药用植物刺五加根尖压片技术研究

[目的]研究药用植物刺五加根尖的压片技术。[方法]以刺五加幼苗根尖为试材,通过压片试验研究取材时间、预处理液浓度、预处理时间、固定和保存、解离时间和染色条件对根尖压片效果的影响。[结果]最佳取材时间为9：30～10：30和13：30～14：30;用0．10％秋水仙素处理2．5和3．0h的材料的中期和前中期细胞增多;固定根尖2．0～4．0h对后续操作没有显著影响;60℃下解离10min以上根尖的细胞膜破裂较多,解离8min以下的根尖的细胞壁没有破碎,镜下观察细胞呈方形,无膨胀。室温下解离15min以上和12min以下的解离效果都不理想。室温下用1mol／L盐酸解离根尖15rain,然后用改良的石炭酸品红染液进行染色,通常染色10min左右即可达到较好的染色效果。[结论]该研究为刺五加的染色体核型分析提供了技术支持。     

菊花染色体数目及核型分析

以菊花幼嫩茎尖为材料,采用酸解去壁低渗法,改良苯酚品红染色法进行细胞染色体观察.结果表明:菊花染色体核型为2n =2x =36 =31m +5sm,属2A型.     

根尖压片法制备树莓染色体标本的研究

以红泡刺藤(R.niveus)、栽秧泡(R.ellipticusvar.obcordatus)和插田泡(R.coreanus)绿枝或硬枝扦插生根的根尖为材料,通过取材时季与扦插环境气温,8-羟基喹啉、秋水仙素和对二氯苯3种药剂在不同的温度下预处理不同时间,混合酶液和盐酸在不同温度下解离,醋酸洋红、卡宝品红、席夫试剂和铁矾-苏木精各染色剂染色压片等的对比研究,并以细胞中有丝分裂中期分裂相的数目、染色体的清晰性、分散程度和聚缩程度以及染色体的形态为衡量指标,探索出适于树莓属植物核型分析的根尖压片方法是:当根尖长至1~2 cm、扦插环境气温17~23℃时取材,卡诺氏固定液I低温固定24 h,用0.002 mol/L 8-羟基喹啉在0~4℃下预处理24 h,再用1 mol/L HCl(60±1)℃恒温解离4~7 min,最后用卡宝品红染色压片能获得效果好树莓染色体标本,该染色体标本完全适用于核型分析。     

金盏菊根尖细胞染色体制片与核型分析

以金盏菊根尖为材料,分析取材时间、根长、预处理时间与试剂种类对染色体制片效果的影响,并研究其核型。结果表明:在根长为1.0～1.5 cm、上午8:30至9:30取材,能获得较多有丝分裂中期相的细胞;用对二氯苯饱和溶液在6℃处理金盏菊6 h,可以获得浓缩程度适宜且形态清晰的染色体。通过染色体制片可以观察到,金盏菊常染色体数为28,包括中部着丝点和近中部着丝点染色体;染色体相对长度为5.93%～8.46%,相对长度系数为0.83～1.18,臂比最大值为2.34;金盏菊体细胞中有多达11～18条B染色体,B染色体有棒状和点状形式,其核型公式为2n=18m+10sm,为2B类型。     

21个药用菊花栽培类型的核型分析

通过常规压片对我国药用菊花21个栽培类型制备染色体标本,并进行核型分析。结果表明:21个栽培类型为混倍体,多为六倍体,也有个别为四倍体(‘黄药菊’)和五倍体(‘大黄菊’)。最长/最短染色体的范围为1.77～3.86,核型不对称系数为58.60%～62.96%,‘滁菊’、‘大亳菊’、‘小亳菊’、‘异种大白菊’和‘小白菊’的核型为2A型,其他16个类型为2B型。21个药用菊花染色体呈现多态性,而且各个类型之间染色体长度、着丝点位置、随体的有无均不同。     

一种改进的大麦根尖染色体压片法及其应用

以大麦根尖为实验材料,采用改良的苯酚品红为染色液,在《遗传学实验》的基础上探索适宜的预处理时间、解离时间和染色时间,省略了纤维素酶和果胶酶处理步骤,形成了一套快速、简单的大麦根尖压片方法,该方法获得的染色体图像清晰,便于计数,可用于大麦倍性鉴定和染色体变异方面的研究。     

