'云田彩桂'组织培养研究

通过对'云田彩桂'不同树龄植株采集的外植体进行组织培养技术研究,结果表明:春季采取'云田彩桂'3y的幼嫩枝条作外植体较好,这是因为在幼树当年生枝条中所含的有毒有害物质及酚类化合物较少,能有效降低褐化率和污染率.最适宜的消毒剂及消毒时间为:75％酒精1min,0.1％的氯化汞溶液消毒10min,成活率达46.5％.在增殖阶段为防止无菌苗褐化及提高增殖系数,采用MS+6-BA1.0/L+NAA0.1mg/L+Vc 20mg/L的培养基配方,能有效减少褐化率,并提高增殖系数至2.02.     

紫花苜蓿品种'德宝'不同外植体愈伤组织诱导研究

以紫花苜蓿'德宝'的下胚轴、叶片、子叶和叶柄为外植体,研究了不同浓度(1.5、2.0、2.5 mg/L)2,4-D对各外植体愈伤组织诱导的影响.结果表明:4种不同外植体的愈伤组织发生能力存在显著差异,下胚轴的愈伤组织诱导率最高,达98.5％,显著高于叶片(P＜0.05),其他各外植体之间差异不显著.不同浓度2,4-D下各外植体愈伤组织发生也存在显著差异,浓度1.5 mg/L和2.0 mg/L的2,4-D MS培养基对愈伤组织的诱导效果优于浓度2.5 mg/L的2,4-D MS培养基(P＜0.05),且有利于愈伤组织的胚性化.另外,2,4-D浓度在1.5～2.5 mg/L范围内,低浓度利于叶片和子叶愈伤组织发生,二者在1.5mg/L浓度下的愈伤率可达100％,显著高于2.5 mg/L浓度处理,而叶柄和下胚轴的愈伤率在各浓度下差异不显著.     

杜鹃红山茶愈伤组织诱导条件的优化

为明确不同处理对杜鹃红山茶愈伤组织诱导的影响,以8年生杜鹃红山茶为材料,研究不同外植体材料、灭菌方式、培养基种类、激素种类及配比、活性炭浓度等对杜鹃红山茶愈伤组织诱导的影响.结果表明:(1)在相同的灭菌方式下,叶片外植体愈伤诱导率均明显高于叶柄外植体和花瓣外植体.采用0.1％HgCl2灭菌5 min,叶片外植体愈伤诱导率最高,达48.89％.(2)MS培养基是最适合叶片和花瓣外植体愈伤组织诱导的基本培养基,叶片和花瓣在该培养基中的愈伤诱导率均最高,分别达42.12％、37.62％.(3)培养基中添加不同浓度的6-BA与GA3对叶片外植体愈伤诱导率具有显著影响,低浓度的6-BA和高浓度的GA3有利于提高愈伤诱导率,愈伤诱导率最高的激素组合为1 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA+0.6 mg/L GA3,诱导率达61.67.(4)外植体褐化率随添加活性炭浓度的增加呈逐渐降低的趋势,添加活性炭浓度为1.2 g/L时,叶片和花瓣外植体褐化率最低且愈伤诱导率处于最高水平.     

喜树愈伤组织诱导与抑制褐化的研究

[目的]筛选喜树外植体的最佳诱导培养基,研究抑制外植体及继代愈伤组织褐化的方法。[方法]以喜树的幼叶和种胚作为外植体,通过测定过氧化物酶和多酚氧化酶的活性,从外植体选择、培养基种类、激素配比、添加物的处理等方面进行愈伤组织的诱导和抑制外植体及继代愈伤组织褐化的研究。[结果]幼叶外植体的最佳诱导培养基为:SH+NAA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.25mg/L;种胚外植体的最佳诱导培养基为:MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L。抑制幼叶外植体褐化的方法为:增加外植体大小,吹干培养基表面水分。抑制愈伤组织继代培养褐化的方法为:最佳诱导培养基附加30mg/L抗坏血酸和5g/L活性碳;1次继代后,将质地致密的愈伤组织转移到MS培养基上培养。[结论]该研究为喜树的遗传转化和植株再生提供理论基础。     

人参茎愈伤组织的诱导和分化研究

以4年生人参茎为外植体,探讨了最适的消毒方法;以MS培养基为基本培养基,用均匀设计的方法探讨了2,4-D和6-BA不同浓度组合对人参愈伤组织诱导率的影响;用2,4-D和6-BA不同浓度组合探讨了对人参茎愈伤组织分化成再生苗的影响。结果表明:人参茎部最好的消毒方法为自来水冲洗2h,无菌操作台内70%酒精溶液浸泡30s,再用0.1%升汞溶液浸泡4min;最适合人参茎外植体诱导愈伤组织的培养基为MS+2.57mg/L 2,4-D+0mg/L 6-BA,诱导率可达64.75%;人参茎愈伤组织分化成试管苗的最好培养基为MS+2.00mg/L 2,4-D+0.05mg/L 6-BA,分化率达22.22%。     

