白僵菌生防菌株Bb10和4株家蚕来源白僵菌分离株的生物学特性研究

为探明用于生物防治的白僵菌菌株和家蚕来源白僵菌的关系,用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基对来自广西壮族自治区的白僵菌生防菌株Bb10和收集自广西象州、宜州、环江等蚕区的4株家蚕白僵菌分离株进行分离鉴定,并对菌株的生物学特性和毒力进行比较。菌株的鉴定结果表明:象州寺村镇的家蚕白僵菌Bb9和广西生防白僵菌Bb10均为卵孢白僵菌;象州中平镇的家蚕白僵菌Bb3和环江家蚕白僵菌Bb12为球孢白僵菌;宜州家蚕白僵菌Bb11为小球孢白僵菌。上述5株白僵菌的菌落形态、营养生长量、产孢量等生物学性状及对家蚕的毒力存在差异。生长最快的是Bb9菌株和Bb10菌株,且二者的菌落形态均呈棉絮状,但Bb10菌株的分生孢子较Bb9菌株的分生孢子要大很多;产孢量最高的是Bb10菌株和Bb11菌株;Bb3菌株对家蚕的毒力最强,Bb9菌株和Bb10菌株的毒力相对较弱。上述结果暗示广西蚕区白僵病的病原来源非常复杂,部分蚕区的家蚕白僵菌与生防用白僵菌有一定程度的相似性,可作为家蚕白僵病的溯源和防控依据。     

家蚕自僵病的发生原因分析及对策

<正>白僵病是家蚕真菌性病害之一,是由白僵菌经表皮侵入蚕体而引起发病的。蚕死后,蚕体先软后硬,全身被白色分生孢子覆盖,称之为白僵蚕。白僵菌喜湿怕干,家蚕处于多湿、多雨的环境中,容易被传染白僵病。1998年和1999年秋天我校实习场在饲养秋蚕时,该病的发病率较高,2000年我们根据该病的发病规律,采取了一系列措施,该病基本上得到了控制。     

浅谈白僵病的发生及防治

<正>白僵病是家蚕真菌性病害之一,是由白僵菌经皮肤侵入蚕体而引起发病的.传染途径为接触传染.蚕死后,先软后硬,全身被白色分生孢子覆盖,称为白僵蚕.白僵菌喜湿怕干,多湿地方,多雨季节,蚕就容易被传染发生白僵病.1995年晚秋蚕期,裴圩乡白顶、水银和单庄等村白僵病大流行.据调查这几个村共养蚕2450张,发生白僵病1911张,发病率高达78%.不但蚕农的经济损失大,而且影响了集体和国家的利益.     

生物防治白僵菌与家蚕病原白僵菌的生物学特性初步比较

对广州市森林保护用生防白僵菌Bb2、华南农业大学保存生防用白僵菌Bb7以及收集自广东省化州蚕种场、化州市笪桥村、翁源县硝村等蚕区的3株家蚕白僵菌分离株(Bb8、Bb13、Bb14),分别用PDA培养基进行分离和扫描电子显微镜观察,并对菌株的生物学特性进行初步比较,为开展家蚕白僵病的病原溯源和防控研究,以及为评估蚕区使用白僵菌农药对养蚕生产安全的影响提供实验依据。结果表明,上述5株白僵菌的菌落形态、营养生长量、产孢量等生物学性状存在差异,生长最快的是Bb2菌株,产孢量最高的是Bb8菌株和Bb13菌株;2株僵蚕蛹来源白僵菌Bb8、Bb14的分生孢子在扫描电子显微镜下呈球形或近球形,二者同为球孢白僵菌[Beauveria bassiana(Bals.)Vuill.]。研究结果还显示部分蚕区的家蚕白僵菌与生物防治用白僵菌有一定程度的生物学特征相似性,而相同地区的家蚕病原白僵菌也存在差异,这暗示广东蚕区家蚕白僵病的病原来源复杂,对于2株生防用白僵菌菌株Bb2、Bb7是否为家蚕病原白僵菌还有待进一步研究。     