黄芩根尖预处理方法的优化及其核型分析

为确定黄芩有丝分裂中期分裂相所在高峰期,探讨黄芩根尖的最佳预处理方法,采用不同取样时间和方法对黄芩根尖进行预处理,观察黄芩染色体收缩程度、分散度、着丝点清晰度以及染色体所处分裂时期。结果表明黄芩有丝分裂中期在8∶30、12∶00和16∶00左右达最高峰。用0.002 mol/L 8-羟基喹啉对黄芩根尖进行离体处理3 h,所得染色体分散度较高,收缩长度适宜,为最佳处理方法;采用非离体处理4 h,染色体收缩程度不明显,分散度较低,但可显示一定的带型。故用0.002 mol/L 8-羟基喹啉离体处理3 h的预处理方法对黄芩进行核型分析,核型公式为2n=2x=18=10m 6 sm 2 st,染色体基数为9。     

3个二倍体风信子品种核型分析

采用常规根尖压片法对吉普赛女王(Gipsy Queen)、紫色情感(Purple Sensation)、奥德修斯(Odysseus)3个二倍体风信子品种进行核型分析,以分析不同品种间的进化程度和亲缘关系。结果显示,3个品种风信子的染色体形态比较一致,均由中部(m)、近中部(sm)着丝粒染色体组成,具1对随体,但随体分布存在一定的差异,其中Gipsy Queen的核型公式为2n=2x=16=6m+8sm+2sm(sat),Purple Sensation的核型公式为2n=2x=16=6m+2m(sat)+8sm,Odysseus的核型公式为2n=2x=16=6m+2m(sat)+8sm。3个品种的核型不对称系数分别为59.24%、58.92%、59.18%,核型类型均为2B类型。     

青钱柳染色体的制片技术及核型分析

采集母树生长于湖北省宜昌市五峰土家族自治县的青钱柳(Cyclocarya paliurus)二倍体和四倍体种子,在室外自然层积至萌发,待根长(L)分别达到0.5 cm2.0 cm时,选取根部嫩白且完整的根尖,按照试验设定的处理条件进行预处理、固定、解离、染色。取长度达到0.5 cm相似文献   

西洋参根尖染色体的核型分析

本文进行了西洋参根尖染色体的计数，并对其染色体核型进行了分析研究。结果表明，其染色体数目为４８条。按Ｌｅｖｅｎ等的分类原则，其核型为２ｎ＝２ｘ＝２０ｍ＋２ｂｓｍ＋２ｓｔ，属于Ｓｔａｂｂｉｎ核型的“２Ｂ”型。     

百合根尖染色体制片技术研究

以卷丹百合根尖为试材,对其染色体制片技术的取样时间、预处理液、解离时间、染色剂等方面进行了试验研究,并对3个居群的卷丹百合染色体数目进行了观察。结果表明,根尖取样时间以上午8:30~9:30为佳,用0.1%秋水仙碱溶液4℃下预处理24小时,经卡诺固定液固定6h后,在1mol/L盐酸60℃下恒温水浴中解离8 min,改良卡宝品红溶液染色压片镜检,能取得良好的制片效果。卷丹染色体数目观察表明,3个卷丹居群的染色体数目均为2n=3x=36。     

国庆菊继代增殖培养技术初探

为国庆菊的工厂化快繁提供理论依据,选取初代培养完成的国庆菊截取茎段作为外植体,分别以 MS、N6和 White 为基本成分,附加不同浓度细胞分裂素（6-BA）组成12种继代增殖培养基,研究了国庆菊继代增殖培养技术。结果表明：不同培养基培养,第11天开始长新叶,第15天开始长丛生芽,30 d 后增殖情况差异明显,MS 培养基的丛生芽最多,且旺盛;N6培养基的丛生芽较 MS 少但比 White 多且旺盛, White 培养基的丛生芽最少且最弱。细胞分裂素浓度为1．5 mg/L 的 MS 培养基的国庆菊丛生芽增殖倍数最大,达17．5;其次是浓度为0．5 mg/L 的 N6培养基,为11．5;浓度为0．5 mg/L 的 White 培养基的丛生芽增殖倍数最小,仅1．7。MS 是继代增殖培养的最适培养基,1．5 mg/L 是最适细胞分裂素浓度。     

