奶牛布鲁氏菌病微量凝集试验诊断方法的建立

为探索操作简便、快速、实用的奶牛布病诊断方法,本研究建立了奶牛布鲁氏菌病(布病)诊断96孔V型板微量凝集方法,并优化了试验条件。结果显示,抗原的最佳稀释浓度为1:20,反应最适温度为37℃,反应时间为24 h;为验证本研究建立的微量凝集方法的准确性,对120份奶牛布病虎红平板凝集试验阳性血清样品进行微量法凝集和试管凝集试验,结果显示,微量法与虎红平板凝集试验的符合率为83.3%,试管法与虎红平板凝集试验符合率为80.0%。提示,微量凝集试验可以作为试管凝集试验的替代方法,应用于规模化奶牛场布病的诊断和检疫。     

胶体金法和平板及试管凝集检测羊布鲁氏菌病的比较

为了验证免疫胶体金法(ICG)在羊布鲁氏菌病检测中的应用效果,选择经虎红平板凝集试验(RBPT)检测出的羊阳性和阴性血清各15份、经试管凝集试验(SAT)确定的阳性羊现场采集的耳尖全血15份,用胶体金法进行复检。结果表明,平板凝集检出的15份阳性血清用胶体金法检出阳性13份,符合率86.7%;平板凝集检出的15份阴性血清用胶体金法检出阴性15份,符合率100%;试管凝集检出的15份阳性样品,现场采集耳尖血用胶体金法检出阳性15份,符合率100%。初步表明胶体金法具有操作简便、快速、微量等特点,适合于羊布鲁氏菌病的现场检测。     

牛、羊布鲁氏菌病试管凝集试验与微量凝集试验检测方法的比较

血清学检测方法因其快速、安全、高效等特点被广泛应用于布鲁氏菌病的检测和诊断。本文通过对保存的226份牛、羊血清样品同时使用试管凝集法与微量凝集试验进行检测并比较分析其在诊断中的意义。结果显示,微量法与试管法两者的符合率为97.79%,两种检测方法无统计学差异。但微量法的阳性检出率要高于试管法,同时由于微量法具有操作简便、快捷及结果判定更为直观、简单等优点,因此,微量凝集试验更适宜在我国基层布鲁氏菌病大量样本监测、诊断中推广应用。     

牛布鲁氏菌病不同检测方法比较与试剂质控

选用国标等同阳性血清,对虎红抗原进行质控,经三次重复试验,最终选定稀释度为1/45时反应阳性,1/55时反应阴性。ELISA试剂盒质控选择国标等同阳性血清,稀释度为1/16时反应阳性,1/64时反应阴性。利用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)和抗体竞争ELISA试验三种方法,对甘肃省河西地区4个奶牛场共计1167份奶牛血清进行了检测,结果表明:三种试验方法的符合率分别为:抗体竞争ELISA试验与虎红平板凝集试验符合率为52.7%,与试管凝集试验符合率为34%。虎红平板凝集试验与试管凝集试验符合率为72.1%。抗体竞争ELISA试验方法最为敏感。     

几种禽霍乱疫苗免疫效果观察

近几年来，我们对禽霍乱几种疫苗及疫苗之间联合免疫的效果进行了测定和观察，以探索一条可行的禽霍乱免疫程序，并以凝集试验为监测手段，在农村散养鸡中进行禽霍乱的控制观察，现报告如下：一材料和方法（一）禽霍乱油乳剂疫苗由河南农大牧医系供给和我局化验室自制。（二）禽霍乱凝集抗原和阳性血清由河南农大牧医系微生物教研室提供。（三）C48－1强毒由南京农大提供中监所冻干毒。（四）禽霍乱弱毒冻干苗和禽霍乱氢氧化铝灭活苗（731）均为郑州兽医生物药厂生产。（五）禽霍乱的监测采用微量凝集试验。（六）试验鸡选择和分组第一阶段…     

