设施栽培无核葡萄胚珠、胚发育动态

对设施栽培不同熟期的无核葡萄品种(品系)及其杂交组合进行果实、胚珠、胚的生长发育动态进行研究,得出不同品种(品系)胚珠、胚败育时期和胚珠数量的变化规律,确定胚珠、胚发育的最佳时期,为胚挽救的最佳接种时期提供依据。     

I-69杨与小叶杨杂交种胚培养研究

本研究利用组织培养技术对进行培养挽救,以为了提高育种成功率.试验结果表明:外植体的最佳消毒方法为75％酒精消毒30 s后在0.1％升汞处理8min,幼胚的成活率为90％.随着外植体消毒时间增加,幼胚成活率先上升后下降.幼胚最佳萌发培养基为1/2MS+ BA0.1 mg·L-1+ NAA0.01 mg·L-1.最佳继代增殖培养基为MS+ BA0.1 mg· L-1+ NAA0.01 mg·L-1,增殖系数达到6.33.对不定芽增殖最有利条件为:pH值6.0、琼脂浓度6g·L-1和蔗糖浓度30 g·L-1.最佳生根培养基为1/2MS+ IBA0.2 mg·L-1,生根率为93.2％.     

桑叶葡萄离体快繁技术

以桑叶葡萄带芽茎段为外植体,进行腋芽诱导及增殖、生根、炼苗移栽试验,以建立高效的桑叶葡萄离体快繁体系。结果表明:桑叶葡萄单芽茎段在MS+IBA 0.2 mg·L-1+BA 0.5 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1培养基上萌芽效果较好,芽诱导率为85.7%;试管苗在1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1培养基上生根效果较好,生根率为100%;试管苗经炼苗,移栽至蛭石和泥炭土1∶3混合基质中成活率最高,为92.9%。     

油茶胚状体发生诱导初步研究

为探求适宜油茶胚状体发生诱导培养条件,以油茶去壳成熟种子为外植体,进行胚状体发生诱导试验.结果表明:在其他培养条件相同的情况下,不同的油茶品种、不同的植物生长调节剂配比对诱导油茶胚状体发生的影响各异:2,4-D 2.0mg· L-1 +KT1.0mg·L-1对胚性愈伤组织的诱导率最高,达到73％;6-BA 0.6 mg·L-1 +NAA 2.0 mg·L-1对胚状体的诱导率最高,达到73％,诱导效果最佳.     

孝顺竹愈伤组织诱导及植株再生

利用孝顺竹小穗和种胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织并成功实现植株再生.对影响愈伤组织诱导和分化的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选,结果表明:愈伤组织诱导以NB,N6基本培养基附加4 mg·L-1 2,4-D较好;外植体在NB+500 mg·L-1脯氨酸+500 mg·L-1谷氨酰胺+300 mg·L-1水解酪蛋白+30 g·L-1蔗塘+8 g·L-1卡拉胶(Carrageenan)+4 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上经20 d培养,小穗愈伤组织诱导率达87.30%,种胚愈伤组织诱导率为76.27%.愈伤组织预分化及分化的基本培养基以MS较适宜,经MS+30 g·L-1蔗糖+10 g·L-1卡拉胶+4 mg·L-1 KT培养基预分化7 d后,转入无激素的MS培养基上分化14 d,小穗愈伤组织仅个别长出绿色芽头;但种胚愈伤组织芽分化率可达80.0%.分化芽中有8%左右的白化苗,并伴有花叶苗出现.优化后的种胚愈伤组织预分化最佳培养基是MS+3 mg·L-1 6-BA+3 mg·L-1 KT.分化芽苗在添加2mg·L-1 NAA的MS培养基上生根良好,移栽成活率可达70%以上.     

青白杨派间杂交的胚珠培养研究

对由8个白杨派基因型和5个青杨派基因型所组成的13个青白杨派间杂交组合进行胚珠培养试验研究。结果表明:三交要明显好于单交;培养基对胚珠培养影响不大,较合适的培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1;基因型TB03做母本培养效果优于TB04;随着授粉时间延长,胚珠萌发率也越高。     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