家蚕三种白僵菌的初步观察

从本校的蚕病实验室收集寄生家蚕的白僵菌中,分离出球孢、小球孢和卵孢三种白僵菌.球孢和小球孢白僵菌分生孢子为球形或卵形,前者孢子较大,且菌落呈平绒状,并逐渐由白变黄;后者孢子较小,菌落后来形成乳粉状孢子层.卵孢白僵菌分生孢子多亚圆形或椭圆形,且大小开差较大,菌落表面高低不平,白色,后期形成粉状.小球孢白僵菌菌丝体,从病蚕节间膜生出,而球孢和卵孢白僵菌全身布满菌丝层,但以卵孢白僵菌生长速度为快.球孢和小球孢白僵菌病蚕血液中有芽生孢子.且球孢白僵菌特多.而卵孢白僵菌病蚕血液中芽生孢子极少.其中以卵孢白僵菌致病力最强.球孢和小球孢白僵菌较弱.     

如何防治白僵病?

时下,由于气温高湿度大,农村养蚕发生家蚕白僵病的现象较多,并有蔓延趋势,对农民养蚕增收影响很大,白僵病如何被传染和怎样防治?是蚕农常咨询的问题。　家蚕白僵病是由真菌中的白僵菌分生孢子,借风力传播到桑叶或蚕体上。在气温24℃～28℃、相对湿度85%以上的条件下,白僵菌的分生孢子发芽并侵入蚕体寄生、繁殖、分泌毒素,从而引起蚕儿发病。蚕死后,随着体内寄生菌的增殖逐渐变硬,再过1～2天后,尸体被菌丝和白色粉末状的孢子所覆盖。孢子通过风力扩散到环境中,继续传染。因此,养蚕发生此病,如处理不好,很难控制。其预防措施为:一、严格消毒。…     

漂白粉不同剂型对白僵菌分生孢子感染蚕体蚕座的消毒效果试验

本文比较了家蚕三龄起蚕白僵菌分生孢子感染蚕体蚕座后,漂白粉液剂和粉剂的消毒效果。结果如下:1.含有效氯0.5％和1％的漂白粉液对白僵菌分生孢子的消毒效果明显优于2％的漂白粉防僵粉;有效氯0.5％和1％的漂白粉液处理,及白僵菌对照与2％的漂白粉防僵粉处理间的白僵病感染率,在统计学上存在极显著的差异;2.含有效氯1％的漂白粉液和2％的漂白粉防僵粉消毒蚕体蚕座,对蚕的生命力、茧丝质等无影响;3.含有效氯1％的漂白粉液蚕体蚕座消毒的成本低于2％的漂白粉防僵粉。试验结果说明:漂白粉液剂消毒防治白僵菌是一种比粉剂更为有效的方法。     

白僵菌感染桑天牛幼虫致病过程的显微观察

为了探讨白僵菌(Beauveria bassian)与寄主桑天牛(Apriona germari)间的相互作用方式及关系,采用扫描电镜观察了白僵菌分生孢子在桑天牛幼虫体表的侵染及穿透过程。结果表明,白僵菌分生孢子接种后8 h就可以附着于桑天牛幼虫体壁,12 h时可见孢子萌发产生芽管和附着胞,16 h即可穿透幼虫体壁;桑天牛幼虫体壁不同结构区影响白僵菌分生孢子萌发速度、附着胞形成以及芽管长度,与幼虫体壁的其它结构区相比,在幼虫体表节间膜处的白僵菌分生孢子萌发早,生长更快,并且孢子不会从幼虫体表的气孔侵入;已死亡虫体的表皮、气门均发生畸变。     

一种有机氯制剂对家蚕病原体的消毒效果试验

用二氯二甲基乙内酰脲分别对家蚕的曲霉菌分生孢子、白僵菌分生孢子、细菌芽孢及细菌毒素、质型病毒多角体（CPV）、核型病毒多角体（NPV）进行了消毒防病试验,表明二氯二甲基乙内酰脲对上述家蚕病原体具有良好的杀灭作用,同时对蚕进行添食二氯二甲基乙内酰脲试验,结果表明对蚕无不良影响。     

