不同地域柞蚕核型多角体病毒特性的研究

探讨了我国不同地域ApNPV的特征性状。试验表明:(1)不同地域的ApNPV对河南柞蚕、蓖麻蚕的致病性有差异;(2)不同地域ApNPV-DNA经EcoRI酶解,电泳图谱相似;使用salI内切酶酶解时,在琼脂糖电泳图谱中的C、G、O、Q、U和P等片段,不同毒株之间有差异;(3)河南云阳株(HY)病毒粒子多肽由16种蛋白亚基组成;病毒DNA为线形环状结构,周长4.76×10~5,计算DNA的分子量为:91.4×10~6道尔顿。     

用DNA指纹技术研究Zmu-1:DHP豚鼠的群体遗传结构

为了鉴定Zm u-1∶DHP新品系豚鼠的遗传组成,试验以Jeffreys 33.6和33.15探针,分别与Zm u-1∶DHP和DHP 2个品系豚鼠基因组DNA的H in fⅠ和H aeⅢ酶切限制性片段进行Sou thern杂交,绘制豚鼠DNA指纹图,分析豚鼠基因组DNA限制性片段长度的多态性。结果显示,33.6探针与H in fⅠ酶组合应用,多态性程度较高,制图效果好;Zm u-1∶DHP豚鼠的DNA指纹图中,在6 kb和9 kb标记点出现特征性基因序列片段;Zm u-1∶DHP品系内的相似系数Fm=0.834±0.066,显著高于DHP品系内的Fm=0.653±0.158,也高于2个品系的Fm=0.670±0.115;Zm u-1∶DHP豚鼠2随机个体间遗传组成完全相同的机率Fmn=1.07×10-2,高于DHP豚鼠的Fmn=8.474×10-5。表明该方法用于豚鼠遗传质量检测和品系鉴定是可行的。Zm u-1∶DHP和DHP豚鼠都属远交系动物,但前者的遗传基因纯合性显著高于后者,结合性状可以看出,Zm u-1∶DHP豚鼠遗传分化形成了新的品系。     

猪细小病毒病

猪细小病毒(Porcina Parvovirus,PPV)是引起猪繁殖障碍的病原之一。该病普遍发生于世界各地的猪群中,以流产、木乃伊和死胎为特征。而后备及空怀母猪财缺乏可见的外部症状。病原猪细小病毒属细小病毒科,细小病毒属。Cartwright和Huck(1967)首先从猪流产的死胎脏器中分离到该病毒。我国学者侯世宽等(1983)、潘雪珠等(1983)、邬捷等(1987)已分离出PPV。病原学研究表明,已鉴定的PPV都属于同一血清型。成熟的病毒粒子外观呈六角形或圆形,无囊膜,直径22±1μm,二十面体等轴对称,有2或3种衣壳蛋白,分子量为5.3×10~(?)道尔顿,G+C含量为48％。病毒的基因组为单股线状DNA,分子量1.4×10~6道尔顿。该病毒在氯化铯中的浮密度为1.37～     

产蛋下降综合征病毒DNA限制性酶切分析的研究

摘要：选用BamH Ⅰ、Kpn Ⅰ、Pst Ⅰ、EcoR Ⅰ、Xba Ⅰ、HindⅢ等6种限制性内切酶对EDS两病毒内蒙古地区分离株(N3、B4)和参考株(AV-127)病毒基因组DNA进行酶切分析，均产生4，5，9，4，2和10条DNA片段，而且N3、B4株与参考株病毒基因组DNA之间的酶切图形、片段大小也十分相似，从分子水平上证实N3、B4株是EDS两病毒，同时也说明限制性内切酶分析法是检测EDS76病毒的一种简便快速的方法。     

EDSV分离株(Hd1株)DNA的限制性酶切分析和克隆

用SDS-ProteinaseK消化EDSV抗原-抗体复合物,苯酚-氯仿抽提DNA,得到了完整的EDSV基因组DNA,用限制性内切酶BalⅠ、BalⅡ、BamHⅠ、ClaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、HpaⅠ、KpnⅠ、PstⅠ、PvuⅡ、SalⅠ、SmalⅠ、XbaⅠ酶切及EcoRⅠ BamHⅠ双酶切消化,对EDSV分离株Hd1的DNA进行了限制性内切酶酶切分析。结果表明,分离株Hd1与标准株AV127DNA各酶切片段数及各片段的相对分子量(kb)未见差异,说明分离株Hd1和标准株AV127属于同一基因型。将EcoRⅠ BamHⅠ双酶切得到的7个片段,与双酶切线性化的pUC19载体质粒连接,转化E.coliDH5α,克隆了其中的5个片段。     