外源激素对日本落叶松体细胞胚发生不同阶段的影响

【目的】探究外源激素对日本落叶松体细胞胚发生不同培养阶段的影响,优化日本落叶松的体细胞胚发生条件并提高体细胞胚的质量,为研究外源激素调控落叶松体细胞胚发生的生理机制提供数据支持,为落叶松的规模化繁育和遗传改良奠定基础。【方法】首先确定生长曲线的延迟期、对数期和平台期,然后根据生长曲线,采用正交设计研究胚性胚柄团在2,4-D 0.15、0.30、0.50 mg·L-1、6-BA 0、0.15、0.30 mg·L-1和ABA 0、0.50、1.00 mg·L-1浓度下培养7天、14天、21天的鲜质量增长情况和14天的体胚发生能力,采用析因设计研究悬浮细胞在2,4-D 0.15、0.30、0.50 mg·L-1和6-BA 0、0.15、0.30 mg·L-1浓度下培养7天、14天、21天的细胞鲜质量增长情况和14天的体胚发生能力,结合鲜质量增长和体胚发生能力2种结果确定胚性胚柄团增殖和悬浮细胞生长的最佳激素浓度。最后,以不含GA3、IAA的体细胞胚诱导培养基为对照,分别研究了GA3和IAA 0、10、20、30、40 mg·L-1对体细胞胚发生的影响。【结果】7、14、21天分别处于日本落叶松胚性胚柄团增殖和悬浮细胞生长的延迟期、对数期和平台期。在胚性愈伤组织增殖阶段,2,4-D、6-BA、ABA对胚性胚柄团增殖和体胚发生能力的影响显著(P0.05),最佳的激素浓度是2,4-D 0.15 mg·L-1+ABA0.50 mg·L-1;在悬浮培养阶段,2,4-D、6-BA组合对悬浮细胞生长和体胚发生能力的影响显著(P0.05),最佳激素浓度是2,4-D 0.15 mg·L-1+6-BA 0.15 mg·L-1; GA3、IAA对成熟子叶胚的数量的影响均显著(P0.05),10～20 mg·L-1GA3或IAA时成熟子叶胚数量显著升高,而更高的GA3或IAA浓度将会抑制体胚发生。【结论】外源激素可有效调控日本落叶松的体细胞胚发生,适宜增殖阶段胚性胚柄团增殖和体胚发生能力保持的激素组合为2,4-D 0.15 mg·L-1+ABA 0.50 mg·L-1,适宜悬浮培养阶段细胞生长和体胚发生能力保持的激素组合为2,4-D 0.15 mg·L-1+6-BA 0.15 mg·L-1,添加GA3或IAA 10～20 mg·L-1可以显著提高成熟子叶胚的数量。     

胡桃楸体细胞胚诱导的初步研究

以胡桃楸授粉后不同时期的幼胚及后期培养出的子叶、胚根和胚轴为外植体,进行体细胞胚诱导研究。结果表明,授粉后13周左右的胚轴切块在培养基DKW+6-BA 1 mg·L-1+KT 2 mg·L-1+IBA 0.05 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1上暗培养,每10 d继代1次,培养60 d左右,从胚轴切块表面直接产生体细胞胚,诱导率20%左右。其它胚龄的胚轴体胚诱导率低,而不同时期的子叶、胚根和种胚均未诱导出体胚。     

花曲柳体胚发生和植株再生

以花曲柳合子胚的单片子叶为外植体成功诱导出体胚并获得再生植株。未成熟合子胚的子叶在添加400mg·L-1水解酪蛋白、0.25mg·L-16-BA、1.5mg·L-1NAA、70g.L-1蔗糖和6g·L-1琼脂的MS1/2培养基上可以成功诱导产生体胚,诱导率达到34.7%,每个外植体上体胚数量为2～9个。成熟合子胚的子叶在添加0.25mg·L-16-BA、2mg·L-1NAA的MS1/2培养基(其他成分同上)上可以成功诱导产生体胚,诱导率为10.0%。体胚在MS1/2培养基上经过成熟培养后可以正常萌发,萌发率87.6%。萌发的体胚植株在MS1/2+0.01mg·L-1NAA培养基上生长较好,具备实生幼苗的外观特征。经炼苗后的体胚苗移植到栽培基质(草炭土:蛭石:珍珠岩体积比为5:4:1)中可以正常生长,成活率为75.0%。     

三种枸杞组培快繁技术的研究

以枸杞、新疆枸杞、宁夏枸杞的种子为外植体进行组培快繁技术的研究,结果表明,通过组培法获得的外植体污染率低,而水培法获得的外植体污染率高。枸杞最适宜的初代培养基为MS+6BA 1.5mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1,宁夏枸杞和新疆枸杞最适宜的初代培养基为MS+6BA 2.5 mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1;三种枸杞最佳的继代培养基均为MS+6BA 0.5 mg.L-1+IBA1.0 mg.L-1,分化诱导率分别为60%、40%、44%,增殖倍数分别为4.5倍、3.0倍、3.0倍;在MS+6BA 0.5 mg.L-1+IBA0.1 mg.L-1培养基上三种枸杞的幼苗生长均表现为粗壮;生根培养基以1/2MS+IBA0.1 mg.L-1效果最佳。以腐殖土1∶蛭石1∶河沙1等量混合配制的移栽基质效果最佳,移栽成活率为96%。     

刺五加体细胞胚状体发生及成苗的研究

以刺五加试管苗叶片为试材,将叶片接种于含有不同种类和浓度激素的培养基上进行培养,研究不同激素对刺五加胚性愈伤组织诱导、胚状体发生及生根的影响。结果表明：诱导叶片胚性愈伤组织发生的最适培养基为MS＋6-BA 1.5 mg.L-1＋2,4-D 1.0 mg.L-1,胚状体生长发育的最适培养基为MS＋6-BA1.0 mg.L-1＋IBA0.5 mg.L-1,生根的最适培养基为1/2MS＋NAA0.4 mg.L-1。     

