蓝舌病病毒甘肃分离株的定型研究

继利用蚀斑抑制中和试验对蓝舌病病毒山东分离株（L001）进行血清型鉴定后，又对蓝舌病病毒甘肃分离株进行了血清型鉴定，证实甘肃分离株为蓝舌病病毒11型。     

血清8型蓝舌病病毒侵入北欧

蓝舌病是由蓝舌病病毒感染引起的、库蠓传播的一种严重威胁绵羊和山羊的传染病，在世界许多地方都有流行。牛是贮存宿主，但通常不发病。已知的蓝舌病病毒分为24个血清型。以前，蓝舌病病毒几乎没有在欧洲出现过，但在1998年以后．陆续有几个血清型从土耳其和中东入侵希腊、意大利、西班牙、葡萄牙以及巴尔干半岛的国家。     

四川省美姑县羊蓝舌病病原分离鉴定

对采自四川省美姑县的疑似蓝舌绵羊、山羊血清１４份,全血１３份,进行蓝舌病抗原、抗体检测和病毒分离鉴定。结果在１０份血清样品中检测到蓝舌病抗体,在１３份全血样品中分离到２株病毒,经蓝舌病病毒群、血清型鉴定,分离毒株的血清型为ＢＴＶ－１型。     

动物蓝舌病监控系统的建立及其流行病学研究

观测绵羊蓝舌病自然发病区蓝舌病的传播规律及病毒血清型的分布，为本病的防治提供科学依据。于1995年7月起，在师宗县建立了动物蓝舌病监控动物群，经3年的观测，对19头牛监控，共采血667份，分离获得蓝舌病病毒10株，经血清学鉴定为3、4、5、15型血清型，该3个血清型均为首次分离到的国内新毒株。     

用~(32)P标记RNA5′末端探针检测蓝舌病病毒研究初报

目前世界上报导蓝舌病病毒(BTV)已有24个血清型,各型病毒的毒力不一致。由于蓝舌病病毒的基因序列漂移和基因重配列现象的存在,新的BTV血清型还有不断增加的趋势,这就给蓝舌病的研究和诊断带来了困难。近年来,不少国外学者应用核酸杂交技术来研究蓝舌病各型之间的相关性和进行病毒的检测。不少国家和地区用琼扩及其它血清     

蓝舌病病毒7型毒株的分离与分子鉴定

为监测广东省蓝舌病流行状况,2014年从广东省某一奶牛场采集血液样品,检测虫媒病病原,对经RTPCR检测蓝舌病病毒核酸阳性的样品进行病毒分离并鉴定。经鸡胚静脉接种后取肝,研磨后离心取上清转接C6/36细胞和BHK-21细胞,出现CPE,RT-PCR检测蓝舌病病毒的VP7基因并进行序列比对,电镜观察病毒粒子,证实分离到蓝舌病病毒,命名为GD/ST2014。进一步扩增VP2基因,进行系统发育树分析,以及血清中和试验,表明此分离株为血清型7型。这是国内首次报道牛源蓝舌病病毒血清型7型的分离鉴定。     

欧洲地区蓝舌病疫情综述及对我国的启示

蓝舌病是由蓝舌病病毒引起的一种主发于反刍动物的虫媒传染病,已被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告的多种动物共患病之一。牛和山羊对部分血清型的蓝舌病病毒也易感。2006年以来欧洲地区不断暴发蓝舌病疫情,给当地畜牧业和社会经济都造成了巨大损失。本文介绍近年来欧洲蓝舌病的流行情况以及欧盟采取的防控措施,总结了有关的经验和教训,分析了对我国蓝舌病防控的几点启示,以期为我国蓝舌病的预防提供借鉴。     

斑点免疫结合试验和酶联免疫吸附试验检测绵羊蓝舌病病毒抗体的比较

蓝舌病,一种由节肢动物传播的家畜和野生反刍动物的病毒性疾病,世界范围发生。虽然所有反刍动物可能易感,但通常只见绵羊出现严重的临床疾病。 蓝舌病病毒(BTV)有24个血清型。这些血清型可用中和试验区别。全部血清型具有一种群特异性抗原,其抗体能用不同免疫学方法如补体结合、免疫扩散(ID),免疫     

蓝舌病病毒基因和蛋白的特点及利用

蓝舌病病毒是引起绵羊、牛蓝舌病的病原.该病毒是一种结构复杂的RNA病毒,对其分子生物学特性的研究,可以阐明其致病机制和遗传学规律,有助于蓝舌病预防治疗的研究.国内对该病毒的研究起步较晚,本文简述了蓝舌病病毒基因结构和蛋白特点及对其的利用,为预防及治疗提供参考.     

