基于核酸适配体和阳离子聚合物PAH高效聚集纳米金比色法检测牛奶中四环素

为满足乳制品中四环素快速检测要求,开发了基于核酸适配体(aptamer)和阳离子聚合物PAH高效聚集纳米金比色检测牛奶中四环素(TET)的新方法。本文优化了PAH和适配体的浓度。最优实验条件下,四环素浓度在一定范围内与A520/A650呈现良好的线性关系,最低检测限(LOD)为95nmol/L,对四环素具有良好的选择性。该方法已成功用于牛奶中四环素的检测,回收率为108%~117%,相对标准偏差为2.9%~3.6%。     

基于链替代扩增-纳米金比色直观检测单链核酸方法的研究

[目的]将链替代扩增技术与核酸修饰纳米金积聚变色的光学特性相结合,设计了一种新型的直观检测3′端暴露单链核酸的方法,实现对单链核酸的高灵敏度检测。[方法]设计一条含有硫代修饰酶切位点的单链核酸（ZDNA）,其酶切位点5′端是能将核酸修饰纳米金变色的Linker序列,3′端是能与Target单链核酸3′端完全互补的H序列。当无Target存在时,Linker会充分暴露,能使核酸修饰纳米金积聚呈现紫色;但是当Target存在时,会与H序列完全互补,作为ZDNA的引物进入链替代扩增循环,形成的新链不断与Linker序列互补,不能使核酸修饰纳米金积聚呈现红色,从而间接检测了Target单链核酸。[结果]通过一系列试验确定检测体系,具体为：40μl修饰纳米金溶液（0.52 nmol/L）加入10μl酶循环体系（ZDNA20 nmol/L,33 mmol/L Tris-HCl（pH值7.9）;10 mmol/L MgCl2;66 mmol/LNaCl;0.5 mmol/LdNTP;0.1 mg/ml BSA;0.05 U/μl klenow;1 U/μl Hinc II）,直观或紫外检测并绘制Target浓度与纳米金积聚程度的标准曲线,表明Target浓度在1~200 pmol/L的范围内呈现良好的线性关系,R2=0.946,最低检测限是1 pmol/L。[结论]链替代扩增-纳米金比色检测单链核酸方法简便、直观、成本低,与传统修饰纳米金比色检测DNA方法相比,灵敏度提高了104倍。     

基于核酸适配体的阳离子聚合物聚集纳米金比色法检测水中睾酮

利用核酸适配体对睾酮特异性识别功能以及阳离子聚合物PDDA(poly dimethyl diallyl ammonium chloride,PDDA)聚集纳米金特性,建立了一种高灵敏度、高特异性测定睾酮的定量方法。在最优实验条件[10 mmol/L PB缓冲溶液(pH 7.4),孵育温度25℃,6nmol/L PDDA,6nmol/L睾酮核酸适配体]下,体系吸光度比值A_(650)/A_(520)与睾酮浓度C呈良好的线性关系,决定系数R2为0.995。该方法可检测睾酮浓度范围为2.27nmol/L~1.8μmol/L,最低检测限为2.27nmol/L,将本方法应用于检测自来水睾酮含量,加标回收率为99.81%~105.04%。本方法具有检测范围广、成本低、操作简便、检测灵敏等优点,具有良好实际应用前景。     

金纳米颗粒在食品抗氧化能力评价中的检测应用

选取没食子酸、咖啡酸、原儿茶酸、阿魏酸、香草酸5种酚酸化合物和康师傅东方树叶、农夫山泉水溶C100这2种茶饮料作为还原剂，诱导金纳米颗粒的生长，并利用分光光度计测定所形成金纳米颗粒的吸光度，以评价各试验物质的抗氧化能力。结果表明，5种酚酸化合物抗氧化能力从强到弱依次为没食子酸＞咖啡酸＞原儿茶酸＞香草酸＞阿魏酸；2种茶饮料抗氧化能力从强到弱依次为农夫山泉水溶C100＞康师傅东方树叶绿茶。通过与传统清除2，2－二苯基－1－苦基肼自由基（DPPH·）水平以评价抗氧化能力的方法相比，基于金纳米材料检测抗氧化剂抗氧化能力的方法准确可靠、操作简单、响应迅速，值得推广应用。     

三聚氰胺的危害及其在饲料中的检测方法

三聚氰胺是一种非蛋白物质,长期使用含有该物质的饲料,会对动物产生危害并对人的健康构成威胁。文章介绍了三聚氰胺的特性、危害及在饲料中的鉴别及检测技术,以期为饲料安全分析提供依据。     

