水稻体细胞培养与无性系变异——Ⅰ,不同基因型不同外植体的培养

对水稻5个品种的种胚和11个品种的幼穗在含不同激素浓度的MS培养基上培养,诱导愈伤组织并再生绿苗。品种间在愈伤组织诱导率、绿苗分化率和对激素的诱导效应表现了基因型差异。幼穗愈伤组织诱导率和绿苗分化率高于种胚。种胚的盾片愈伤组织分化能力高于胚轴,胚芽鞘的未分化得绿苗。去分化培养基添加2,4—D2mg/1+KT0.5mg/1,诱导愈伤组织的效果甚佳,并促进绿苗分化。选择胚性愈伤组织继代培养,种胚的培养270天,幼穗的培养210天,仍有部分品种保持较高的绿苗分化率。     

甘蔗离体培养的变异机理及筛选技术——Ⅱ.甘蔗组培苗分化过程中一些生物大分子的变化

比较5个供体的心叶和幼茎愈伤组织在 MS 和 N_6培养基中诱导分化绿苗过程 RNA,DNA 和可溶性蛋白质的动态变化.结果发现,在绿苗诱导分化的第6—9 d,核酸总量和 RNA含量均达到最高值,第9 d 后两者逐渐下降.DNA 含量从诱导分化开始即呈下降趋势,第9d 时DNA 含量最少,然后义逐渐增加.蛋白质含量在诱导分化的前3 d 增加显著,第3 d 后呈下降趋势,第9 d 后渐趋减缓.不同的培养基对生物大分子的含量变化有一定影响.本试验揭示了在甘蔗愈伤组织诱导分化绿苗过程中,生物大分子变化的不同阶段与细胞分化和器官形成的关系.     

粳稻花药培养几种培养基试验报告

我们在1990～1991年作了两年的诱导培养基和分化培养基的对比试验。结果表明,N_6基本培养基附加NAA的N_6-1诱导培养基和附加NAA和2,4-D的N_6-2诱导培养基的愈伤组织诱导率分别为30.3％和25.3％,它比附加2,4-D的常用的N_6。诱导培养基(愈伤组织诱导率为20.5％)高出47.8％和23.4％。NAA和2,4-D混用的N_6-2去分化培养基所诱导出的愈伤组织的器官分化率为最高,其绿苗分化率为57.4％,它比常用的N_5培养基(绿苗分化率为44.8％)高出28.0％。器官分化率最低的是单用NAA的N_6-1培养基,其绿苗分化率为36.4％,比N_6培养基低18.7％。附加NAA的N_6-1和N_6-2培养基的出愈速度和器官分化速度明显快于附加2,4-D的N_5培养基。N_6-1培养基和N_6-2培养基花药接种后18天就能看到愈伤组织,出愈速度要比N_5培养基提早3～5天。在N_6培养基上的形成的愈伤组织转移后10天只有部分绿苗出现,但N_4-1和N_6-2培养基上形成的愈伤组织转移后10天,可分化出1/3的绿苗,甚至转移后3天可以看到不少绿点分化。分化培养基来看,MS培养基的植物体分化效率明显高于N_6培养基,其绿苗率提高到2.5倍。     

氮素对小麦幼胚培养的影响

以小麦幼胚为外植体,研究了培养基中无机氮含量及不同铵态氮和硝态氮比例对幼胚愈伤组织诱导、胚性愈伤组织形成和绿苗分化的影响。结果表明,改变铵态氮和硝态氮的比例均显著提高了胚性愈伤组织的诱导率,增加铵态氮含量有利于绿苗分化。     

不同小麦基因型及其不同外植体离体培养研究初探

以13个不同基因型、3种不同外植体为材料，选用5种不同培养基，研究了各因素对愈伤组织诱导、分化的影响，并在此基础上建立了一套可靠的小麦组培再生系统。结果表明，愈伤组织的诱导、根的分化和绿苗的再生虽然都具有显著的基因型效应，但不具备显著的相关关系；对于绿苗的再生分化，幼胚优于成熟胚，幼穗和幼胚之间不存在显著的差异；X和A培养基各自在愈僵组织的诱导和再生分化上都明显优于MSS AA／2和R培养基。成熟胚愈伤组织诱导率生根率和绿苗率平均分别可达88.9%、56.3%和8.7%；幼胚愈伤组织诱导率、生根率和绿苗率平均分别可达99.1%、53.2%和17.6%；幼穗愈伤组织诱导率、生根率和绿苗率平均达94.6%、84.8%和18.3%。     

