奶牛金黄色葡萄球菌隐性乳腺炎的研究进展──临床诊断及血清图谱分析

乳腺炎是造成乳品工业经济损失最重要的原因之一〔1〕。以美国为例，每年治疗乳腺炎的耗费为每头牛181美元，全国每年要拿出20亿美元用于治疗和预防乳腺炎〔2〕。我国孙福先、单先贵、杨章平等〔3，4，5〕报道隐性乳腺炎阳性率达85.7%，导致乳腺炎的主要病原体有金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎杆菌和链球菌，其中金黄色葡萄球菌是导致奶牛乳腺炎的最主要的病原体〔6〕。 本文论述了金黄色葡萄球菌感染的特点，就近年来国内外对金黄色葡萄球菌隐性乳腺炎的早期临床诊断方法及血清图谱分析的研究加以综述，以期为乳腺炎的早期诊断及疫苗生产…     

奶牛坏疽性乳腺炎的临床诊治一例

2004年8月初，赵光农场张某饲养的一头奶牛分娩后不久即突然发病，主要特征为乳腺肿大，患乳区变色、凉冷，皮肤渗出等，经过对症治疗，患牛好转，现报道如下。     

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌血清型的分离鉴定

乳腺炎是造成奶牛工业经济损失的最主要原因.在美国,每年的经济损失估计达20亿美元,在世界范围内,每年的牛奶生产损失估计可达380万吨.尽管不能做出精确的估计,但是潜在的损失同样发生在肉牛、山羊、绵羊和猪上.     

金黄色葡萄球菌诱发小鼠乳腺炎试验

近年来，国内外开始选用小鼠建立乳腺炎疾病模型，成功解决了使用奶牛或奶山羊等动物成本太高或操作不便以及无法进行标准化管理的问题。但其在诱发小鼠乳腺炎的操作中对小鼠乳腺组织造成人为的损伤，不能真实模拟奶牛乳腺炎的自然发病机制。本试验自制了乳腺接种器，并用其将金黄色葡萄球菌接种于小鼠乳腺，建立了一种无创伤诱发小鼠乳腺炎的方法，这对小鼠乳腺炎模型的建立提供了技术支持。     

中西医结合治疗奶牛坏疽性乳腺炎

奶牛坏疽性乳腺炎,对奶牛的危害特别大,轻则易造成奶牛患病的乳区形成瞎乳区而报废,重则会使奶牛并发败血症而造成死亡.一般可发生于奶牛产后2个月内,其他时间偶有发生.常因乳房皮肤损伤或坏疽菌经乳头侵入所致.     

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌新型疫苗研究进展

病原微生物感染是导致奶牛乳腺炎发生的最主要原因,其中金黄色葡萄球菌的带菌率最高。疫苗被认为是当前预防疫病传播并最终根除传染病的最有发展前景和最经济有效的方法和措施。随着基因工程、分子生物学、遗传学及免疫学等学科知识的迅猛发展,多种新型疫苗因为具有安全可靠、容易进行质量控制等优点正引起更多研究者的广泛关注,金黄色葡萄球菌新型疫苗的研究取得了长足进步,本文针对金黄色葡萄球菌新型疫苗加以综述。     

奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎的诊治方法

金黄色葡萄球菌不是专性乳腺(寄生)菌,也可以定植于奶牛乳头、乳房、扁桃体、阴道以及躯体其他部位的不健康皮肤上。而主要的感染来源来自感     

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌免疫逃避机制研究进展

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）型奶牛乳腺炎是一种较难控制的慢性、亚临床型传染病,给奶牛养殖业带来巨大的经济损失。多种SA免疫逃避机制在乳腺炎发生、发展过程中起重要作用,且SA的免疫逃避机制多与菌体毒力因子相关。本文对近年研究的奶牛乳腺炎SA的免疫逃避机制进行了综述,以期为SA型奶牛乳腺炎的防治研究提供参考。     

PCR扩增Nuc基因检测奶牛乳腺炎致病性金黄色葡萄球菌

为建立奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌致病菌株的检测方法,依据金黄色葡萄球菌耐热核酸酶Nuc基因序列,设计合成特异性引物,通过聚合酶链式反应扩增Nuc基因,并将扩增基因克隆入T载体,进行序列测定,对所分离的奶牛乳腺炎病原菌进行鉴定。结果显示:金黄色葡萄球菌扩增出特异性条带,大小为694bp;其他菌株未出现条带。敏感性检测的最低浓度为1.25×103cfu/mL。本试验所建立的方法具有特异性强、敏感度高的特点。     

PCR扩增Nuc基因检测奶牛乳腺炎致病性金黄色葡萄球菌

为建立奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌致病菌株的检测方法,依据金黄色葡萄球菌耐热核酸酶Nuc基因序列,设计合成特异性引物,通过聚合酶链式反应扩增Nuc基因,并将扩增基因克隆入T载体,进行序列测定,对所分离的奶牛乳腺炎病原菌进行鉴定.结果显示:金黄色葡萄球菌扩增出特异性条带,大小为694bp;其他菌株未出现条带.敏感性检测的最低浓度为1.25×103 cfu/mL.本试验所建立的方法具有特异性强、敏感度高的特点.     