家蚕黑尾病及其防治方法研究

家蚕黑尾病主要是由曲霉菌在蚕尾部寄生引起的一种真菌病 ,从病蚕中分离到病原菌有两种 ,一种孢子表面棘多而长、黄褐色 ,孢子大 ,直径 4～ 6 μm ;一种孢子表面棘短而少、蓝绿色 ,孢子小 ,直径 2～ 3μm。黑尾病在高温多湿条件下多发 ,多发生于 4龄中期至 5龄中期。黑尾病病原菌侵染寄生家蚕的过程是 :病原菌分生孢子附着在蚕尾部背板与节间的三角形节间膜处 ,分生孢子发芽侵入蚕体产生黑色小病斑 ,随病情加重病斑加大 ,甚至在病斑处出现节间断裂 ,直至形成黑尾症状。使用药剂防治黑尾病以 5 %亚迪蚕保最佳     

In vitro entomopathogenic activity of Beauveria bassiana against Psoroptes spp. (Acari: Psoroptidae)

An indigenous strain (IHEM 18747) of Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin (Deuteromycetes) was evaluated for its in vitro entomopathogenic activity against the parasitic mite Psoroptes ovis Hering (Acari: Psoroptidae) from rabbits. The following aspects were evaluated: (1) effects of conidial concentration on the viability of adult females; (2) influence of the infection on the fertility, and on the hatchability of eggs; (3) and transmission of infection between mites, and from contaminated surface. Adult females immersed into increasing concentrations of conidia (10(4)-10(9)conidia ml(-1)) showed a dose-related susceptibility. At the highest concentration of conidia, LT50 was 1.6 days while LT50 of the controls reached 5.8 days. The fungus was able to sporulate on the body surface and 100% of the mites were covered with mycelium after immersion in solutions containing 10(7)-10(9)conidia ml(-1). One hundred percent of healthy mites exposed to infected cadavers or surfaces acquired the infection (LT50 reached 1.9 and 1.73 days, respectively, versus 6.1 and 5.1 days in controls, respectively). Egg laying was not reduced by the fungal infection but both the hatchability of the eggs and the life span of the emerging larvae were significantly reduced. Eggs directly infected with the fungus did not show reduced hatchability but the life span of the larvae was shortened. It is concluded that B. bassiana has a high entomopathogenic activity against Psoroptes spp. The in vivo use of this biocontrol agent against Psoroptes spp. in rabbit, sheep and cattle deserves further attention.     

球孢白僵菌侵染对桑天牛幼虫解毒酶活性的影响

为明确球孢白僵菌(Beauveria bassiana)对桑天牛(Apriona germari Hope)的致病机制,探讨了球孢白僵菌侵染对桑天牛幼虫解毒酶系的影响,对用球孢白僵菌处理后不同时间桑天牛幼虫体内羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活性进行了测定。结果表明球孢白僵菌对上述3种酶的活性有显著影响,其中对羧酸酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响,均表现出先刺激后抑制的作用;而对乙酰胆碱酯酶活性的影响则呈先抑制后激活再抑制再激活的趋势。     

家蚕脂肪酶基因Bmlipase-1在不同BmNPV抗性水平家蚕品种间的表达差异

家蚕脂肪酶Bmlipase-1在家蚕中肠组织特异性表达,具有抵抗家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染的活性。以对BmNPV具有不同抗性水平的6个家蚕品种为材料,利用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,检测Bmlipase-1基因在不同家蚕品种5龄期健康幼虫中肠组织的表达水平及感染BmNPV后的5龄期幼虫中肠组织中该基因的表达水平变化,探究该基因表达水平与家蚕对BmNPV的抗性水平的关系。结果表明:不同家蚕品种间Bmlipase-1的表达水平差异显著,抗性较强的品种,其表达水平较高,6个供试品种5龄幼虫中肠组织中的Bmlipase-1表达水平依次为NIL.LVR>P50>CVDAR18>nsd.NIL>892>306,抗性较强品种NIL.LVR 5龄期的平均表达量约为抗性较弱品种306的8.2倍;BmNPV能够诱导Bmlipase-1的表达,但不同品种间该基因的诱导表达差异显著,仍表现为抗性较强的品种该基因的诱导表达水平较高,NIL.LVR经BmNPV感染诱导后Bmlipase-1在5龄期的平均表达量约为抗性较弱品种306平均诱导表达水平的12.4倍。推测Bmlipase-1的表达水平与蚕体自身对BmNPV的抗性水平有一定的关联性。     

