中华绒螯蟹卵膜和腹肢的形态及卵附着机制

扫描电子显微镜对中华绒螯蟹(Erioheir sinensis)卵膜和雌体腹肢的形态观察表明,雌蟹腹肢原肢底节、内肢和外肢呈背腹椭圆型,具有致密的刚毛。内肢和外肢基部的刚毛比末端密,紧贴腹部的一侧没有刚毛。繁殖期间,卵附着于原肢底节和内肢的刚毛上孵化,外肢刚毛呈羽状,三叉式分布在外腹肢上。卵排出后向刚毛移动过程中与腹肢表面和刚毛上的黏液接触后,卵的表面逐渐被黏液包被。随着卵的移动黏液粘稠部分产生卵柄,附着到刚毛上。     

锯缘青蟹卵膜变化与卵子附着研究

利用光镜和电镜观察了锯缘青蟹成熟卵及其受精后卵膜变化和卵子附着特征。锯缘青蟹成熟卵子卵膜有三层即外层、内层和质膜。卵子产出后,无论受精与否,外层和内层卵黄膜形成壳膜,与卵子附着有关。刚产出的卵子卵膜具有溶胶性和延展性,卵子与刚毛表面之间或卵子之间接触便粘在一起,由于刚毛摆动和卵子的重力作用,形成卵柄或卵索。卵子受精后,发生皮层反应形成受精膜。由壳膜和受精膜构成的孵化膜为初级卵膜,保护胚胎发育,直至     

日本沼虾体表寄生物对胚胎附着的影响

用扫描电镜技术研究了体表寄生物对日本沼虾（Macrobrachium nipponense)受精卵（胚胎）附着的影响，发现在流产个体1－4对腹肢原肢与内肢的表面密布钟虫类原生动物，这些寄生原生动物影响粘液腺的分泌活动，使其不能正常分泌粘液，受精卵的被膜、卵柄及卵索均不能正常形成，卵与卵之间的摩擦力加大，胚胎供氧困难，最终导致死胎和流产，体表寄生物是造成养殖日本沼虾胚胎提早脱落的重要原因之一。     

短蛸繁殖行为及胚胎发育过程

采用光学显微镜观察的方法,对短蛸(Octopusocellatus)的胚胎发育过程进行观察。在人工养殖环境下,选用成体短蛸培养1个月后(五月份)即产卵。观察发现,雌蛸一直对其卵子进行看护,直到幼体孵化出膜,随后两周之内雌蛸相继死亡;受精卵卵裂方式为盘状卵裂。根据Naef的划分标准,短蛸胚胎发育过程划分为20期,期间胚胎经历2次翻转,受精卵的孵化水温为16～21℃时,第1次翻转发生在第15天,胚胎原基由动物极转向植物极;第2次翻转发生在第40天,胚胎由卵柄端转向卵柄相对端;从受精卵到幼体孵化出膜共经历41d;刚孵化出的幼体为浮游型,浮游期12d左右,之后营底栖生活。本文系统地描述了短蛸的繁殖行为和胚胎发育各个阶段的形态变化,旨在丰富短蛸繁殖生物学和胚胎发育生物学的基础理论研究,并为开展大规模开展短蛸人工育苗、养殖以及人工增殖放流提供科学依据。     

三疣梭子蟹受精卵离体孵化技术

为了探究三疣梭子蟹受精卵的离体孵化技术及效果,本研究先后开展了受精卵块最适分离液种类及作用条件的筛选、分离液处理不同发育期受精卵离体孵化的差异、分离液处理对受精卵卵膜的结构影响,及分离液处理受精卵对孵化后幼体活力的影响实验。结果显示,木瓜蛋白酶是一种较为理想的分离液,在浓度为0.09 g/mL,分离时间30 min时,分离率可达到99%以上;经过分离液处理后的各期受精卵均能孵化出幼体,卵内溞状幼体期离体胚胎孵化率最高,为89.0%±3.3%,未经处理的对照组为70.0%±4.8%;卵裂期离体胚胎孵化率最低,为58.0%±3.9%,对照组为31.0%±2.3%,与对照组相比,处理组的孵化率明显提高。透射电镜结果显示,经过分离液处理的受精卵卵膜结构疏松,且厚度降低,符合处理组孵化率增加这一现象,干露、福尔马林溶液胁迫和行为学测试对不同处理组的幼体进行质量评价的结果显示,处理组和对照组幼体活力无显著差异。研究表明,实验所获得的分离液可以有效提高三疣梭子蟹受精卵的分离率和孵化率,且不影响幼体质量,可为三疣梭子蟹及其他甲壳动物受精卵的离体孵化提供参考。本研究可为三疣梭子蟹的苗种繁育提供新的技术手段,也将为基因编辑辅助育种等技术的实施奠定基础。     

