、酮类和烃类化合物,且以结构相对复杂的酯类、酸类和胺类化合物较多,以直链或支链烷烃为主的烃类和醇类化合物较少;疫霉菌胁迫下辣椒根系分泌物化合物种类明显增加,且检测到诸如棕榈酸甲酯等特异性化合物成分,而接种多粘类芽孢杆菌LRS-1则利于疫霉菌胁迫下辣椒根系化合物种类及含量与阴性对照趋向一致;3-苯基-2-丙烯酸甲酯等化合物在接种了LRS-1处理的辣椒根系分泌物中相对含量最高。结果证实接种多粘类芽孢杆菌LRS-1能明显缓解疫霉病对辣椒根系化感的胁迫。     

多粘类芽孢杆菌在植物生产中的应用及作用机制

多粘类芽孢杆菌是植物生产中一种有效的拮抗菌和促生菌。该研究综述了近20年多粘类芽孢杆菌对多种作物促生作用的应用,分析了多粘类芽孢杆菌对各种土传病原菌的作用机制及生防效果,探讨了多粘类芽孢杆菌生防病原种类、作用时期、分离生境等方面的变化和延伸,并对其可继续深入研究及应用的前景进行了展望。     

多粘类芽孢杆菌HK18-8对辣椒炭疽病菌的抑制作用及其定殖能力

从健康的化香(Platycarya strobilacea Sieb. et Zucc.)根际土壤中分离获得生防菌HK18-8,为探究其对辣椒炭疽病的生防潜力,通过对峙培养和孢子萌发试验发现,HK18-8显著抑制短尖刺盘孢(Collectotrichum acutatum)的菌丝生长和分生孢子萌发,其抑菌带达到10mm,孢子萌发抑制率为70.15%;进行离体辣椒果实接种试验表明,HK18-8菌悬液对辣椒炭疽病的防治效果达到88.58%,其预防效果高于治疗效果,HK18-8的发酵液和菌悬液的防病效果显著;采用平板稀释法测定其在辣椒果实的定殖能力,处理9 d时仍能保持10~6 cfu·g~(-1)以上;根据形态特征、生理生化特性及16S rRNA序列同源性,HK18-8菌株鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。     

海洋多粘类芽孢杆菌L1-9菌株对黄瓜的促生作用和诱导抗性研究

以黄瓜种子为试材,采用盆栽法研究了L1-9菌株发酵液浸泡黄瓜种子后,对黄瓜幼苗的根长、须根数、黄瓜枯萎病发生的影响,并测定了黄瓜根组织的过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)和多酚氧化酶(PPO)4种防御酶的酶活性变化。结果表明:L1-9菌株发酵液浸泡黄瓜种子,可促进黄瓜须根的增加和根伸长,对黄瓜枯萎病具有明显的防治效果;浸种处理后黄瓜幼苗根部PAL、POD、PPO、SOD 4种酶活性明显高于对照,4种酶活性高峰时期不同,表明L1-9菌株发酵液浸泡种子能够明显诱导黄瓜对枯萎病的抗性。     

多粘类芽孢杆菌L1-9菌株对番茄早疫病的抑菌防病作用

L1-9菌株是从连云港海域海泥中分离获得的1株多粘类芽孢杆菌。采用平板对峙法和打孔法测定L1-9菌株及其发酵液和无菌发酵液对番茄早疫病菌的抑制作用,结果表明：L1-9菌株和无菌发酵液对番茄早疫病菌菌丝生长有明显的抑制作用,培养4 d的抑菌带宽度分别达到17.6 mm和15.8 mm,L1-9菌株的发酵液和无菌发酵液能明显降低早疫病菌的孢子萌发率并抑制芽管的伸长,发酵液的抑制作用高于无菌发酵液。采用离体叶片法和盆栽法测定该菌株的室内防病效果,结果表明：L1-9菌株的发酵液和无菌发酵液对番茄早疫病具有较好的防治效果,发酵液的防病效果高于无菌发酵液,其离体叶片法的保护效果和治疗效果分别达到79.28 %和67.20 %。     

荔枝霜疫霉对烯酰吗啉的抗性风险评估

【目的】检测荔枝霜疫霉对烯酰吗啉的敏感性,建立敏感性基线;测定抗烯酰吗啉突变株的生物学适合度,为荔枝霜疫病的化学防治提供依据。【方法】采用菌丝生长速率法,对2019—2020年来自中国广东、广西、福建、四川和云南5个省份荔枝主产区的320株荔枝霜疫霉单孢子囊菌株进行烯酰吗啉敏感性测定,通过药剂驯化获得抗烯酰吗啉突变株,测定其生物学适合度。【结果】经过异常值分析并剔除,317株荔枝霜疫霉菌株对烯酰吗啉的敏感性频率分布呈正态分布,EC₅₀值介于0.086 3～0.173 3μg·mL^-1之间,平均(0.122 2±0.000 9)μg·mL^-1,以此建立荔枝霜疫霉对烯酰吗啉的敏感性基线。来自2020年的荔枝霜疫霉菌株对烯酰吗啉的EC₅₀均值较2019年显著增高。3株荔枝霜疫霉抗烯酰吗啉突变株的抗性指数介于77.17～360.11之间,为中到高抗水平,抗药性可稳定遗传,与亲本相比,抗性突变株的孢子囊萌发率及卵孢子产量均下降,但致病力相当。【结论】荔枝霜疫霉对烯酰吗啉敏感,烯酰吗啉可继续作为防治荔枝霜疫病的...     