莱氏野村菌cq菌株感染家蚕的特性及菌株产生的晶体

莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)cq菌株为昆虫致病性真菌,能感染家蚕发生绿僵病。显微镜下观察菌株体外培养产生的分生孢子呈卵圆形或椭圆形,大小为3.2～4.6μm×2.5～3.2μm,分生孢子梗单生,具有3～4个轮状分支,每个分支着生2～3个瓶梗,瓶梗基部膨大,在瓶梗顶端尖处着生分生孢子。在感染莱氏野村菌的家蚕幼虫血液中可观察到菌株产生的大量豆荚状、酵母状芽生孢子,病蚕血液呈浑浊的乳白色,体表出现褐色病斑,反应迟缓,尸体逐渐僵化,被鲜绿色的孢子粉覆盖。另发现该菌株在感染家蚕幼虫的体表和血液中能产生菱形晶体,同时菌株在体外培养基上培养时也观察到大量的正八面体菱形晶体,且改变培养温度和pH值,晶体产生的时间延长,形状和大小也会发生变化,出现长方形、正方形六面体形状及不规则形状晶体。推测莱氏野村菌cq菌株产生的晶体可能是有利于菌株感染家蚕的一种次生代谢产物。     

不同温、湿度下球孢白僵菌Bb00菌株的生长状况及对桑天牛的致病力研究

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)可作为多种农业害虫的真菌杀虫剂。研究测定了不同温、湿度条件对球孢白僵菌Bb00菌株的营养生长、孢子萌发率以及对桑天牛(Apriona germari)幼虫致病力的影响。结果表明:25℃时该菌株营养生长最好,孢子萌发速度快且萌发率高,在此温度下菌株对桑天牛幼虫的致病力也最强;相对湿度为95%～100%时菌株的营养生长最好,随着相对湿度的增大孢子萌发速度、萌发率也增高,相对湿度100%时达到最高,此时被该菌株感染的桑天牛幼虫的死亡速度快,死亡率也最高。     

Effect of oil-based formulations of acaripathogenic fungi to control Rhipicephalus microplus ticks under laboratory conditions

The formulations of acaripathogenic fungi to control ticks have been widely studied. The present study evaluated the efficacy of oil-based formulations of Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.), isolate Ma 959, and Beauveria bassiana, isolate Bb 986, on different Rhipicephalus microplus stages, comparing the efficacy between aqueous suspensions and 10, 15 and 20% mineral oil formulations. Twelve groups were formed: one aqueous control group; three mineral oil control groups, at 10, 15 or 20%; two aqueous fungal suspensions of M. anisopliae s.l. or B. bassiana; and three formulations of M. anisopliae (s.l.) or B. bassiana containing 10, 15, and 20% mineral oil. To prepare aqueous suspensions and oily formulations, fungal isolates were cultivated on rice grains in polypropylene bags. The conidial suspensions and formulations had a concentration of 10(8)conidia/mL. Bioassays were repeated twice. After treatment, the following biological parameters of engorged females were evaluated: hatching percentage, egg production index, nutritional index, and percentage of tick control. The following parameters were evaluated in the bioassays with eggs: period of incubation, period of hatch, and hatching percentage. Mortality was evaluated in bioassays with larvae. M. anisopliae s.l. and B. bassiana oil-based formulations were more effective than aqueous suspensions against R. microplus eggs, larvae and engorged females, however, there was no significant difference between the three oil concentrations used. M. anisopliae s.l. and B. bassiana formulated in mineral oil reached 93.69% and 21.67% efficacy, respectively, while M. anisopliae s.l. and B. bassiana aqueous suspensions attained 18.70% and 1.72% efficacy, respectively. M. anisopliae s.l. oil-based formulations caused significant effects in all biological parameters of engorged females while B. bassiana oil-based formulations modified significantly the nutritional index only. Eggs treated with M. anisopliae s.l. and B. bassiana oil-based formulations showed hatching rates that decreased 102.5 and 3.65 times, respectively. In the bioassay with larvae, M. anisopliae s.l. oil-based formulations caused nearly 100% mortality five days after treatment, while larva treated with B. bassiana oil-based formulations reached 100% mortality at day 20 after treatment. Larva from oil-based control groups showed mortality at day 15 after treatment, which indicated a possible toxic effect of the oil for this R. microplus stage. The results showed that the fungal mineral oil formulations tested were more effective than the aqueous suspension. Oil-based formulations at 10, 15 and 20% enhanced the activity of M. anisopliae s.l. Ma 959, and B. bassiana Bb 986, isolates against R. microplus eggs, larvae, and engorged females tick. Mineral oil was effective as an adjuvant in formulations of M. anisopliae s.l., Ma 959, and B. bassiana, Bb 986, for the control of R. microplus under laboratory conditions.     