云南省师宗县蓝舌病病毒的分离及鉴定

为了解近年来云南省师宗县蓝舌病病毒流行情况,2012年在师宗县五龙乡建立了10头蓝舌病血清学阴性黄牛的监控动物群。从2012年5~10月,每周采血1次,11~12月,每月采血1次,采用C-ELISA进行血清学监测。8月开始动物血清学检测结果转阳性,至11月,监控动物全部转为阳性。用转阳前1周、转阳本周、转阳后2~13周的经处理的红细胞静脉接种鸡胚,收获鸡胚肝脏,用PBS悬浮捣碎的鸡胚肝脏,上清接种于C6/36细胞一代、BHK-21三代后,出现细胞病变(cytopathic effect,CPE)。采用RT-PCR方法,针对蓝舌病较为保守的血清型群特异片段VP7设计了2对引物,扩增其相应片段。结果显示,共分离到86份疑似分离物,其中67份疑似分离物细胞培养液上清经RT-PCR扩增,均扩增出1156 bp片段,初步确认为蓝舌病病毒。采用国际24个蓝舌病标准毒及24个标准阳性血清对86份疑似分离物及其对应血清进行细胞微量中和试验,67份毒株为蓝舌病病毒,与RT-PCR结果一致。通过对2份经中和试验定型为BTV-1、BTV-16分离株的VP2基因测序分析发现,BTV-1株序列与同型Y863(登录号:KC879616)参考毒株的同源性为92%,BTV-16株序列与登录号为AB686221的毒株同源性为99%。结果表明共分离到67株蓝舌病毒株,分离株主要为BTV-1、BTV-9、BTV-16三个血清型。     

蓝舌病在全球的分布概况

蓝舌病为OIE规定的需通报疫病，我国将其列为一类动物疫病。该病已经给全球大部分流行地区造成巨大经济损失。我国于1979年首次证明该病存在，且在我国流行初期即造成大量易感动物死亡，给我国畜牧业带来了重大经济损失。但蓝舌病在我国仍属冷门研究方向，我国到底分离鉴定出多少个血清型的蓝舌病病毒，该病在我国的分布范围到底有多广？许多畜牧兽医工作者对这些问题并不是非常清楚。特别是在近年来鲜有蓝舌病引起动物发病死亡报道的前提下，人们对蓝舌病的重视程度进一步降低。本文对蓝舌病在全球的流行概况进行简要阐述，同时，对蓝舌病在我国40年的流行情况进行回顾，希望该病在我国能够得到足够的重视。     

家畜蓝舌病的流行、诊断与防制

蓝舌病是由蓝舌病病毒引起的一种主要发生于绵羊的传染病,临床上比较少见。但其他反刍类家畜也可能被感染。该病最早于1876年发现于南非的绵羊,1906年定名为蓝舌病。1949年后,该病在全世界50多个国家或地区陆续发生。我国于1979年在云南首次发现蓝舌病,并分离出蓝舌病病毒,从而确定了蓝舌病的存在。随后湖北、四川、安徽、山西也相继报导了该病。该病分布于全球大多数地区,成为世界性危害的虫媒传染病。     

蓝舌病的研究进展

蓝舌病是由蓝舌病病毒以库蠓作为传播媒介引起的一种主要侵害家饲和野生反刍兽的传染病。目前,蓝舌病病毒有26个血清型分布世界各地,且型与型之间不发生交叉免疫,主要感染绵羊、山羊、牛、鹿等反刍兽,可引起不同程度的临床症状,甚至导致反刍兽死亡。检测蓝舌病病毒的方法有很多种,主要以血清学及分子生物学为主。文章综述了蓝舌病的流行分布情况、病原特性、传播媒介、发病机理与临床症状、诊断技术与疫苗等方面的研究进展。     

蓝舌病1型病毒VP7蛋白表(拟)位定位及免疫检测分析

为研究蓝舌病1型病毒VP7蛋白关键性氨基酸表位定位,本试验应用抗蓝舌病1型病毒VP7蛋白单克隆抗体淘选噬菌体展示的7肽随机肽库,对筛选的共有序列噬菌体扩增纯化,通过ELISA、竞争性ELISA分析共有噬菌体拟位与蓝舌1型病毒VP7蛋白单克隆抗体的免疫反应性。结果表明,含有LNWPMVR基序的噬菌体拟位能够与蓝舌病1型病毒VP7蛋白单克隆抗体发生特异性结合,并且此结合能被蓝舌病1型病毒抑制或阻断,表明噬菌体7肽模拟了BTV蛋白上与蓝舌病1型病毒VP7蛋白单克隆抗体结合的抗原决定簇,提示蓝舌病病毒VP7蛋白的第163-189位氨基酸（LNAGARGDVQQIFQGRNDPMMIYLVWR）构成蓝舌病病毒VP7蛋白特异性表位。     

