寒富苹果花药培养植株的获得及鉴定

通过花药培养获得纯合的寒富苹果花药培养植株,对于解析寒富苹果抗寒性强、大果、自交亲和等重要性状及加速具有自主知识产权苹果新品种的培育具有重要意义。研究首先从田间取寒富带花蕾枝条于4℃保存5~7天,花蕾经消毒后将花药接种到胚状体诱导培养基:MS+5.0 mg/L GA3+30 g/L蔗糖+3.25 g/L Gelrite,p H值5.8;将诱导出来的胚状体转移至分化培养基:MS+0.2 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+3.25 g/L Gelrite,p H值5.8;待分化出小苗后将小苗转移至继代培养基:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IAA+0.1 mg/L GA3+30 g/L蔗糖+3.25 g/L Gelrite,p H值5.8;小苗炼苗后直接在室内嫁接。利用流式细胞仪分析田间花药培养植株倍性,利用SSR技术鉴定其纯合性,并对田间嫁接的花药培养植株表型初步观察。结果表明,试验成功获得了寒富苹果的花药培养植株,倍性分析和SSR鉴定结果显示,所获得的花药培养植株为纯合三倍体植株,其表型与寒富存在明显差异,表现为叶片明显变小、变薄,叶被茸毛大幅度减少,但未表现出明显的矮化现象。     

枣花药培养再生植株及其染色体倍性研究

用ＭＳ培养基附加不同浓度的２，４－Ｄ、ＮＡＡ、ＩＢＡ和６－ＢＡ，对金丝小枣花药进行离体培养，通过诱导愈伤组织，再生小植株，并进行了染色体倍性观察。结果表明，花药的采接时间，低温处理及某些激素的浓度对愈伤组织的诱导有直接影响，６－ＢＡ是愈伤组织分化小植株的重要因素，同一块愈伤组织绿芽生长点的染色体倍性表现出较大差异。     

利用苹果花粉粒形态进行倍性鉴定

以苹果１０个二倍体和５个三倍体品种为试材,对不同倍性品种产生的花粉粒形状和大小进行了比较。结果表明：（１）倍性间不同形状花粉粒分布明显不同,二倍体品种三角形花粉粒数目多,而三倍体品种三角形花粉粒数目少;三倍体品种圆形及方形花粉粒数目均大幅增多;计算三角形花粉粒数目与圆形花粉粒及方形花粉粒数目之和的比值发现,倍性品种间差异较大,该比值１．２可作为鉴定倍性的临界值。（２）三倍体同一形状花粉粒大小比较分散,二倍体则相对集中,三角形花粉粒中等大小花粉粒数目与大花粉粒及小花粉粒数目之和的比值在倍性间存在明显差异,该比值２．５０可作为判别二倍体与三倍体的临界值。利用这两个指标对诱变植株产生的花粉粒形状和大小进行了比较,对孢原组织细胞的倍性水平进行了估计。     

不同倍性苹果叶片不定植株再生研究

以苹果二倍体、三倍体、四倍体共２８个品种的无菌苗叶片为试材,研究了倍性、光和暗培养及叶片的生长部位对叶片不定梢再生的影响。结果表明：多倍体比二倍体容易再生不定梢,平均不定梢再生率,三倍体达９８．４％,二倍体６８．４％,一个四倍体品种达９３．３％。暗培养比光培养有利于促进不定梢再生,无菌苗顶部刚展开的嫩叶比中下部成熟老化叶再生率高。     

苹果属皱叶型植株实生后代倍性鉴定研究

利用染色体计数方法和流式细胞仪对皱叶型植株的13株实生后代进行了倍性鉴定.结果表明:实生后代苗中出现皱叶和光叶2种类型,2种鉴定方法获得的结果一致.实生后代中出现二倍体、三倍体和四倍体.其中8株光叶型全部为三倍体,5株皱叶类型中1株二倍体,3株三倍体和1株四倍体.这为丰富苹果无融合生殖砧木的育种理论,获得新的无融合生殖砧木提供有益的借鉴.     

苹果三倍体后代培养及倍性鉴定

以自然授粉的三倍体苹果品种乔纳金的种子为材料,研究了培养方式对苹果三倍体实生后代获得的影响及实生后代的倍性水平。结果表明,离体培养与常规播种在乔纳金种子成苗率上存在明显差异,其中离体培养的成苗率是48.1%,常规播种的成苗率是20.9%,离体培养获得的植株是常规播种获得的植株的2倍以上。本研究获得的690个乔纳金实生后代中以非整倍体植株占多数,共获得非整倍体452株,占植株总数的65.5%。在后代中有13个为多倍体,其中离体培养获得7株三倍体和4株四倍体,而常规播种只获得2株三倍体,表明离体培养可以获得较多的多倍体资源。乔纳金实生后代中不同倍性植株在形态上差异显著,根据植株形态和叶形指数,可以容易地将多倍体(三倍体、四倍体)植株与二倍体植株和非整倍体植株区分开来。     

植物单倍体植株的倍性鉴定

单倍体植株在倍性育种中具有极大的优点和巨大的应用潜力，快速、准确地筛选出单倍体植株对加速育种进程具有重要的意义。植株倍性的鉴定方法主要有直接鉴定法和间接鉴定法。现综述了直接鉴定法即染色体计数法和流式细胞分析法（flow cytometric measurement）、叶片气孔大小及保卫细胞叶绿体数目鉴定法、染色中心直径和异染色质数目以及植株形态观察等间接鉴定法的应用进展，并对各自的优缺点作了简要的评述。     

辣椒花药培养再生植株染色体倍数检测研究

采用流式细胞仪(FCM)对7个甜椒F1和3个辣椒F1的花药培养的再生株,在幼苗期进行了倍性鉴定.流式细胞仪的矩形图中清楚显示出每份材料叶片的DNA含量,即检测出单倍体、二倍体、三倍体或单倍体加二倍体的混倍体.研究表明:辣椒花药培养再生株中,单倍体和二倍体比率约为70.91%、25.45%.流式细胞仪可以快速且准确的检测出试材的染色体倍性,与座果结子的鉴别结果相一致.本文还讨论了采用流式细胞仪的优势以及存在的问题.     