金花茶花丝愈伤组织培养及其对抗生素敏感性研究

利用金花茶幼嫩花蕾进行体外培养,建立了花丝愈伤组织培养体系。试验结果表明:外植体表面消毒70%乙醇浸泡的适宜时间为10 min;花丝愈伤组织诱导和增殖培养的适宜培养基为MS+TDZ 0.5mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+30 g/L蔗糖(pH 5.8),培养条件为25(±1)℃黑暗。卡那霉素和潮霉素对愈伤组织诱导和增殖培养的影响结果表明,卡那霉素100 mg/L或潮霉素30 mg/L导致花丝外植体全部褐化死亡;卡那霉素75 mg/L或潮霉素20 mg/L能抑制愈伤组织从花丝外植体上产生;卡那霉素100 mg/L或潮霉素25mg/L则能完全抑制愈伤组织的增殖并导致最终褐化死亡。     

宁夏枸杞再生体系的建立

以无菌枸杞幼苗为试材,应用MS培养基为基本培养基,以枸杞子叶、下胚轴和真叶为外植体,利用6-BA、IBA和NAA的配比组合,研究了枸杞愈伤组织的诱导、器官发生和愈伤组织褐变的防治条件.结果表明:在培养基中加入1.0 mg/L维生素C以及加快继代时频率均可抑制愈伤组织的褐化;诱导愈伤组织的最佳外植体为下胚轴,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+IBA 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L;丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L;根诱导的最适培养基为MS+IBA 1.0 mg/L;生根苗经炼苗后移栽,成活率达85%.     

宽叶缬草的离体培养及不定芽发生

以盆栽宽叶缬草野生苗为材料,切取其嫩叶、叶柄、地下幼嫩根状茎和不定根作为外植体,探讨不同消毒方式及不同生长调节剂组合对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响.结果表明,嫩叶和叶柄外植体的消毒方式以70%酒精浸泡30s,再用0.1%升汞浸泡6min效果较好;地下部外植体因受污染比较严重,消毒困难,死亡率为100%.叶片和叶柄均能诱导出愈伤组织,且产生具香味的毛状根.适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D2mg/L+6-BA0.5mg/L,以叶为外植体的诱导率较高,可达80%.愈伤组织在供试培养基中分化困难,最高分化率仅为25%,培养基为MS+6-BA4mg/L+NAA0.5mg/L.以具芽点分化的愈伤组织为材料进行石蜡切片,显微观察显示,不定芽的发生起源于愈伤组织表皮细胞的分裂,属于外起源.     

多刺绿绒蒿的组织培养

本研究选取多刺绿绒蒿幼株以及成株的不同部位作为外植体,以MS为基础培养基,研究了不同激素配比、光照、消毒时间及外植体大小以及保存条件与时间对愈伤组织诱导的影响。结果表明:1)0.1mg/L NAA+1 mg/L 6-BA激素浓度适合多刺绿绒蒿的子房以及根外植体愈伤组织的诱导。2)光照方式影响愈伤组织的诱导以及其褐化程度。3)植物受粉或长期冷藏后逐步失去诱导成为愈伤组织的能力,同时表皮毛存在降低了消毒效果。4)在愈伤组织萌出后未及时去除子房珠被与胚轴,可导致愈伤组织的褐化率明显上升,并影响生长。本研究成功建立了多刺绿绒蒿完整的外植体愈伤组织诱导与继代保存的技术体系。     

三角梅外植体消毒和愈伤组织诱导研究

[目的]探索三角梅的最佳消毒时间和最佳愈伤组织诱导培养基。[方法]采用不同消毒时间对三角梅的7种外植体进行灭菌,并用不同激素与浓度组合的培养基诱导愈伤。[结果]三角梅的最佳外植体为半木质化茎段;最佳消毒方法为先用浓度75%酒精溶液灭菌30 s,无菌水冲洗5次,再用浓度0.1%升汞溶液消毒9 min,最后用无菌水冲洗7~8次;最佳诱导培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA。[结论]获得了三角梅外植体的最佳消毒方式和最佳愈伤组织诱导培养基,为三角梅组织培养体系的建立奠定了基础。