基因型及培养基种类对不结球白菜一代杂种花药培养的影响

对10个基因型的不结球白菜杂种F1花药进行了离体培养,并分析了不结球白菜基因型、培养基种类对花药愈伤组织诱导和分化的影响.结果表明:供试的10份材料均能在3种诱导培养基中发生愈伤组织.但愈伤组织的分化较为困难;有4份材料能在分化培养基上分化出绿苗,但发生率低,平均绿苗分化率最高的仅为1.515%,另6份材料未发现绿苗产生.     

人参粉对小麦和小黑麦花药培养的影响

小麦花药培养中愈伤组织诱导率和绿苗分化率低一直是悬而未决的问题.本试验表明,在NT_5-1培养基中附加1.5g/1人参粉后,能显著提高普通小麦和八倍体小黑麦花粉愈伤组织诱导率.其中普通小麦花粉愈伤组织诱导率可达2.98%(对照为1.49%),出愈时间(22天)较对照早3天,唯绿苗分化率(19.21%)低于对照(28.5%);八倍体小黑麦花粉愈伤组织诱导率达15.86%(对照为8.33%),出愈时间(25天)比对照提早4天,绿苗分化率(4.26%)亦高于对照(3.33%).     

内源激素对水稻不同外植体培养力的影响

利用HPLC法对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有差异的几个水稻品种的不同外植体(花药、幼穗、幼胚和成熟胚)及其愈伤组织的内源激素含量进行测定分析。结果表明,内源激素的含量和配比是影响愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素之一。不同外植体中的内源激素对愈伤组织诱导率的表现为:Z ZR呈负效应,IAA呈正效应,GA除成熟胚外呈负效应。愈伤组织中内源激素对绿苗分化率的影响表现为:IAA和GA呈负效应,ABA、Z ZR呈正效应。内源激素的配比对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有一定作用,表现为:IAA/Z ZR对愈伤组织诱导率有一定的正效应,Z ZR/IAA、ABA/IAA对绿苗分化率呈显著正相关。     

小麦幼胚离体培养的研究初报

[目的]筛选适宜小麦幼胚培养的培养基和转基因受体材料的优良基因型,为小麦转化、遗传等提供依据.[方法]以7个春小麦品种(系)的幼胚为材料,取开花后12～16 d的幼胚进行培养,20 d后统计幼胚一步成苗数和愈伤组织绿苗分化数.[结果]小麦幼胚在C17、MS和YP三种培养基上都能诱导一次成苗,其中YP培养基一次成苗率最高(75;),其次是MS(33.13;),最低的是C17(23.34;),YP培养基一次成苗的效果明显优于其它两种培养基,不同基因型间的愈伤组织绿苗分化率差异明显.[结论]筛选出适宜小麦幼胚培养一次成苗的YP培养基和一次成苗和愈伤组织分化绿苗率都较高的材料新春9号,此材料可作为幼胚培养和转基因受体材料的优良基因型.     

影响水稻花药培养效率的几个因素

本试验通过对不同的基本培养基、激素配比及基因型材料进行试验。结果表明,不同的基本培养基对花药培养效率有明显差异。M8培养基的愈伤组织诱导率略高于N6培养基,绿苗分化率则明显高于N6培养基。不同的激素配比,其效率各异,M8培养基中添加了2,4－Dmg/L,KT4mg/L和NAA3mg/L的培养基,较适合于水稻花药培养。不同遗传差异的材料是影响愈伤组织诱导、分化的重要因素。不同组合的愈伤组织诱导率的绿苗分化率差异较大。其中零轮／温266、48－2／T984和48－2／零轮等组合的愈伤组织诱导率、绿苗分化率较高,10-35/pecos最低。     