家蚕病原白僵菌的核型分析

用脉冲凝胶电泳中的等高压均匀电场 (counter clampedhomogeneouselectricfield,CHEF)凝胶电泳技术研究了家蚕病原白僵菌 (Beauveriabassiana)核型。家蚕病原白僵菌至少有 6条染色体 ,估算其大小在 2 .5～ 7.2Mbp之间 ,3种分离菌株的核型大小为 2 6.5～ 2 9.0Mbp。家蚕病原白僵菌核型在分离菌株间存在多型性。     

栗蚕幼虫酯酶同工酶酶谱多态性及应用于品种间亲缘关系的分析

栗蚕是珍稀的野蚕资源。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定栗蚕幼虫不同发育时期、不同组织器官的酯酶同工酶酶谱,并依据酯酶同工酶酶谱的多态性分析纯黑、纯绿2个品种的亲缘关系。检测结果表明:栗蚕幼虫中肠的酯酶同工酶活性和酶带数随龄期而增加,且同一龄期以盛食期的酶表达量最高;幼虫中肠及脂肪体中的酯酶同工酶活性较强,并且酶带数较多;2个供试品种间的酯酶同工酶酶谱明显不同。根据酶谱差异分析2个品种的遗传相似系数为0.86,表现出较近的亲缘关系。研究结果提示:栗蚕幼虫酯酶同工酶的酶活性和酶带数与生长发育和组织功能有关,幼虫酯酶同工酶酶谱可以作为分析品种间亲缘关系的依据之一。     

柞蚕对ApNPV感染的抵抗性与部分生命力性状的相关性

柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)是危害柞蚕的主要病原。以柞蚕部分现行品种、杂交种及引进品种为材料,研究柞蚕对ApNPV感染的抵抗性与部分生命力性状的相关性。结果显示,稚蚕对ApNPV感染的抵抗性与普通孵化率呈显著正相关,相关系数为0.71,而与5龄壮蚕对ApNPV感染的抵抗性及自然发病率无显著相关关系;5龄壮蚕对ApNPV感染的抵抗性与5龄壮蚕感染ApNPV后的虫蛹统一生命率呈显著正相关,相关系数为0.98。研究结果表明,柞蚕品种的抗ApNPV病毒性能应依据稚蚕期和5龄壮蚕期2个发育阶段对病毒感染的抵抗性进行综合鉴定。     

不同温湿度对草地螟白僵菌的致病力影响

测试了不同温、湿度下白僵菌(Beauveria bassiana)对草地螟(Loxostege sticticalis)幼虫的致病力。实验设置了17、20、23、26、29℃5个温度水平,相对湿度(95±5)%、(85±5)%、(75±5)%、(65±5)%和(55±5)%5个梯度,用浓度为1×109孢子/mL的白僵菌孢子液感染2龄的草地螟幼虫。结果表明:在温度为26℃时的致死中时(LT50)最短,死亡速度最快,死亡率最高;高于或低于此温度时,草地螟幼虫的LT50延长,死亡速度减慢。相对湿度发生变化时,草地螟幼虫死亡速度和死亡率不同。相对湿度为95%时,棉铃虫死亡速度最快,死亡率最高;相对湿度低于55%时,棉铃虫死亡率显著降低。相对湿度越高,草地螟幼虫死亡速度越快。