杭白菊引种与品质研究

[目的]研究杭白菊在安徽亳州市、山西芮城县和太谷县的引种表现,以满足引种地对杭白菊的需求,扩大杭白菊的生产区域和栽培面积。[方法]观察和测定杭白菊在3个引种地的物候期、产量性状、生长开花习性和品质。[结果]从5年的引种结果看,芮城和太谷引种2地的杭白菊花芽分化期均比原产地早,如初花期桐乡市为10月25日,而太谷县为10月5日,比原产地早开花20余d;越向北引种越有产量下降和植株增高的趋势,引种2地(芮城、太谷)的产量均比原产地低;初开杭白菊各项指标均比较好,但产量过低,半开花期和盛开花期采收的产量和各指标都符合生产需要,为采收适宜期。[结论]引种地亳州市和芮城县可成为杭白菊新的生产基地;而太谷县在个别年份,开花期遇霜冻,产品变质而不能入药,目前还不是杭白菊的安全生产地,需要继续驯化。     

菊花多糖最佳提取工艺研究

考察了提取温度、提取时间、pH值、液固比、醇沉终浓度等理化因素对菊花多糖提取效果的影响,确定了菊花多糖的最佳提取工艺参数.结果表明,提取温度95℃、提取时间3 h、液固比25∶1、醇沉终浓度为80%,菊花多糖的提取率为18.54%;微波助提可以明显提高菊花多糖的提取效率.     

菊花EST-SSR分析及标记开发

为了开发菊花的分子标记,对7087条菊花EST进行拼接,得到275个contigs,发现50个SSR位点;在拼接的contigs中SSR平均密度为每2854.3bp含有1个SSR。三核苷酸重复基元的SSR类型最多,占总数的50.00%;在二碱基重复中,最主要的优势重复基元是AC和AG;三碱基中CAT和CCA为优势重复基元;四碱基、五碱基重复类型中,(TTTN)n和(ATTTN)n重复基元为对应优势基元;这些优势重复基元中富含碱基A和T,菊花EST序列中高度变异的微卫星（长度>20bp）约占2.00%。根据得到的菊花EST-SSR,共设计出428对引物,并选取了28对SSR引物对黄山贡菊基因组DNA进行PCR扩增,其中有27对引物扩增成功。     

平衡施肥对菊花产量的影响

通过田间试验,研究平衡施肥对菊花产量的影响。结果表明:不同氮素用量影响菊花不同时期干物质和养分的阶段积累量,收获期氮磷钾在不同器官的分配比率不同,各处理菊花的产量差异较大,平衡施肥过程中菊花的氮肥用量为135kg/hm2。     

采收时期对杭白菊4个新品种矿质元素的影响

为更好地推广杭白菊Chrysanthemum morifolium新品种,进一步提升药材质量,在花蕾、胎菊、幼菊、全菊等4个采收期,分别采摘4个新品种（‘金菊1号“金菊2号“早小洋菊“迟小洋菊’）样品,开展矿质元素的动态积累研究。采用湿法消化法处理样品,通过电感耦合等离子体质谱法（ICP—MS）、原子吸收光谱法、紫外一可见分光光度法测定杭白菊4个新品种不同采收期的矿质元素,并用主成分分析等统计方法对测定结果进行分析。结果表明：杭白菊4个新品种在4个不同采收期均含有丰富的钾、磷、镁、钙、铁、锰、锌等人体必需矿质元素,采收期对杭白菊中矿质元素质量分数影响明显,花蕾、胎菊高于幼菊和全菊;4个新品种之间存在明显差异（P〈O．05）,但无明显差异规律。多数样品重金属总量超出限量范围,‘金菊2号’幼菊和全菊中重金属积累明显低于其他3个品种。解决杭白菊重金属超标的方法研究具有紧迫性和重要的应用价值。     

菊花快速繁殖组培技术的研究

本文旨在前人研究的基础上,寻找菊花繁殖快、成本低、适合生产上应用的较简便的组织培养技术。试验表明,用带腋芽的茎段诱导丛生芽,经过继代培养,将试管无根苗扦插于石英砂基质上诱导生根,然后直接移植在田间圃地,是菊花比较理想的快速组培途径。     

核型分析方法研究及进展

染色体核型分析是生物学研究中常用的实验方法。核型分析技术区别于传统的形态鉴别,在细胞水平上研究染色体特征,并以此为依据对植物进行分类,结果更加真实准确,对于植物分类、进化过程、以及属种间关系具有重要的应用价值。该文综述了核型分析研究的发展过程,指出了目前实验中存在的问题,并对其发展前景进行展望。