八仙花组织培养技术的研究

对八仙花组织培养的初代培养、继代培养过程做了初步研究和探讨。以八仙花的茎段、茎尖、叶片为外植体,通过MS+6-BA2.0 mg.L-1+IBA0.1 mg.L-1培育出无菌苗。继代培养在MS培养基中加入不同浓度的6-BA(6-苄基腺嘌呤)和IBA(吲哚丁酸)。试验结果表明:在初代培养中的外植体以八仙花茎尖较为适宜,消毒时间7 m in较为适宜。继代培养中以MS+6-BA1.0 mg.L-1+IBA0.1 mg.L-1为八仙花较适宜的增殖培养基。     

赤桉组培快繁技术研究

以赤桉优株的带芽茎段为外植体进行组织培养技术研究,成功建立了赤桉组培快繁体系。研究结果表明：改良MS是赤桉腋芽增殖启动培养的适宜培养基,启动率为77.3%。改良MS＋6-BA1.5mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1是赤桉继代增殖培养的适宜培养基,20d后增殖系数可达4.17,平均芽长2.9cm。改良1/2MS＋IBA1.0mg·L-1＋NAA0.5mg·L-1是赤桉生根培养的最适培养基,生根率达99.5%。3000～6000lux是赤桉增殖的最适光照强度,1500～3000lux是其生根的最适光照强度。     

大岩桐组培育苗试验

以大岩桐幼嫩叶片、老叶、带腋芽的茎段为外植体,进行试管诱导,并进行继代、生根、移栽试验.结果表明:大岩桐诱导外植体以带腋芽的茎段效果最好;适宜的启动培养基、增殖培养基和生根培养基分别为MS+6-BA 1.0mg· L-1+NAA0.2mg·L-1、MS+6-BA0.5 mg·L-1 +NAA0.1 mg·L-1和1/2...     

百日草组织培养技术的研究

以百日草茎段为外植体,对其进行组织培养技术研究,结果表明:不同生长阶段的茎段对相同的消毒处理产生不同的反映,以生长中等的茎段诱导腋芽萌发的效果最为理想,适宜的灭菌方法为70%酒精处理20 s、再用0.1%HgCl2处理8+4 min。最合适的腋芽诱导培养基为MS+KT0.2 mg·L-1+BA2.0 mg·L-1+GA0.5 mg·L-1,外植体污染率较低,诱导率较高;试管苗继代增殖效果最佳的培养基为MS+BA1.0 mg·L-1,不仅增殖系数高,达到8.67,而且试管苗生长健壮;生根效果最好的培养基为MS+NAA0.1 mg·L-1,试管苗根系生长粗壮,生根数量多,平均根长较短。     

银莓离体快繁技术研究

以银莓当年生枝的顶芽和腋芽为外植体,以MS为基本培养基,添加不同配比的植物生长调节剂进行离体培养.结果表明:芽诱导最适宜的培养基为MS+6-BA3.0 mg·L-1+NAA3.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4.5 g·L-1,增殖培养基为MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA1.0 mg·L-1+蔗糖...     

大花蕙兰高频再生培养体系的建立

以大花蕙兰茎尖为外殖体,以MS为基本培养基,探讨了外源激素对原球茎分化、增殖与不定根形成的影响。试验结果表明：采用MS＋6-BA 0.5 mg·L-1～1.0 mg.L-1＋NAA0.1 mg·L-1～0.3 mg·L-1＋AC（活性炭）2.0 g.L-1的培养基,对原球茎的分化及增殖效果好;采用1/2MS＋6-BA0.1 mg.L-1＋NAA0.5 mg·L-1＋AC2.0 g·L-1的培养基,50 d内生根率可达93.3%。在水苔或水苔：椰糠=1：1的基质中驯苗,成活率可达92%以上。     

垂枝桦组织培养技术研究

对垂枝桦芽茎段组织培养技术的外植体启动培养、丛生芽增殖以及试管苗生根等方面开展研究。结果表明:在1/2MS+6-BA1.00 mg.L-1+NAA0.05 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1的培养基上,外植体诱导率最高;在1/2MS+6-BA0.20 mg.L-1+NAA1.50 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1的培养基上,外植体增殖系数最高,可达5～8倍;在1/2MS+NAA0.50 mg.L-1+蔗糖20 g.L-1的培养基中,继代苗的生根率可达100.0%。     

史密斯桉组织培养技术研究

本文探讨了史密斯桉组织培养技术。试验表明,经HgCl2消毒后用1%的氯化钙浸洗处理,能有效控制外植体褐化的发生,褐化死亡率仅为12.5%;始芽萌动以及初期继代培养阶段,采用F＋6-BA 0.5 mg.L-1＋IBA 0.3mg.L-1培养基,有利于外植体的不定芽诱导以及初期的继代扩大培养,增殖系数达3.7;在增殖与伸长生长阶段,采用改良H＋6-BA 0.125～0.25 mg.L-1＋IBA 0.25 mg.L-1＋VC 20 mg.L-1＋VB210 mg.L-1培养基,在保证较高增值系数的情况下,有利于芽的伸长生长;以1/3 MS为基本培养基,添加0.25 mg.L-1IBA对史密斯桉的根系诱导较为有效,生根率达37.8%。