金黄色葡萄球菌性乳房炎的诊治

金黄色葡萄球菌是一种经常引起奶牛乳房炎的细菌，且对一般性药物易产生耐药性，同时又经常表现为隐性感染，给临床诊断和治疗带来许多不便。现就金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎的诊断及防治报道如下。     

奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌噬菌体P82的分离及特性研究

【目的】 为开发噬菌体"鸡尾酒"制剂防治奶牛乳腺炎提供生物学材料。【方法】 以实验室分离的奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌82为宿主菌,通过点滴法和双层平板法在奶牛场的污水、弃奶和粪便混合物中分离并纯化其噬菌体,通过噬菌斑及透射电子显微镜对该株噬菌体的形态特征进行观察。利用核酸酶处理分析该噬菌体核酸类型,并对其裂解谱、最佳感染复数、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性进行研究。【结果】 分离筛选出金黄色葡萄球菌82的裂解性噬菌体P82,电镜下观察其头部为二十面体,大小约为120 nm×83 nm,有一条带可伸缩尾鞘的长尾,长约126 nm,属于有尾噬菌体目,肌尾噬菌体科。通过琼脂糖凝胶电泳鉴定其核酸类型为双链DNA （dsDNA）。噬菌体P82的最佳感染复数为0.001,对奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌裂解率为36.51%（23/63）,宿主谱较广;其生长潜伏期约为25 min,爆发期约为45 min,裂解量约为74 PFU/cell;在pH 4.0~12.0时活性稳定,在pH 2.0和13.0时则完全失去活性。噬菌体P82热稳定性较高,在70 ℃作用60 min后仍有裂解能力,在80 ℃作用40 min时则失去裂解能力。【结论】 本研究分离的噬菌体P82效价较高、裂解能力强、增殖速度快、噬菌谱广,对不同温度和pH均有较好的耐受度,能作为专一性裂解奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌的噬菌体候选株,可与其他噬菌体混合制成噬菌体"鸡尾酒"制剂用于防治奶牛乳腺炎,为奶牛乳腺炎的噬菌体疗法提供材料。     

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌超抗原的检测

用PCR方法对分离到的临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌124株.隐性乳腺炎金黄色葡萄球菌213株,进行超抗原毒素sea,seb,sec,sed,see和tst基因的榆测.结果表明:奶牛临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素基因和tst基因的阳性率为27.42%,隐性乳腺炎金黄色匍萄球菌肠毒素基因的阳性率为1.41%,奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌产生毒素的类型以SEA,TSST-1和SEC为主,对于肠毒素基因和tst基因PCR阳件的金黄色葡萄球菌同时用ELISA和RPLA两种方法进行检测,3种检测方法结果基本一致.     

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌TH-16S 733330株荚膜多糖免疫原性研究

从新疆分离的奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌,经TH-16S系统鉴定,选取鉴定结果为733330的优势生化株。毒力测定试验表明,1×108CFU/只的接种量会使小白鼠在24 h内死亡。菌株接种Columbia Broth Modified 37℃摇床100 r/m in培养24 h后,用0.05%戊二醛灭活。灭活培养物经4℃30 m in 17 000 g离心去除细胞碎片,上清用PBS(pH 7.2)4℃透析48 h,PEG20000浓缩10倍,透析,加入终浓度为10 mg/mL的蜂胶-乙醇浸液,作为荚膜多糖免疫原。先分别用荚膜多糖免疫原0.1、0.2、0.4 mL免疫小白鼠,再用组合免疫原(荚膜多糖+109CFU/mL菌体)0.1、0.2、0.4 mL免疫小白鼠。6组小鼠于免疫后14 d连同对照小鼠2组攻击金黄色葡萄球菌2×108CFU/(0.2 mL.只)。结果表明,荚膜多糖免疫原组保护率分别为0、25%和50%,(荚膜多糖+菌体)组保护率分别为25%、75%和100%。     