根际接种芽孢杆菌对辣椒和黄瓜壮苗形成的作用

将地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)悬浮液注射接种至辣椒、黄瓜幼苗根际,分析对幼苗生长发育及其相关生理指标的影响。结果表明:辣椒苗期根际接种芽孢杆菌后,显著提高了幼苗净光合速率和根系活力,促进了矿质元素的吸收积累,增产幅度29.3%～33.3%,多粘芽孢杆菌的接种效果明显优于地衣芽孢杆菌;黄瓜幼苗根际接种芽孢杆菌后,幼苗根系活力降低,进而抑制了矿质元素吸收和产量形成。     

短柄龙胆内生菌的分离鉴定及抗菌活性分析

以在青海省西宁市湟中县拉脊山采集的短柄龙胆(Gentiana stipitata)为试材,采用组织块分离和梯度稀释法得到一株具有抗菌活性的内生菌,分析了该内生菌的活性物质,及与龙胆属植物活性成分的关联性,以期为药用植物内生菌资源的开发利用奠定基础。结果表明:内生菌WZ-6对金黄色葡萄球菌、黄瓜褐斑病菌有明显的抑制作用,通过形态学和16SrDNA系统进化分析鉴定,WZ-6为类芽孢杆菌属(Paenibacillus),与Paenibacillus terrae的同源性最高,达到98.9%,HPLC等分析表明菌株WZ-6的发酵产物中含有环烯醚萜类抑菌活性成分。     

辣椒疫霉菌拮抗细菌L14-3的生防潜力及其鉴定

为探讨L14-3菌株对辣椒疫病的生防潜力,采用皿内对峙试验和孢子萌发试验,测定其对辣椒疫霉菌的抑制活性,通过盆栽试验验证其对辣椒疫病的防治效果,并根据形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析对其进行鉴定.结果表明,L14-3菌株对辣椒疫霉菌的菌丝生长、游动孢子囊的形成、游动孢子的释放和休止孢子的萌发均具有...     

48%琥胶肥酸铜·霜脲氰混配剂对荔枝霜疫霉病的防治效果

田间试验结果表明,48%琥胶肥酸铜(DT).霜脲氰可湿性粉剂可有效防治荔枝霜疫霉病,稀释500~600倍喷雾,花穗期防效81%,采收期防效80%以上,幼果期也有良好的表现。该混配剂兼有保护与内吸治疗的优点,可作为福建省荔枝霜疫霉病的防治药剂。     

霜疫病菌侵染对荔枝果实生理变化的影响

测定了荔枝果实人工接种霜疫病菌后呼吸速率、乙烯释放量的变化和果皮中氧化、过氧化作用以及与酚类氧化有关的几种酶活性的变化。结果表明,接种霜疫病菌的荔枝果实呼吸速率和乙烯释放量显著增高,果皮中活性氧(O2-)产生速率和膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)含量增加,超氧化物歧化酶(SOD)活性降低,过氧化物酶(POD)和多酚氧化物酶(PPO)活性增高。这是霜疫病加速采收后荔枝果实衰老、褐变、腐烂的重要原因之一。     

多粘类芽胞杆菌ZF197对白菜茎基腐病防治效果

从露地大白菜根际土壤中分离获得一株对白菜茎基腐病病原菌白菜立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)有显著抑制效果的生防细菌ZF197,通过形态特征、生理生化特征和多基因系统进化树分析对其进行鉴定;通过大白菜离体叶片和温室盆栽试验研究其对白菜茎基腐病防治效果,并鉴定其在白菜根部的定殖能力;通过酶学试验和抑菌谱试验研究其生物学特性;采用三明治法测定其发酵液的最适培养基和发酵时间。结果表明,菌株ZF197为多粘类芽胞杆菌(Paenibacilluspolymyxa),对大白菜离体叶片立枯丝核菌的防效可达82.35%,盆栽防效可达78.57%;该菌株可在白菜根部稳定定殖,处理20 d后定殖量趋于稳定,保持在2.37×105 cfu·g-1左右;菌株ZF197具有广谱拮抗作用,能够有效抑制8种病原真菌和6种病原细菌的生长,其代谢过程中有蛋白酶和纤维素酶的产生。菌株ZF19796h发酵液对立枯丝核菌的抑制率最高,可达58.58%;以棉籽饼粉作为碳源的发酵液对立枯丝核菌的抑制率最高。     

苦参有效成分对辣椒枯萎菌的抑菌活性

采用生长速率法和悬滴法测试了不同浓度苦参提取物、黄酮类化合物及生物碱对辣椒枯萎病的抑菌活性.结果表明:苦参提取物对辣椒枯萎菌菌丝生长和孢子萌发均有很强的抑制作用.在供试质量浓度40 g/L时,对辣椒枯萎菌菌丝生长、孢子萌发抑制率分别达到94.48％、89.01％;并且黄酮类化合物抑菌活性显著高于生物碱.     