大白菜小孢子植株的倍性变异及倍性鉴定方法的研究

对大白菜小孢子植株群体的倍性变异进行观察,并以染色体计数法的鉴定结果为依据,研究利用DNA流式细胞仪测定法、气孔保卫细胞特征、形态学特征鉴定大白菜小孢子植株倍性的可靠性。结果表明,小孢子植株是倍性水平不同的混合群体,但不同基因型各倍性植株所占比例不同;DNA流式细胞仪鉴定法的准确率达94.44%,可用于植株群体的倍性鉴定;植株形态鉴定法可用于成株倍性鉴定;气孔特征鉴定法的应用有待进一步探讨。     

60个苹果新品种S基因型鉴定

绝大多数苹果品种具有自交不亲和的特性，生产中需要搭配授粉树完成异花授粉。在苹果中已经分离鉴定了50多个S-RNase基因，对于一些新选育品种的S基因型至今未得到鉴定。利用S-RNase基因特异性PCR分析的方法鉴定了60份苹果新种质资源的S基因型，在60份苹果种质资源中，有56份品种的S基因型是首次鉴定到，并首次鉴定到了一个红肉苹果品种‘红色之爱’的S基因型，其S基因型是S19S？。新品种S基因型的鉴定能够为苹果育种亲本的选择及授粉树的合理搭配提供依据。     

萝卜花药培养再生植株染色体倍数FCM分析及田间观察

采用流式细胞仪(FCM)对萝卜的20株花药培养再生植株进行倍性鉴定。结果显示:流式细胞仪清楚地显示了每份材料的DNA含量,其中单倍体、二倍体、四倍体、嵌合体的比例分别为20%、30%、25%、25%,并对照再生植株田间生长情况,从形态学角度验证了FCM分析的准确性。     

苹果‘富士85-1’新品系的选育研究

1985年选用苹果富士品种的花药培养成植株,1986年移栽成活,1993年开花结果。1996～1999年连续4年对其果实主要经济性状进行调查,果实硬度平均达9.2kg/cm2,比对照(长富2)平均8.5kg/cm2,提高8.2%;果实可溶性固形物平均16.9%,比对照平均13.9%,提高21.6%。1996年开始育苗,1998年建立对比试验点,2002年结果,花朵坐果率54.9%比对照49.7%,提高10.5%。4年生树折合产量1204.5kg/hm2,比对照产量346.5kg/hm2,提高247.6%。     

‘富士’花药培养选育出苹果新品种‘华富’

 ‘华富’品种是采用单倍体育种技术, 由‘富士’苹果花药培养选育出的高品质新品种。果实近圆形, 平均单果质量236.5 g; 果形指数0.86; 果皮底色淡黄, 盖色红色, 有条纹; 果肉黄色、硬脆中细, 果肉硬度9.2～9.96 kg/ cm² , 可溶性固形物平均16.9%; 可溶性糖平均13%; 风味酸甜适度, 有淡香, 品质上等或极上等; 果实成熟期10月20日左右。     

不同倍性百合杂交后代的核型及分子标记鉴定

以百合两个杂交组合,'Brunello'×'Yellow Jiant'和'Prato'×Lilium.pumilum的亲本和杂交后代为试材,从染色体和DNA两个方面对杂交后代进行鉴定,比较杂交后代与亲本间的遗传差异和相似性。观察显示,两个杂交后代均为三倍体,由不同倍性的亲本杂交而来,且染色体随体丰富。用4对多态性高的SRAP引物对试材进行扩增。结果表明：杂交后代除了含有父母本的特征带,还具有父母本没有的谱带,且它们与母本间的遗传距离均小于其与父本间的遗传距离。核型分析和分子标记的结果一致,均证实了两个杂交后代的真实性,且两个杂交后代在遗传上均偏向母本。     

Cre/loxp系统的构建及无选择标记转基因苹果植株的获得

从‘霞晖8号’桃中克隆了一个定位于第4条染色体上的钾转运体基因PpeKUP5,该基因编码625个氨基酸,具有10个跨膜结构域;PpeKUP5主要在根部表达,其次是叶和茎中,花和果实中的表达量极低;ABA、重金属Cr和Zn处理均显著诱导其在桃幼苗各组织中的表达,其中Cr处理最为显著,高钾胁迫及重金属Cu处理显著降低了其在根部的表达水平;细菌互补试验表明PpeKUP5具有吸收外界K+（KCl或K2SO4）的功能,且在偏中性pH值条件下最为显著。本研究表明PpeKUP5是一个主导桃树根部K+吸收的钾转运体,并可能在桃树适应高钾及重金属Cr、Zn和Cu等胁迫处理和ABA 响应中起着重要作用。     

诱变苹果新品种--短枝向阳红

‘短枝向阳红’是采用＾６０Ｃｏ－γ射线４０００Ｒ照射苹果‘向阳红’绿枝接穗获得的矮化、丰产型变异新品种,不仅保持了向阳红品种果实个大、浓红艳丽、肉质细脆、酸甜适口、适应性好等特点,还显著提高了萌芽率,节间变短,树体紧凑,短枝易成花,结果早,丰产性好。