鱼类孵化酶及鱼类人工孵化提前脱膜问题探讨

大多数鱼类的孵化脱膜主要靠胚胎发育过程中形成的一种特异、临时性的单细胞腺一孵化腺(Hatching gland，HG)所分泌的酶一孵化酶(Hatching enzyme．HE)的作用，再加上胚胎的扭动，使卵膜脱裂完成的。而孵化腺的发生、发育、消失和分泌功能受胚胎自身发育和环境因子的影响。     

中华原钩虾的胚胎发育及其与水温的关系

采用发育生物学和生态学方法,观察描述了中华原钩虾的胚胎发育过程,研究了胚胎发育与水温的关系。结果显示,中华原钩虾的抱卵量与雌体体长呈正相关,抱卵雌虾通过抱卵板附着胚胎,在育卵袋内孵化幼体。水温15~27°C范围内,随着温度的升高,胚胎发育历期缩短,发育速率加快;21°C恒温条件下,中华原钩虾胚胎发育全程大约需要220 h,离体培养受精卵和亲体抱卵孵化基本同步。根据有效积温法则公式计算出胚胎的发育温度阈为6.02°C,有效积温为137.30°C·d。研究表明,中华原钩虾的前几次卵裂为全裂,后转为表面卵裂,初孵幼体与成体形态相似;温度对其胚胎发育历期和发育速率的影响差异极显著。     

曼氏无针乌贼胚胎发育的初步观察

将曼氏无针乌贼受精卵卵膜剥离,在显微镜或解剖镜下观察胚胎发育的全过程,结合室内人工育苗的孵化技术进行探讨。曼氏无针乌贼卵为粘性卵,呈黑色,类型属端黄卵,卵膜属三级卵膜,卵裂类型为不全卵裂,囊胚呈盘状,发生类型为直接发生型。在水温为23.8～26.2℃、盐度29.3时,最快14d孵出幼体,最慢23天孵出幼体,孵出幼体高峰期为18～21d,高峰期的孵出量占总孵出量的79.4%,孵化率为83.1%。胚胎发育速度与温度高低（20～30℃）成正比,盐度低于22对孵化率有严重影响。     

狭鳕早期胚胎发育的形态结构观察

利用显微数码摄像系统,活体观测、拍摄了狭鳕受精卵的早期胚胎发育过程,详细描述记录不同发育时相胚胎的形态特征、发育时间等。选取6个发育期(未受精、细胞分裂期、囊胚期、原肠胚期、胚体发育期、将孵化前期)的照片,利用Image J软件测量不同发育期的卵径,以探讨狭鳕早期胚胎发育过程中卵径的变化。此外,利用扫描电镜观察了4个胚胎发育期(未受精期、2细胞期、原口关闭期、孵化前期)受精孔及卵膜的形态结构。结果表明,狭鳕产浮性分离卵子,卵膜单层、透明光滑,卵黄均匀,无油球,卵径1.45~1.58 mm。在水温(6.3±1.24) ℃,盐度34时受精后约1 h胚胎形成,24 h后进入囊胚期,61 h后进入原肠胚期,134 h后进入器官形成早期,161 h后心脏开始跳动,319 h后开始孵化。在整个胚胎发育过程中,狭鳕卵子的直径呈现逐渐增大的趋势。亚显微观察显示,狭鳕受精孔为Ⅱ型,受精孔前庭平坦,但受精孔孔道较长。未受精时,受精孔开放,卵膜上多皱褶,卵膜壁孔不明显;2细胞期时,受精孔被卵周液分泌物阻塞,卵膜皱褶减少,卵膜壁孔明显;原口关闭期时,受精孔呈半开放状态,卵膜褶皱增多,卵膜壁孔不明显;即将孵化期时,受精孔完全塌陷,卵膜表面十分粗糙,卵膜壁孔明显。由此可见,狭鳕卵子卵径、受精孔和卵膜结构的动态变化都与整个胚胎发育过程紧密相关,其对提高卵子受精率、卵子在海底正常发育和散布,卵子发育过程中防止多精受精和细菌感染具有重要意义。     

