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《畜牧与兽医》2015,(4):132-134
猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒病(PCVD)的病原,在我国已广泛流行,哺乳期和育成期的猪最易感,病死率可达10%;PCV2具有空气传播、垂直传播、持续感染、亚临床感染、免疫抑制和继发感染等诸多特点,已经给我国的养猪业造成了巨大的经济损失。了解PCVD在我国的发病和流行情况、科研单位对该疫苗的研究情况、动物疫苗生产企业的生产情况以及养殖户的使用情况对该病的防控起到重要作用。各研究机构、动物疫苗生产企业应利用自身优势大力开展猪PCV2地方流行株分离培养,研究开发免疫效果好、安全性高的PCV2疫苗对我国的养猪业的健康发展提供保障。 相似文献
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猪圆环病毒诊断方法研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
猪圆环病毒分为PCV1和PCV2两型,其中PCV2与多种猪病有关,诊断技术显得非常重要。文章综述了PCV2的病理学、血清学、分子生物学等方面的诊断方法。目前已经建立了用原核表达和真核表达的PCV2产物建立的ELISA以及用PCV2单抗建立的ELISA方法;分子生物学方法有竞争PCR、多重PCR、多重巢式PCR、基于TaqManT探针的荧光定量PCR以及先进行PCR再做RFLP区分PCV1和PCV2等方法;核酸原位杂交方法有原位双杂交等,杂交时间可以缩短为2 h。同时检测PCV2和其它病原(如PRRS)的方法已经建立。常规病理学方法利于直观判断,对于病理变化不明显的病例需要用免疫组织化学确诊。血清学方法可以同时处理许多样品,利于大规模普查。PCR方法敏感,在病猪脏器内检测出的阳性率比较高,可以对个体精确诊断,但操作技能水平要求较高。原位杂交方法可以长久保存样品做回顾性的诊断。 相似文献
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猪圆环病毒2型和3型双重PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
《中国兽医学报》2019,(1):25-30
猪圆环病毒3型(PCV3)是一种新的猪圆环病毒,与猪皮炎和肾病综合征、母猪繁殖障碍及心脏和多系统炎症相关。为了建立一种同时快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)和PCV3的双重PCR方法,根据GenBank收录的PCV2和PCV3基因序列,分别在PCV2 Cap基因和PCV3 Rep基因高度同源保守区设计并筛选2对特异性引物,经过双重PCR反应条件的优化,建立了同时检测PCV2/3的双重PCR检测方法。本方法可同时扩增出PCV2、PCV3的486,270bp特异性片段,而扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)等病原核酸结果均为阴性;PCV2/3最低检出量分别为139,21.7拷贝/μL。经临床应用表明,本试验建立的双重PCR方法简便、快速,敏感度高,特异性强,为PCV2/3的鉴别诊断和联合检测提供了依据。 相似文献
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猪圆环病毒的致病机理及其影响因素 总被引:4,自引:0,他引:4
猪圆环病毒2型(PCV2)感染可损伤猪的免疫系统,引起感染猪的胸腺萎缩、T细胞和B细胞数量减少;细胞因子的表达量改变,如IL-10的量上升,IL-8的量明显下降,IFN-γ量减少。同时,PCV2感染的靶细胞在胎儿期是心肌细胞、肝细胞和巨噬细胞,而出生后只有巨噬细胞。因而推测猪感染PCV后,机体的免疫力下降,感染猪处于亚健康状态,其它病原因子如猪繁殖与呼吸综合征病毒、细小病毒、衣原体、猪流感、肺炎支原体和胸膜肺炎放线杆菌等,或应激因素如营养元素缺乏、免疫刺激和较差的饲养管理等多种因素都可加重PCV2感染猪的病情,进而发展成临床症状和病理变化较明显的断奶后仔猪多系统综合征、猪肾病综合征等与猪圆环病毒相关痰病。 相似文献
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安徽省部分猪场猪圆环病毒2型感染情况调查 总被引:5,自引:0,他引:5