乳品及饲料中三聚氰胺检测方法的研究进展

简述了三聚氰胺的理化特性与用途及危害,就三聚氰胺检测方法的研究进展进行了综述。     

三聚氰胺检测方法探析

概述了三聚氰胺的危害性,总结了三聚氰胺的几种检测方法,为实验室检测提供参考。     

纳米金比色法在家蚕微孢子虫检测中的应用

家蚕微粒子病被列为蚕种生产的唯一检疫对象,母蛾镜检家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,简称Nb)是目前最主要的检疫手段,但其准确性受到多种因素影响。建立一种简便、快捷、准确的Nb检测技术,对家蚕微粒子病的防治具有重要意义。基于纳米金(AuNPs)比色法原理,对AuNPs探针的制备及其标记的最佳抗体浓度和最佳pH值进行探究,以及探究AuNPs比色法检测Nb的灵敏度。结果表明,Nb抗体与AuNPs(20 nm)结合最佳浓度为每500μL AuNPs溶液中添加5μL 0.5 mg/mL抗体蛋白,标记最佳pH值为8.5。AuNPs比色法能够最低检测出Nb蛋白量为10 ng。本研究成功建立一种基于AuNPs比色法检测Nb的新方法。     

动物性食品三聚氰胺污染检测技术研究进展

动物性食品三聚氰胺污染严重威胁人类健康。详细综述了目前国内外动物性食品三聚氰胺污染的检测方法,主要包括理化检测方法如电位滴定法、升华法、苦味酸法、高效液相色谱法、气/质联用法、液/质联用法等;免疫检测方法如酶联免疫吸附测定法、胶体金免疫层析试验测定法等。     

激光超声技术在纳米检测与表征中的研究进展

对激光超声技术的产生机理和常用的检测方法进行了综述，重点介绍了激光超声检测技术在纳米材料检测与表征中的应用现状，并提出了其存在问题和今后的发展方向．     

三聚氰胺的毒性及其检测方法

三聚氰胺是一种有机含氮杂环化合物,对人畜健康、畜牧生产危害极大,目前已建立许多检测三聚氰胺的方法,其中部分方法已经发展成熟。文章就三聚氰胺的毒性及检测方法作一综述。     

纳米金核酸适配体HCR放大比色法检测 动物源食品中氨苄青霉素残留

为了检测动物原性食品中氨苄青霉素残留,利用氨苄青霉素与核酸适配体的特异性结合能使其脱离纳米金粒子表面的特性,并利用核酸适配体杂交链式反应(HCR)将信号放大,最终通过检测纳米金溶液吸收光谱的变化建立一种氨苄青霉素残留的高灵敏检测方法.首先对各项反应条件进行优化,筛选出HCR放大纳米金比色法的最优检测方法,优化后的检测方法中,NaC1溶液最优浓度为1 mol·L-1,HCR的最优终浓度为11.5％ (V/V),HCR与纳米金孵育的最优反应条件为37℃、30min.氨苄青霉素的检测范围是0～1.2 μmol· L-1,线性方程为y=0.1636x+0.025,R2=0.9953,最低检测限可达到10 nmol·L-1,在实际样品中的检测回收率是92.30％～103.27％.建立的氨苄青霉素适配体的HCR放大纳米金比色法具有操作简便、反应快速、灵敏度高等优点,可用于氨苄青霉素残留量的快速检测.     

基于NaCl高效聚集纳米金的比色适配体传感器检测多菌灵

植物体和水体中残留的多菌灵通过食物链进入生物体,最终对生物体健康造成威胁,已经引起了社会的广泛关注。现有的检测方法虽然具有一定的灵敏度和精确性,但往往需要昂贵的大型设备、专业的技术人员和较长的检测时间,因此建立快速、高效的检测方法具有重要的现实意义。在本文中,我们使用无标记的多菌灵特异性适配体作为传感探针,NaCl溶液作为聚集诱导剂,纳米金粒子作为颜色指示剂,开发了一种比色适配体传感器用于检测水溶液中的多菌灵。在没有多菌灵时,纳米金颗粒被多菌灵适配体包裹,在NaCl溶液中依然维持分散。当多菌灵存在时,多菌灵适配体与多菌灵特异性结合形成稳定的复合物,此时,溶液中裸露的纳米金在NaCl的作用下聚集,整个体系从红色变为蓝色。该比色法的检测限低至2.3nmol/L,线性检测范围为2.3~800nmol/L。加标水样中多菌灵的平均回收率为96.3%~111.2%,相对标准偏差为1.5%~8.9%。该比色适配体传感器操作简单,检测时间短,仪器要求低,因此具有在水环境中快速检测多菌灵的潜力。     