鸭绿沙塘鳢胚胎壳膜结构的电镜观察

扫描电镜观察发现,鸭绿沙塘鳢(Odontobutis yaluensis)卵壳膜由卵柄和卵体两部分构成.卵柄基部为丝状纤维围成的直径200μm、高12.5μm的"圆盘状"结构,使卵子黏附在附着物上.卵柄基部正中有一直径为20 μm的凹陷受精孔.卵柄丝为圆柱体.未受精卵子的系丝表面光滑,呈发散状向外扩散.随着胚胎发育,受精卵的系丝逐步拉长,直径变小,脆性增加.卵壳主要分为两层:内层具有卵膜孔,肌节出现后内膜孔直径为0.2～0.5μm,眼点出现后达到0.9～1.22μm,破膜前期为0.4μm,平均每100μm2有卵孔38个;卵膜外层规则地排布有直径为0.30～0.63μm的孔径.文中讨论了卵壳膜和受精孔的结构与受精卵孵化生态环境的统一.     

密斯特黄彩鲶人工繁殖与胚胎发育的研究

从海南省山溪中捕捞收集到野生密斯特黄彩鲶,在池塘养殖条件下培育到性成熟,于2008年4月至10月,3次对其进行了人工繁殖和胚胎发育的系统研究。结果表明,密斯特黄彩鲶受精卵呈圆球形,透明,略带淡黄色。卵径平均1．0mm,沉性,有黏性,属黏性卵。黄彩鲶胚胎发育过程分为7期,包括受精卵阶段、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期、孵出期,历时约25h,胚胎发育总积温约为693．7h·℃。     

伊犁裂腹鱼胚胎及早期仔鱼发育的观察

2010年5月通过人工催产,人工授精方法获得伊犁裂腹鱼(Schizothorax pseudaksaiensis Herzenstein)受精卵,在人工培育的条件下对其胚胎和仔鱼发育进行观察.结果显示:伊犁裂腹鱼成熟卵为淡黄色,卵径为1.70～1.80 mm.受精40 min后,受精卵卵周隙接近最大化,此时卵径为2.9...     

缢蛏受精和早期卵裂过程的细胞学变化观察

采用普通光镜、荧光显微镜和石蜡切片技术,对缢蛏受精和早期卵裂过程中的精子入卵、减数分裂、雌雄原核形成与结合、早期卵裂以及多精入卵等细胞学事件进行了显微观察。结果表明,缢蛏成熟未受精卵多呈圆球形或卵圆形,少数呈梨形,卵径为82～88μm,核相处于第一次成熟分裂中期;精子为典型的原生型,全长55～58μm,头部呈保龄球形,顶体前端的顶体杆呈特别细长的花丝状;在水温21～22℃、盐度10的条件下进行人工授精,精、卵混合后,精子迅速附着于卵子表面,启动卵子发育;受精后4～6 min,精子的头部已进入卵内并明显膨胀,卵子外形变圆,卵外附着的精子量明显减少;在受精后12～15 min、20～25 min,受精卵先后排出第一极体、第二极体,完成两次成熟分裂;第二次成熟分裂结束以后,精、卵核体积迅速膨胀,雄原核的膨胀早于雌原核,核膜重建,在受精后约30 min形成雌、雄原核;雌、雄原核均向卵子中央移动,雄原核旁边的精子星光清晰可见,随后二者在卵子中央以染色体联合的方式结合,联合核的染色体共同排列在纺锤体的赤道板上,形成第一次有丝分裂的中期分裂相;受精后40 min左右,受精卵进行第一次卵裂,染色体在纺锤丝的牵引下向两极移动,结果形成2个大小不等的卵裂球;受精后45～50 min,卵子进行第二次卵裂,核相变化与第一次卵裂相同,在与第一次卵裂垂直的纵轴方向上发生不等全裂,最终形成3小1大4个卵裂球;受精后60～70 min,胚胎进行第三次卵裂,仍为不等全裂,但自此次卵裂起已开始进行螺旋分裂。此外,对实验中发现的缢蛏极少量多精入卵、多极分离等异常细胞学现象进行了分析,并探讨了海洋贝类卵子阻止多精入卵发生的机制。     