甘蔗离体培养的变异机理及筛选技术 Ⅲ.游离氨基酸对生物大分子及绿苗分化综合效应的多元分析

对甘蔗组培绿苗分化过程中的游离氨基酸组分和含量进行的主分量分析表明,不同培养基或不同品种供体下的第一主分量均为中性氨基酸,贡献率达40％—66％,并且中性氨基酸处于转化状态比处于积累状态对绿苗分化更为有利。而第一、二主分量共同表明丙氨酸—丝氨酸族、天冬氨酸族和谷氨酸族的效应较为重要,但在不同培养基中所起的效应有所差异。通径分析表明各类氨基酸对于不同培养基和不同供体对绿苗分化所起的直接和间接作用不尽相同。而同一品种在同一培养基分化过程中对绿苗分化率、核酸及蛋白质含量起主要直接作用的氨基酸种类和排列顺序是很相似的,相似程度越大,绿苗分化率越高。本试验在MS培养基分化过程起主要直接作用的是甘氨酸和蛋氮酸,而在N_6培养基中的是赖氨酸,苏氨酸和亮氨酸。     

太子参不同组培脱毒苗产量与氨基酸含量的比较

对太子参的3种组培脱毒种苗(即茎尖苗、愈伤组织苗、种子苗)的大田生长速度、参根产量性状和游离氨基酸的含量进行了比较.结果表明,茎尖苗和愈伤组织苗的生长速度和参根产量均显著优于对照苗;种子苗的生长速度与对照苗无显著差异,参根产量低于对照苗.3种组培脱毒苗的参根氨基酸总量都明显分别高于对照苗,而必需氨基酸含量与对照苗均无显著差异.     

利用生物技术快繁甘蔗良种的研究

本试验探讨了用甘蔗腋芽静态培养技术，快繁甘蔗良种，并在生产上大面积推广应用等问题。结果表明：１，腋芽液态静止培养技术，不经过脱分化过程，避免了２，４—Ｄ作用引起的变异；２．ＭＥＴ在１．５—３．０％的水平下对根的诱导有较好的促进作用；３．采用泡沫塑料种植盆种植，使二级苗成活率以及大田移栽成活率均可达到９５％以上；４．甘蔗腋芽液培快繁技术为甘蔗良种繁育开创了一条新途径，展现了较好的经济效益和社会效益。     

稀土元素处理对甘蔗体内氮素同化作用的影响研究

本文报道应用稀土元素处理甘蔗（Soccharum officinarum L.)叶片，分析测定了硝态氮、氨态氮、总氮、游氨基酸组分及游离氨基酸含量、硝酸还原酶（NR）活性等变化以及NR活性与硝态氮含量的关系。研究稀土元素处理对甘蔗体内氮素同化作用的影响。结果表明，应用100－600ppm稀土元素处理甘蔗叶片均能不同程度地减少其硝态氮含量，提高其氨态氮、总氮、游离氨基酸总含量以及NR活性，但游离氨基酸组分没发生变化，各处理浓度中以300ppm处理的效果为最显著，高浓度稀土元素处理则呈抑制效应。甘蔗叶片硝态氮含量与叶片NR活性具有平行关系，即凡硝态氮含量高，NR活性也高，凡硝态氮含量低，NR活性也低，以上结果，说明一定浓度范围的稀土元素处理能促进甘蔗的氮素同化作用。     

橡胶苗不同器官渗透调节物质组成及其对渗透势的贡献

为研究橡胶苗不同器官渗透调节物质对渗透势的贡献及其与物质运输的关系,进而为进一步研究橡胶树不同器官渗透调节过程与光合作用、木质部—韧皮部水分平衡、胶乳产量等之间的关系提供依据,以橡胶树'热研7-33-97'袋育组培苗为材料,测定了其根、叶渗透势和可溶性糖、游离氨基酸、有机酸、Ca2+、Mg2+、K+、Na+、NO3?、...     