纳米抗体在真菌毒素检测中的应用

真菌毒素是由真菌产生的次生代谢产物,给人类和禽畜健康造成严重危害,且其对农产品的污染 给全球经济造成重大损失。因此,控制毒素污染、毒素检测和降解的相关技术研发尤为迫切。目前农产品中真 菌毒素检测和大规模筛查的常用手段是以抗体为核心材料的免疫分析技术,相比于传统的单克隆 抗体和多克隆 抗体,新兴的纳米抗体具有体积小、易于体外表达、稳定性高等天然优势,因此其在真菌毒素检测技术研发中 广受重视。系统总结了黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇等常见真菌 毒素检测相关纳米抗体的研发进展,重点综述抗真菌毒素纳米抗体和抗独特型纳米抗体在酶联免疫吸附测定、 生物发光酶联免疫分析、电化学免疫传感器和荧光共振能量转移免疫测定等不同免疫分析方法中的应用。通过 比较不同检测方法中纳米抗体的半数抑制率、检测限和线性范围等性能参数,分析基于不同类型纳米抗体的检 测技术的优缺点。探讨新抗体研发难度大、检测毒素种类少等亟待解决的关键问题,指出纳米抗体和真菌毒素 结合机制分析、理性设计、定向进化、结合多肽的筛选和设计等前沿技术在纳米抗体设计研究中的重要方向, 以期 为进一步开发基于纳米抗体的真菌毒素检测技术提供思路。     

食品中三聚氰胺的危害及其检测方法

三聚氰胺是一种用途广泛的有机化工原料,其含氮量达66．63％。如果在食品原料和食品生产过程中添加,将造成食品中蛋白质虚高的假象,并对人类健康造成严重威胁。对三聚氰胺的性质、用途、危害及检测方法等方面情况进行了综合评述。     

基于核酸适配体的纳米金淬灭罗丹明B荧光法检测氨苄青霉素

研究利用核酸适配体与氨苄青霉素的特异性结合效应以及纳米金对罗丹明B的荧光淬灭反应,通过改变反应体系荧光信号的强弱,从而实现氨苄青霉素的定量检测,建立了氨苄青霉素快速检测的新方法。最佳反应体系条件为适配体终浓度20nmol/L,盐溶液NaCl终浓度0.12mol/L,最优反应为温度30℃。在10mmol/L的3-吗啉丙磺酸(MOPS)缓冲溶液(pH 6.0)的条件下,该方法可检测氨苄青霉素的浓度范围是0.494~2 000nmol/L,其最低检测限为0.494nmol/L,远低于国际相关检测标准。该方法具有检测时效性强、成本低廉、操作简便、反应灵敏等优点,有着良好的推广应用潜能。     

莲藕中重金属Cu~(2+)纳米金快速检测法

[目的]建立一种能适用于现场快速检测Cu~(~(2+))的方法。[方法]以纳米金颗粒(Au NPs)为基础制备检测探针,构建可视化检测莲藕中重金属Cu~(2+)的快速检测体系。[结果]AuNPs比色检测法对Cu~(2+)选择特异性强,通过肉眼可视从而快捷、准确地进行快速检测,莲藕样品中各个水平的加标回收率的结果在86.0%~94.4%,检测效果稳定。[结论]研究可为莲藕中重金属的快速检测提供参考。     

牛奶中三聚氰胺气质检测条件的比较

目前已有几种比较成熟的三聚氰胺检测方法,其中牛奶中三聚氰胺的气质检测方法(GB/T 22388-2008)上机耗时较长,且质谱图不太理想。与饲料中三聚氰胺的气质检测条件进行比较,发现按照饲料中三聚氰胺气质方法(NY/T 1372-2007)改变质谱条件中的升温程序后,质谱图更为理想,回收率可达85%,说明牛奶中三聚氰胺的检测沿用饲料中三聚氰胺的气质条件更快捷、更理想。     

食品中四环素类抗生素金标快速检测试剂条的研究

[目的]建立一种检测四环素类抗生素的新方法。[方法]四环素通过两步衍生化后,与氨基化的BSA上的表位氨基反应,合成TC-BSA偶联物。以四环素多克隆抗体-胶体金复合物作为分析探针,四环素完全抗原作为竞争抗原,构建分析体系。[结果]紫外吸收光谱、凝胶色谱图和红外光谱均表明人工完全抗原偶联成功。选择柠檬酸三钠加入量1.5 ml生成的胶体金作为该试验继续合成胶体金检测探针的金溶胶。当抗体稀释倍数为1∶100、pH值为8.70时,金标灵敏度好。金标试纸条检测样品中四环素的检测限量是200μg/L,检测时间不超过15.0 min。与ELISA法检测样品作对比,采用新法的准确率达100%。探针溶液中加入10%(V/V)保护剂后,试剂条稳定性明显提高。[结论]该研究为四环素的快速检测提供了依据。     

三聚氰胺分光光度法快速检测研究

研究三聚氰胺与试剂1反应后引起溶液吸光度值的变化规律。结果表明:在最大吸收波长260 nm下,在一定浓度范围内,三聚氰胺的浓度与体系吸光度值的降低呈现一定的线性关系,反应体系工作直线为y=-0.0351x+0.3866(R2=0.9989)。其样品回收率为95%～99%。