本研究应用PCR技术对采集自安徽省3个猪场(FH、CX、SC)30头发病仔猪的脾、肺、肾、淋巴结共计120份样品,进行猪圆环病毒2型(PCV2)感染情况调查。结果显示,FH猪场PCV2感染率最高达70%,SC和CX两个猪场均为20%;脾、淋巴结PCV2的检出率与肺、肾之间差异显著。表明安徽省猪场的猪群中普遍存在PCV2的感染,且有的猪场PCV2感染的现象相当严重;进一步研究表明PCV2主要感染部位为脾和淋巴结。 相似文献
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为建立可同时鉴别检测非洲猪瘟病毒(ASFV)以及猪圆环病毒2型(PCV2)、3型(PCV3)的三重PCR方法,根据GenBank中登录的ASFV、PCV2、PCV3相关基因保守序列,分别设计合成特异性引物,通过对引物浓度、退火温度、循环数等反应条件进行优化,建立了针对3种病原的三重PCR检测方法,并开展了敏感性、特异性及重复性试验。结果显示:引物最佳终浓度为0.375 pmol/μL,最佳退火温度为61℃,最佳循环数为35;该方法对ASFV、PCV2、PCV3的扩增目的条带分别为873、530和217 bp,对猪细小病毒和伪狂犬病病毒的扩增结果均为阴性;对ASFV、PCV2、PCV3重组质粒标准品的检出下限均为1×104 copies/μL;相同条件下重复性试验获得均匀一致的结果。结果表明,本研究建立的三重PCR检测方法具有特异性强,敏感性及重复性好等优点,可用于ASFV、PCV2和PCV3感染的快速鉴别诊断及流行病学调查。 相似文献
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联合表达PCV2 ORF2和PPV VP2基因病毒样颗粒获得及免疫原性 总被引:1,自引:0,他引:1
将包含有完整阅读框架,长1 740、705 bp的PPV VP2基因、PCV2 ORF2基因分别插入真核表达栽体pPI-2.EGFP,构建了重组质粒pPI-2.EGFP.VP2.ORF2.观察由脂质体介导转染重组质粒后的Vero细胞,结果最早在转染后20 h左右出现荧光,36 h达到高峰;对转染细胞进行电镜检测,结果观察到病毒样颗粒存在.为证实所获病毒样颗粒是否为重组颗粒,将纯化后的病毒样颗粒免疫仔猪,检测其血中T淋巴细胞的动态变化以及血清抗体水平.结果免疫仔猪的CD3+、CD4+T淋巴细胞在外周血淋巴细胞中的比率均有一定程度的升高;CD8+T淋巴细胞在免疫后7~14 d有所下降,之后再升高.抗体检测结果表明,免疫动物血清中有较高水平的PPV、PCV2特异性抗体.结果表明重组质粒pPI-2.EGFP.VP2.ORF2获得成功表达并形成重组病毒样颗粒,且该颗粒具有良好的免疫原性. 相似文献
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从四川省21个规模化猪场采集样品273份,利用PCR方法检测并分析了猪细小病毒和猪圆环病毒的感染及混合感染情况,结果共检出PPV病原阳性样品47份(占17.22%);PPV阳性猪场8个(占38.1%);种猪的感染率较高,仔猪感染率相对较低;检出PCV2病原阳性样品143份(占52.38%),PCV2阳性猪场18个(占85.7%);PCV2感染随猪年龄的增长而升高;检出PPV和PCV2混合感染样品29份(占10.62%);同时存在PPV和PCV2的猪场6个(占28.7%),混合感染主要集中在母猪和保育仔猪阶段。仅有3个猪场未检出PPV和PCV2病原,占14.3%。该结果说明PPV与PCV2及其混合感染在四川省流行广泛,对养殖业构成了较严重的危害。 相似文献
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为建立一种可同时鉴别致病性猪圆环病毒(PCV)不同基因型的检测方法,本试验针对PCV2、PCV3和PCV4的ORF2基因保守区域设计引物和探针,将人工合成目的基因与质粒连接,构建阳性质粒PCV2-ORF2、PCV3-ORF2和PCV4-ORF2。通过优化引物浓度、探针浓度、退火温度等参数,建立PCV2、PCV3和PCV4 TaqMan-MGB多重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性。应用建立的方法对38份临床样品进行应用检测,对24个养猪场(户)进行流行病学调查。结果显示,建立的方法能特异性区分PCV2、PCV3和PCV4,且与其他常见猪病病原不发生交叉反应;对PCV2、PCV3和PCV4的最低检出浓度分别为1.56×10、1.28×10和1.76×10拷贝/μL;批内和批间变异系数均小于2%,重复性好;38份临床样品中PCV2、PCV3和PCV4阳性样品分别为17、3和1份,从24个养猪场(户)采集的689份样品中PCV2、PCV3和PCV4阳性率分别为33.33%、12.50%和8.33%。结果表明,本试验建立的PCV2、PCV3和PCV4 TaqMan-M... 相似文献