没食子酸对金黄色葡萄球菌抑菌活性及机制研究

以金黄色葡萄球菌为供试菌,利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,细胞膜渗透性测定,SDS-PAGE蛋白谱变化等方法对没食子酸的抑菌活性及其机制进行研究,进而验证没食子酸的药效作用。实验结果显示,没食子酸对金黄色葡萄球菌作用其抑菌圈直径为13mm;其对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.01mg.mL-1;当药物作用5h时,实验组的电导率与对照组相比增加了6.38%;大分子的OD值随着作用时间的增加而逐渐增大,当培养至8h时,实验组大分子物质吸光值的变化率达到最大,比对照组增加了74.4%。SDS-PAGE蛋白谱变化实验表明,没食子酸对金黄色葡萄球菌作用20h后,其总蛋白量没有明显变化。上述结果表明,没食子酸对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌活性,能影响金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性。其抑菌机制是通过破坏细菌细胞膜的完整性来实现的。     

马铃薯早疫病拮抗菌的筛选及其代谢产物的抑菌活性

以马铃薯早疫病病原菌茄链格孢菌(Alternaria solani)为指示菌,通过平板对峙法,筛选出菌株及其发酵滤液对马铃薯早疫病病原菌均具有较强拮抗作用的生防菌株BAF-6;通过形态特征、生理生化特性鉴定以及16S r DNA序列分析,该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。菌株发酵滤液经60~80℃热处理,抑菌活性均在95%以上;紫外线照射8 h或在p H值为2~10的酸碱环境下,发酵滤液的抑菌活性稳定;经蛋白酶处理后抑菌活性仍达50%以上。     

万寿菊精油杀菌素对西瓜枯萎病菌的抑菌作用及对西瓜幼苗的影响

采用田间试验和生物测定方法,研究了人工合成的万寿菊精油杀菌素对西瓜枯萎病菌和西瓜幼苗生长的影响。结果表明:0.5μg/mL万寿菊精油杀菌素24、48、72、144 h的抑制率分别为100%、76.7%、59.9%、56.8%;当浓度大于1.5μg/mL时抑制率达100%;10μg/mL万寿菊精油杀菌素处理西瓜幼苗的致萎指数得到显著降低,差异达显著水平(P<0.05);20μg/mL万寿菊精油杀菌素处理的西瓜枯萎病菌,大分子量的蛋白含量增多,小分子量的蛋白含量减少,但过氧化物酶的条带数没有变化;50μg/mL万寿菊精油杀菌素处理的西瓜苗叶片中3d后MDA含量减少差异显著(P<0.05),4d后过氧化物酶活性逐渐升高差异达显著水平(P<0.05),5d后差异极显著(P<0.01)。含药培养基上生长的西瓜枯萎病菌的果胶酶活性降低,呼吸强度明显提高,细胞膜通透性增大,几丁质酶活性稍高于对照。此杀菌素可用以预防和控制西瓜枯萎病,为西瓜枯萎病的综合防治提供一种新的方法和途径。     

苋菜活性物提取工艺及抑菌活性研究

以对柑橘溃疡病菌抑制率为考察指标,采用乙酸乙酯浸提苋菜叶干粉,获得苋菜活性物,通过正交试验分别考察料液比、提取次数、提取时间对苋菜活性物提取效果的影响。结果表明:不同因素对苋菜活性物提取效果的影响程度不同,依次为料液比提取温度提取时间;正交试验优化得到苋菜活性物最佳提取工艺参数为:料液比1∶5、提取温度30℃、提取时间24h,在此条件下苋菜活性物的抑制率为73.81%。紫外线、C源(蔗糖)和无机盐离子(NaC l)的胁迫作用均对苋菜活性物抑菌活性影响不大;苋菜活性物有一定的耐热性,温度为80℃时抑制率仍可达49.41%。     

枸骨叶抑菌物质的提取及抑菌作用研究

采用正交试验法探讨枸骨叶抑菌物质的最佳提取条件,以杯碟法对枸骨叶提取物进行体外抗菌作用以及pH、温度、时间因素对其抗菌活性的影响。结果表明:枸骨叶抑菌物质的最佳提取条件为:以乙酸乙酯为溶剂,提取温度为40℃,料液比为1∶10,浸提时间为2.5 h;枸骨叶提取物对金色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌都有明显的抑菌效果,最低抑菌浓度分别为0.0625、0.50、.5 mg/mL;最小杀菌浓度为0.1251、0、.5 mg/mL。该物质抑菌pH范围为7~9,热稳定性较差,最佳抑菌时间为24 h。