金黄色葡萄球菌诱导大鼠乳腺炎模型的建立

妊娠Wistar大鼠84只,随机分为试验组和对照组(n=42)。产后第4天,试验组经第4对乳腺的乳导管灌注金黄色葡萄球菌0.1 m L(2×107CFU/m L),对照组注射同量的生理盐水。动态观察和记录大鼠的临床症状、病理组织学变化、胸腺和脾脏指数、乳腺组织内细菌数和血液学变化。结果显示,注菌后,试验组胸腺和脾脏指数显著或极显著升高(P0.05或P0.01);乳腺组织内细菌量在接种后6 h迅速升高,之后开始下降,直至96 h,乳腺组织仍可以检测到金黄色葡萄球菌,高于300 CFU/mg乳腺组织;外周血中的嗜中性粒细胞在接种后6 h,12 h,极显著升高(P0.01),之后差异不显著;病理组织学检查显示,接种细菌后可导致明显的炎症反应。表明本研究建立了经乳腺导管灌注金黄色葡萄球菌诱发大鼠乳腺炎的动物模型。     

CpG-DNA对金黄色葡萄球菌诱导的大鼠实验性乳腺炎的作用

72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),对照组于产后0h左后腿胫骨前肌内注射0.01mol/L、pH7.2 PBS100μL/只;试验组肌注CpG-DNA 200μg/只。产后72h经乳头管灌注2×1012CFU/mL金黄色葡萄球菌各100μL/侧到第4对乳腺(两侧)内。分别于灌注前0h,灌注后8、16、24、48和72h(n=6)颈静脉放血处死。结果显示,乳腺组织细菌数在灌注后24h上升至最高,CpG-DNA能显著降低8、16和72h的细菌数。IL-2在不同时间点有显著下降,对照和试验组乳腺组织IL-2分别在16和24h下降至最低。TNF-α在24h达最高,CpG-DNA能显著提高0、24和72h乳腺组织TNF-α水平。CpG-DNA能显著提高血清感染后各时间点及乳腺组织0和16h MPO水平。乳腺组织NAGase和白蛋白在24h上升至最高,血清中24h下降至最低。CpG-DNA能显著降低48和72h乳腺组织NAGase活力,并极显著降低8和72h乳腺白蛋白浓度。上述结果显示,CpG-DNA可促进细胞因子的产生,减少乳腺组织细菌数量,减轻炎症介质对细胞和血-乳屏障完整性的损伤,提示CpG-DNA对金黄色葡萄球菌感染诱发的大鼠乳腺炎有一定的保护作用。     

甘肃省部分地区奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

通过对甘肃省部分地区奶牛场的323份乳腺炎乳样进行金黄色葡萄球菌的分离及对分离株进行耐药性分析,旨在为临床合理用药提供科学依据。采用血平板培养基、选择性培养基(Baird-Parker培养基),营养琼脂培养基,结合革兰染色、镜检,对可疑菌落分离纯化后进行血浆凝固酶试验,确定分离株是否为金黄色葡萄球菌;选用临床常用的10种抗生素对分离株进行药敏试验。结果表明,170株分离株对青霉素、头孢曲松钠、四环素、克林霉素表现出明显耐药,耐药率分别为75.29%、60.59%、63.53%、61.76%,而对左氧氟沙星、环丙沙星、氯霉素高度敏感,敏感率分别为72.94%、74.71%、71.76%。     

金黄色葡萄球菌诱导型乳腺炎对中国荷斯坦奶牛乳中脂肪酸组成的影响

本文旨在研究金黄色葡萄球菌诱导型乳腺炎对中国荷斯坦奶牛乳中脂肪酸组成及其绝对含量的影响。根据奶牛乳房结构,试验组利用通乳针将金黄色葡萄球菌细菌悬液经乳头管注射入奶牛乳房内,建立诱导型金黄色葡萄球菌型乳腺炎模型,对照组灌注磷酸盐缓冲液,采用气相色谱法测定乳中的脂肪酸绝对含量。结果表明:乳中共检出34种脂肪酸,金黄色葡萄球菌诱导对感染乳区脂肪酸合成产生直接影响。按不饱和度和碳链长度划分的6大类脂肪酸中,试验组在感染后11 h与感染前24 h相比,短链脂肪酸、中链脂肪酸和饱和脂肪酸的绝对含量均显著降低(P0.05);对照组有相同变化趋势,但除短链脂肪酸外均未达到显著水平(P0.05)。感染后23 h试验组6大类脂肪酸的绝对含量均低于对照组。结果提示:金黄色葡萄球菌诱导型乳腺炎影响了奶牛脂肪酸的合成过程,降低了脂肪酸各组分的绝对含量。