邻羟基苯甲酸胁迫下杉木叶片游离氨基酸的变化特征

在杉木自毒物质邻羟基苯甲酸胁迫下,对杉木组培苗叶片游离氨基酸质量分数变化及化感效应进行研究。结果表明:随着胁迫时间的延长、胁迫强度的增大,杉木叶片总游离氨基酸的含量逐渐提高,促进效应显著,胁迫质量浓度与氨基酸总量间呈线性关系;在不同胁迫时间及不同胁迫质量浓度下,天冬氨酸含量最高,其次为谷氨酸,化感效应趋势随胁迫时间的延长和胁迫质量浓度增大,表现为促进作用增强;脯氨酸积累量随胁迫时间的延长和胁迫质量浓度增大而逐渐增加,化感效应由抑制转为促进效应;其他氨基酸对胁迫的反应呈现波动性。     

α-NAA对烤烟游离氨基酸含量及烟碱含量的影响

本文研究了烤烟打顶后喷50μmol.L-1α-NAA对根系游离氨基酸含量以及烟碱在根和叶片含量的变化情况。结果表明:(1)喷施50μmol.L-1α-NAA可以降低上部叶、中部叶和根系的烟碱含量;(2)喷α-NAA处理,其Asp、Lys、G lu、Arg、Pro等5种氨基酸含量以及总氨基酸含量均低于未喷α-NAA的处理,并与中部叶、上部叶的烟碱含量间显著正相关。因此,喷施α-NAA降低上部叶、中部叶的烟碱含量,其可能的机制之一是通过调控Asp、Lys、G lu、Arg、Pro等5种氨基酸含量以及总氨基酸含量而实现。     

不同基质处理甘蔗桂糖44号试管苗瓶外生根的成活率

为筛选甘蔗无根试管苗最适种植基质,提高其成活率,降低生产成本,以甘蔗新品种桂糖44号为试材,采用单因素试验研究不同基质对其无根试管苗瓶外生根成活率的影响。结果表明:桂糖44号无根试管苗在不同基质上成活率依次为70%田园土+30%河沙(T_4)田园土(T_3)河沙(T_5)70%黄泥+30%河沙(T_2)黄泥土(T_1)高肥力有机质(T_6);生长速依次为T_6T_4T_3T_2T_1T_5;发根快慢依次为T_5T_4T_2T_3T_1T_6,但发根时间差异不大;不同基质中以高肥力有机质最容易发霉,其次是田园土,黄泥和河沙不易发霉。甘蔗无根试管苗最适种植基质为70%黄泥+30%河沙。     

金线莲组织培养及营养成分的分析研究

以野生金线莲为外植体,在基本培养基中分别添加不同种类、不同浓度激素组合,进行芽丛诱导、继代培养、芽分化和根诱导试验。结果表明,M S基本培养基中附加6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L和ZT 0.02m g/L,芽丛的诱导率最高为95.92%;在营养体分化期间,低浓度的激素组合有利于促进芽径增粗和茎、叶的分化。在对不同来源金线莲全草进行粗蛋白、粗脂肪、总糖、维生素C等营养成分含量的分析中发现组培瓶苗植株的含水量、维生素C、粗蛋白、粗脂肪含量最高,而灰分和总糖分含量则以野生植株的最高,说明不同生长条件对金线莲营养成分含量有明显的影响。     

大豆外植体培养再生植株的研究

本文报道大豆小真叶和上胚轴外植体培养成苗的途径,并讨论了外源激素对苗分化的效应。大豆小真叶外植体在合有NAA或KT+NAA的B_5培养基上,上胚轴外植体在含有KT+NAA的B_5培养基上,可脱分化形成愈伤组织,并由愈伤组织直接分化成苗。小真叶外植体在含有KT+NAA的B_5培养基上比在只含有NAA的B_5培养基上成苗率高。在KT+NAA的B_5培养基上,上胚轴较小真叶外植体成苗率高。 NAA对促进小真叶外植体分化根较诱导愈伤组织和芽的分化更有利。KT对诱导愈伤组织和芽的分化有利。KT与NAA配合使用对大豆外植体培养再生植株较单独使用效果好。在配合比例中,NAA浓度较低的比NAA浓度较高的芽分化早,成苗率高,后者分化的根较多。