多棘海盘车胚胎和早期幼虫发育

对室内培育的多棘海盘车Asterias amurensis胚胎和幼虫的发育以及外部形态进行了显微观察。多棘海盘车为雌雄异体,体外受精,成熟卵卵径为(130~150)μm,卵裂属完全均等型。水温为(10.5~11.5)℃时,受精卵经20min左右释放第1极体,约50min进行第1次卵裂,约7h时进入桑葚期,19h40min发育成为膜内旋转囊胚,23h40min发育成为脱膜旋转囊胚,26h30min发育成为早期原肠胚,纤毛幼虫(初孵幼虫)出现在46h,从受精到短腕幼虫历时25d。由纤毛幼虫到短腕幼虫的过程中幼虫体长经历了先增大后减小的过程。进一步发现,投喂混合饵料(小新月菱形藻Nitzschia closteriumf.minutissima和海洋红酵母Rhodomonas sp.1∶1)的幼虫发育速度比单独投喂小新月菱形藻的快,但差异不显著(P0.05)。     

塔玛亚历山大藻对海湾扇贝胚胎发育过程的影响

研究了塔玛亚历山大藻（Alexandrium tamarense）ATHK株对海湾扇贝受精卵孵化的影响,并探讨了可能的影响机制。将海湾扇贝受精卵暴露于不同密度的塔玛亚历山大藻ATHK中,观察其对胚胎孵化各阶段的影响,并利用光镜和透射电镜对实验组和对照组胚胎的外部形态和内部结构进行连续观察。结果表明：该藻对海湾扇贝受精卵孵化有显著的抑制作用,其IC50约为800 mL-1;2000 mL-1的ATHK延缓或破坏了胚胎的正常发育,胚胎内部出现大量溶酶体,原肠胚腔不能形成,且部分细胞出现胞质肿胀、线粒体自溶的现象,细胞不能进行正常的功能性分化;观察发现实验组中有些担轮幼虫的外形畸变,鞭毛发育迟缓;至24 h（D型幼虫）时,ATHK组中的D型幼虫数量远远低于对照组（P<0.05）,且死亡率明显高于对照组。观察还发现ATHK藻细胞和胚胎碰撞接触的现象,这种碰撞接触可能对有害物质的释放和转移有一定的刺激作用。     

Effect of temperature increase on the embryonic development of Patagonian red octopus Enteroctopus megalocyathus in controlled culture

One of the major problems involved in the controlled cultivation of Patagonian red octopus (Enteroctopus megalocyathus) is its long embryonic period ranging between 150–176 days, after which the hatching of planktonic paralarvae is achieved. The effect of temperature on the incubation of E. megalocyathus eggs was studied with the aim of establishing if a temperature higher than 12°C is effective to accelerate the embryonic development without altering their morphological and physiological conditions. Fertilized eggs obtained under controlled conditions at 11°C ± 0.1 were randomly distributed in 12 water baths of 30 L at 4 temperatures: 12, 14, 15 and 16°C ± 0.1°C. The experiment lasted until egg hatching occurred.The embryo growth rate was accelerated at 15–16°C, so the time spent in embryonic development can be reduced in 15% when compared with embryo development obtained from eggs incubated at 12°C. The embryos showed no significant differences in the final survival and were morphometrically similar in all stages of development at all temperatures. The increase in temperature from 12 to 16°C, even if it allowed a better growth, had high metabolic costs for embryos of E. megalocyathus. The activities of lipases and proteases were affected by interaction between temperature and the embryo stage, with high lipase activity observed in embryos of stage XV incubated at high temperatures and the highest levels of trypsin and chymotrypsin in stage XX at 14°C. The results suggest that 15°C could be the limit temperature to increase growth.