鸽肝、肾、骨、小肠碱性磷酸酶同功酶谱及其生物学特征的研究

本文报导了从王杂鸽的肝、肾、骨和小肠等四个脏器中用正丁醇抽提,高速离心,Sephedex G—100凝胶层折及DEAE—纤维素离子交换等方法分离纯化了碱性磷酸酶(AKP),并用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳进行了分离鉴定,达到PAGE纯的各脏器AKP同功酶。其中肝AKP同功酶谱有三条带,肾AKP同功酶谱为一条带,骨AKP有二条带,肠AKP有一条带。我们对提纯了的各脏器AKP同功酶进行了生物学特性的研究。1.各脏器AKP R_f值肾>骨>肝>小肠。2.56℃±1作用10分钟、骨AKP保留活性3.8％,肝AKP保留活性13.4％,肠AKP保留活性38.8％,肾AKP保留活性58.4％。3.四个脏器AKP对磷酸苯二钠的Km是:骨Km0.581×10~(-6)M,肝Km0.305×10~(-6)M,肠km0.607×10~(-6)M,肾Km0.436×10~(-6)M。4.L—phe的抑制作用是:小肠AKP>肾AKP>骨AKP。对肝AKP无抑制作用。5.L—Leu,L—Arg,Urea均对小肠有强烈的抑制作用。肝AKP、骨AKP对L—Leu均不敏感,肾AKP对L—Leu稍敏感。肝AKP对Urea的敏感性高于肾AKP、骨AKP。6.EDTA—Na_2对各脏器 AKP均有强烈的抑制作用。故根据上述各种生物学特性可把鸽肝、肾、骨、肠四个脏器AKP同功酶分离开。     

肉食兽4种细小病毒亲缘关系的研究

首先应用血凝抑制试验(HI)和对流免疫电泳交叉试验,对从我国分离的貂肠炎病毒(MEV)、豹细小病毒(LPV)、犬细小病毒(CPV)和貉细小病毒(RPV)进行了血清学比较研究,发现这4种病毒在血清学上关系密切.然后从感染病毒48h的猫肾传代细胞中分别提取、纯化这4种病毒的中间复制型DNA(RF-DNA),以λ—DNA—Hind Ⅲ片段为分子量标记,确定4种病毒的RF—DNA分子大小均在5kb左右.再应用限制性内切酶Hac Ⅲ和Hind Ⅲ分别完全酶切4种病毒的RF—DNA.结果表明,应用Hind Ⅲ酶切,4种细小病毒的RF—DNA都产生3个酶解片段;应用Hac Ⅲ酶切,MEV产生3个酶解片段,其余3种病毒产生4个相同的酶解片段,从而可将MEV与其余3种病毒明显地区别开.Hac Ⅲ酶切MEV和CPV的结果与国外报道的“MEV产生5个片段,CPV产生6个片段”不同.     

银狐冻精精子数对蓝狐受胎率的影响

在1989年和1990年的繁殖季节,对617只年龄为1～6岁(2.6±0.1)的雌性蓝狐,用银狐冻精进行人工受精。每一输精剂量含精子数分别为1.5×10~3(n=213,1989+1990),1.0×10~8(n=172;1990),0.75×10~8(n=119,1989)     

铅胁迫对14个紫花苜蓿杂交组合生理生化指标的影响

重金属污染严重危害动植物生长和人类的健康,筛选耐铅的育种材料,对提高紫花苜蓿（Medicago sative L.）的产量及品质有着重要意义。本研究以14个紫花苜蓿杂交组合F1代为材料,研究在不同浓度硝酸铅溶液的处理下,对其幼苗的可溶性蛋白（SP）,可溶性糖（SS）,丙二醛（MDA）含量以及过氧化氢酶（CAT）活性的影响。采用隶属函数法综合评价各杂交组合的耐受性,由高到低的次序是：11×M > 8×M > 3×M > 1×M > 7×M > 9×M > 6×M > 2×M > 5×M > 10×M > 4×M > 13×M > 14×M > 12×M。     

苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒在家蚕蛹体内的复制及重组病毒外源基因的表达

家蚕蛹在复眼着色期,经4℃冷藏24小时后,可被Ac NPV(苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒)感染。在蛹体内复制出的多角体大小差异较大,且比在昆虫Sf—21细胞中繁殖的Ac NPV和在蚕蛹体内形成的Bm NPV多角体小。在蛹体内繁殖的Ac NPV的游离病毒可以回返感染Sf—21细胞。由蚕蛹内分离的Ac NPV基因组DNA的限制性内切酶图谱与野生型的Ac NPV相同。以上结果证明Ac NPV可以在蚕蛹体内复制。含HBsAg基因(人乙肝表面抗原)的重组Ac NPV亦可感染家蚕蛹,并能正确表达外源基因。此外,还发现化蛹后第2天的家蚕蛹被注射约5×10~5PFU的Ac NPV,可诱导“人工滞育蛹”现象的发生,在25℃经过30天后蛹仍存活,发育停滞在复眼着色前阶段。     

鸡马立克氏病

鸡马立克氏病(Arian Marek's Diseasc,MD)于1907年由匈牙利学者马立克发现和报道,并因此得名。本病的特征是炎症性和肿瘤性病变,主要侵害神经系统,也侵害内脏和其他组织,是一种急性爆发型产瘤病。病原马立克氏病病毒(MDV)属疱疹病毒科丙疱疹病毒亚科,为24面体主体对称,直径100—150nm,内含分子量为54-92×10~6道尔顿的DNA双链,在氯化铯中浮密度为1.27—1.29克/毫升。病毒粒子可被氯仿、乙醚等灭活。本病毒是细胞结合性病毒,因此来自感染鸡组织的完整细胞必须用来作接种物,但来自羽毛囊的除外,因为病毒是从     

青海湖裸鲤血液指标的测定

采用常规法对青海湖裸鲤 10项血液指标进行了测定。结果 :RBC ,1.2 8± 0 .2 7× 10 1 2 L ;WBC ,31.99± 3.41×10 9 L ;Hb ,71.8± 11.4g L ;血清指标 :总蛋白 5 2 .92± 8.74g L ,总脂 9.77± 2 .30g L ,胆固醇 5 .97± 2 .0 6mmol L ,血糖 10 .0 9±3.5 6mmol L ,无机磷 3.17± 0 .6 5mmol L ,Mg++0 .74± 0 .2 1mmol L ,Ca++2 .84± 0 .18mmol L。     

杆状病毒表达载体系统研究进展

昆虫杆状病毒科(Baculoviridae)因包埋于多角体中的病毒粒子呈棒状而得名,迄今为止,用于基因工程的杆状病毒均属核型多角体病毒(nuclear polyhedrosis virus,NPV)。NPV是一类双链DNA病毒,它的DNA是90—230Kb的环状分子。利用NPV作为外源基因表达载体的设想最初是由Miller 1981年提出。1983年     

猪源乙型肝炎病毒样病毒的提纯与鉴定

用检测人血清乙肝标志物的试剂和方法,检测2823份猪血清,检出HBsAg阳性血清56份。对37份HBsAg阳性猪血清检测抗—HBs、HBeAg、抗—HBe、抗—HBc,有23份呈阳性结果。取双阳性血清经氯化铯梯度离心,获得了形态与HBV相似的病毒粒子,其比重为1.30,分子量为2.2×10~5道尔顿。将其与抗HB_(?)做免疫电泳,可见有沉淀线形成。以常规方法提纯其基因片段,以HBV引物为以基因引物做PCR扩增,结果可见有基因片段形成。其位置与HBV扩增物相近,证实两株病毒有基因同源性。试验结果认定,此毒为猪源HBV样病毒。     

藏山羊乳主要营养成分及乳酶、乳清蛋白的研究

本文研究了分布于西藏和四川地区的藏山羊乳蛋白、乳糖和乳脂含量,并对乳中4种酶活力及乳清蛋白的组成进行了研究。结果表明:藏山羊乳中3种营养成分存在一定的地区差异,脱脂乳中乳酸脱氢酶,碱性磷酸酶,γ-谷氨酰转肽酶、乳过氧化物酶活力分别为81.9±37.8、7.7±3.5、437.4±93.0、532.7±202.6单位。乳过氧化物酶在体外可被10~(-5)M的硫氰酸根或乳酸根活化。用琼脂糖凝胶电泳可将乳LDH分出LDH_1、LDH_2和LDH_3三带,各带所占百分比例分别为50.6±4.5、31.6±4.2和17.8±3.3,提示乳LDH不是来源于血液。用SDS—PAGE可将乳清蛋白分出5条区带。     