蓝舌病病毒分子生物学研究进展

蓝舌病是一种虫媒病毒性传染病,能引起反刍动物的高热,白细胞减少,口。舌、唇和胃肠道粘膜水肿、发组、充血、淤血坏死等炎性反应,孕畜可引起流产。该病最早发现于南非,目前在非洲、美洲、欧洲、亚洲及大洋洲的一些国家均有发生。我国有些省市和地区也有发生,造成严重经济损失蓝舌病病毒是呼肠孤病毒科环状病毒属的典型病毒,为分节段的双链ＲＮＡ病毒,目前至少有２４个血清型。由于基因序列重排和点突变现象的存在,还可能出现新的血清型。病毒颗粒呈圆形,２０面体对称,直径５０ｎｍ—６０ｎｍ,具有双层衣壳,外衣壳由ＶＰ２和Ｖ…     

蓝舌病16型病毒核心样颗粒的获取与鉴定

为了制备一种新型基因工程疫苗BTV-16 VLP疫苗,将蓝舌病病毒16型VP3与VP7基因片段插入杆状病毒双表达载体pFastBac Dual质粒中,通过转染Sf9细胞,同时表达VP3与VP7蛋白。经负染后电镜观察到有与蓝舌病病毒形态相似的核心样颗粒,表明蓝舌病VP3与VP7蛋白能自主组装形成核心样颗粒,并通过Western Blot试验验证该核心样颗粒与蓝舌病病毒具有相同的抗原性。因此本研究成功构建出16型蓝舌病病毒核心样颗粒,为病毒样颗粒装配打下了基础,为制备16血清型BTV VLP疫苗做好前期准备。     

蓝舌病病原分子生物学及免疫学研究进展

蓝舌病病毒通过吸血昆虫(库蠓)在易感反刍动物之间叮咬进行传播。在家畜中,蓝舌病易发于某些品种的羊,具有典型症状,呈地方性流行;牛感染蓝舌病通常不表现出临床症状。作者分析和总结了近年蓝舌病疫情发生和传播可能的潜在路线,病毒分子生物学研究概况,致病机理及宿主对蓝舌病病毒的免疫反应,并对蓝舌病疫苗的研究进展作了介绍,建议要加强对该病的深入研究,防患于未然。     

新疆蓝舌病病毒的分离及初步鉴定

针对新疆蓝舌病流行现状,本试验以蓝舌病血清学检测为阴性的动物建立监控群,于2014年5月至9月每周采集1次血样,血清学检测出现转阳动物后,取其转阳前后2周血样,接种10日龄鸡胚,收获死亡鸡胚肝脏,研磨浸毒后接种C6/36细胞和BHK-21细胞,出现细胞病变(cytopathic effect,CPE)样本进行PCR鉴定和电镜观察,并用细胞微量中和试验进行血清定型。经RT-PCR扩增蓝舌病血清型群特异VP7片段和NS1片段,鉴定在1 156,272,101bp处有特异性条带。电镜观察到疑似的病毒颗粒,中和试验结果显示该毒株为BTV-1型。上述结果显示,本研究分离到蓝舌病病毒1株,中和试验定型为BTV-1型。     

用牛内皮细胞和鸡胚检测蓝舌病病毒

用接种牛内皮细胞和鸡胚两种方法比较了检测实验接种绵羊血样中蓝舌病病毒（BTV）的效果，对所有被试的BTV血清型，鸡胚能持续检出毒血症的时间比牛内皮细胞的长，并能检出病毒滴度较低样品中的BTV。     

应用PCR技术合成生物素化蓝舌病病毒核酸探针的研究

用禽类成髓细胞病毒（AMV）反转录酶将蓝舌病病毒RNA反转录成cDNA,以dATP、dGTP、dCTP、dTTP和bio-11-dUTP作为TaqDNA聚合酶的底物,应用PCR技术合成了生物素化蓝舌病病毒核酸探针,经斑点杂交试验证明,合成的探针为蓝舌病病毒特异性核酸探针。