鹑源减蛋综合征病毒QAVc—94株的酶切图谱分析

选HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、SphⅠ、BamHⅠ、BamHⅠ和BglⅠ6种限制酶，对QAVc-94株和AV－127国际标准株的DNA进行酶切图谱比较结果发现，QAVc-94株用上述6种酶酶切得到的片段数分别为10、3、12、4、6、9条，将各片段碱基数相加得出其基因组长34.7kb，略高于国内的报道，而与Zask等的结果相接近，从分子水平上将QAVc-94鉴定为一株EDSV。对照AV－127株的酶切结果与文献报道相符。QAVc-94株酶切图谱分析显示：HindⅢ和EcoRⅠ的酶谱与报道的其他EDSV分离株基本相似，HindⅢ的酶谱与国内研究最多的AA－2长春分离株一致，EcoRⅠ的酶谱结果与Zask等报道的B8／78株相同。而其他4种限制酶的酶切图谱与已报道的各地分离株相比，差异较大，如PstⅠ和BglⅠ多出2－5个识别位点。说明鹌鹑源EDSV已与鸡源、鸭源、鹅源EDSV有较大的变异，是一株血清型相同而基因型不同的鹌鹑减蛋综合征病毒。     

百脉根原生质体的分离和酶解条件的研究

分别以百脉根里奥(Lotus corniculatus L.cv.Leon)无菌苗子叶及由下胚轴和子叶形成的胚性愈伤组织为供体材料,进行原生质体游离,研究不同酶解条件对原生质体分离的影响,以期为进一步开展属间体细胞杂交及培育新品种奠定研究基础。结果表明:子叶和愈伤组织原生质体分离最适的酶液组合均为2%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.3%半纤维素酶、以及0.55 mol·L^-1甘露醇,产量及活力分别可达4.13×10⁶个·g^-1,65%和3.8×10⁶个·g^-1,67.4%;最佳酶解时间分别为6 h和12 h。预培养8~10 d,CPW-10溶液中预质壁分离1 h或预暗培养1 d等预处理措施可显著提高愈伤组织原生质体的产量及活力(P<0.01)。     

聚合酶链反应(PCR)法检测嗜水气单胞菌丝氨酸蛋白酶基因

根据已报道的鱼源嗜水气单胞菌的丝氨酸蛋白酶基因序列设计和合成了 1对可扩增目的片段长度为 893bp的引物 ,建立了检测嗜水气单胞菌丝氨酸蛋白酶基因 PCR方法。脱脂奶平板产溶蛋白圈的 10株鱼源嗜水气单胞菌株以及 ATCC796 6检测均为阳性 ,检测的灵敏度可达 2 .0× 10 - 3g/ L的模板 DNA。表明 PCR法在分子水平快速、特异检测嗜水气单胞菌丝氨酸蛋白酶并可作为流行病学调查的手段     

家蝇基因组文库的构建

从孵化 36 h的蝇蛆中提取基因组 DNA,用限制性内切酶 Bcl 随机酶切 ,回收 10～ 2 3kb的酶切 DNA片段 ,通过匹配粘性末端与磷酸化的 EMBL3Bam H 酶切载体臂连接 ,在体外经包装系统包装成活的重组噬菌体 ,成功地构建了家蝇基因组文库。重组噬菌体转染 KW2 51 宿主菌 ,测定文库效价为 5× 10 4 pfu/m L     

江西主要县市猪肝中硒的含量

采用催化极谱法检测了江西省36个县市108份临床健康成年猪的肝硒含量。全省猪肝硒平均水平为0.5795±0.2653×10~(-6)(干重),平均硒含量在1.00×10~(-6)以上的只有一个县市,0.99～0.60×10~(-6)之间的12个县市,0.59～0.30×10~(-6)之间的20个县市,0.29～0.20×10~(-6)之间的3个县市。全部猪肝样品中有11份样品的含硒量低于0.20×10~(-6)。这些结果表明,我省大部分县市处于缺硒病发病的临界状态。有的县市还存在严重缺硒的局部地区,应引起高度重视。