鸡白痢/禽伤寒沙门菌抗体检测试剂的比较与评估

对市面上现有鸡白痢/禽伤寒沙门菌抗体平板凝集检测试剂及其不同批次,微量凝集检测试剂和ELISA共4种检测试剂进行比较与评估。用4种试剂以及试剂A的不同批次检测来自11个种鸡场的1 650份血清,计算不同试剂检测种鸡场的抗体阳性率,2种试剂之间的阳性符合率、阴性符合率和总符合率,并以Kappa检验判断不同检测方法及其试剂之间的一致性程度。平板凝集试剂A的不同批次间以及平板凝集试剂A和B之间具有高度一致性(Kappa系数=0.714~0.746),但阳性符合率不足80%。平板凝集试剂A、微量凝集试剂C、ELISA试剂D之间仅具有中度或弱一致性(Kappa系数=0.392~0.542)。不同鸡白痢/禽伤寒沙门菌抗体检测试剂间存在差异,平板凝集试剂不同批次间也存在差异,提示试剂生产厂家应加强质量控制,同时研发敏感性、特异性、稳定性更好的替代试剂,而种鸡场在进行抗体监测时应固定使用1种检测试剂,避免影响检测结果的准确性和连续性。     

应用干血纸MAT检测育肥牛布鲁氏菌病血清抗体

应用干血纸微量凝集试验(MAT)对育肥牛进行检测,并与试管凝集试验(SAT)作了对比.550头育肥牛的干血纸 MAT 与 SAT 的阳性符合率为100%,但前者血清凝集价显著高于后者,且检测耗时短,操作简便,特异、敏感,检样便于携带保存.因此,MAT 更具有实用价值.     

布鲁氏菌病抗体ELISA方法与凝集试验的结果比较

分别以酶联免疫吸附试验(ELISA)、试管凝集试验(SAT)和虎红平板凝集试验(RBPT)方法对奶牛布病送检样本进行布病抗体检测,结果显示:ELISA方法与SAT方法阳性符合率为79.28%,阴性符合率为86.84%,总符合率81.21%;与RBPT方法阳性符合率为94.59%,阴性符合率为81.58%,总符合率95.97%。     

分光光度测量法与比浊法判定布鲁菌病试管凝集试验结果的比较

为鉴定、验证、评价分光光度测量法在试管凝集试验结果判定中的实用价值,按照《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T 18646-2002)试管凝集试验操作方法检测72份已知凝集效价血清,比较分光光度测量法和比浊法判定结果差异。结果显示,分光光度测量法和比浊法判定72份血清效价与已知效价符合率分别为88.89%(64/72)、83.33%(60/72)(P0.05),判定结果一致率为94.44%,Kappa值0.770.75,但分光光度测量法判定效价与已知效价符合率高于比浊法,且对试验结果的判定更为客观、准确,因此,分光光度测量法判定试管凝集试验结果适宜在布鲁菌病监测中推广应用。     

三种方法检测布鲁氏菌病病原的结果比较

本试验采用试管凝集、虎红凝集和金标卡检测三种方法对3141份牛羊血清进行布鲁氏菌病病原检测,并对检测结果的敏感性、特异性和符合率进行分析,比较三种方法的一致性。结果证明这三种方法的敏感性都能达到100%,均能够检出全部阳性样品,其中虎红凝集试验和金标卡检测的特异性相对试管凝集试验而言能达到99%以上水平,虎红凝集试验的特异性和符合率稍高于金标卡检测,这两种方法均可用于对日常布病病原的筛查。     

抗凝剂对动物布鲁菌病虎红平板凝集试验的影响

为探讨含抗凝剂样品对动物布鲁菌病虎红平板凝集试验的影响,采集猪、牛、羊等不同动物的血液各10份,经柠檬酸钠、EDTA、肝素钠等抗凝剂处理后与对应的自然凝固、立即离心获得的样品分别进行虎红平板凝集试验和试管凝集试验,比较两种试验结果的差异。结果显示,经抗凝剂处理后的血浆样品虎红平板凝集试验结果均为阳性,试管凝集试验均为阴性,而自然凝固的血清样品两个试验结果均为阴性,不同处理方式造成的虎红平板凝集试验结果差异现象不受动物种类的影响。抗凝剂对虎红平板凝集试验影响非常显著,对试管凝集试验无影响。因此,临床上用虎红平板凝集试验进行动物布鲁菌病筛查时,不能使用含有抗凝剂的血液样品,否则会出现严重的非特异性凝集现象。     

虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测奶牛布鲁菌病的比较

布鲁菌病主要采用凝集试验来检测,本试验用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对江苏海安、江都、无锡和兴化地区的660头奶牛的血清样品进行平行检测,虎红平板凝集试验的阳性检出率为9.7%,试验管凝集试验的阳性检出率为5.5%;与后者相比,虎红平板凝集试验的敏感性为100%,特异性为95.3%,符合率为95.6%。这些数据表明,江苏地区某些奶牛场存在布鲁菌感染,虎红平板凝集试验可以用于布鲁菌病初步检测。     

济宁地区猪布鲁氏菌病流行病学调查及3种检测方法比较

为了解济宁地区猪布鲁氏菌病的感染状态,从该地区随机选择5个猪场,采集600份血液样本,以上猪场均未免疫猪布鲁氏菌病疫苗。先用布病虎红平板凝集试验(RBPT)筛选,再用试管凝集试验(SAT)和ELISA(酶联免疫吸附试验)复核。结果表明,虎红平板凝集试验共检出阳性血清样本13例,阳性率为2.17%;试管凝集试验检出阳性血清样本12例,阳性率为2.00%,与虎红平板凝集试验符合率为92%;ELISA试剂盒检出阳性血清10例,阳性率为1.67%,与虎红平板凝集试验符合率为77%。结论为:济宁地区的猪场存在布病感染,种猪的阳性率最高,其次是肥育猪和仔猪,并且在3种检测方法中,RBPT最敏感,而ELISA特异性最好。     

民和县“出户入园”奶牛“两病”检测研究

本文采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验和结核菌素皮内变态反应、牛结核r-干扰素ELISA试验分别对奶牛布病和结核病进行了检测,结果为:奶牛布病阳性率为3.26%;奶牛结核病阳性率为0.72%;结核菌素变态反应与牛结核r-干扰素ELISA试验阳性符合率为100%。     

榆林市某县奶牛结核病和布鲁菌病检测与分析

为了解榆林市某县2010年-2014年期间奶牛结核病和布鲁菌病的发生情况,应用结核病国家检测标准(GB/T18645-2002)-结核菌素皮内变态反应检测奶牛结核病,应用虎红平板凝集试验和试管凝集试验检测奶牛布鲁菌病。结果表明,奶牛结核病平均阳性率为0.72%;奶牛布鲁菌病平均阳性率为1.19%,虎红平板凝集试验和试管凝集试验2种检测方法的符合率一致。     

试管凝集试验与微量凝集试验检测奶牛布鲁氏菌病效果比较

本文对2021年保存的146份未免疫布病疫苗的奶牛血清进行虎红平板凝集试验,检测出15份虎红抗体阳性,将这15份样品用试管凝集试验(SAT)与微量凝集试验(MSAT)进行复核,两种方法布病抗体阳性均为10份,阳性符合率一致,微量凝集试验多了2份可疑,隔4周后对2只可疑牛只进行重检,一头奶牛转阳,一头变为阴性,两种方法和试剂比对结果一致。相比而言,微量凝集试验具有操作简捷精准、节约试剂耗材、试验结果容易用肉眼辨认、废弃物处置压力小等优势,建议基层兽医实验室推广应用。     

某地区羊布鲁氏菌病血清学调查与4种血清学检测方法的比较应用

为更好地开展羊布鲁氏菌病防控技术指导,对某地20家养羊场、户采集羊血样328份,同时应用虎红平板凝集试验与胶体金检测卡进行初步检测,并将上述2种方法初检为阳性的样品与随机选取的阴性样品共计60份,分别应用试管凝集试验及cELISA进行确诊。结果显示,虎红平板凝集试验、胶体金检测卡、试管凝集试验与cELISA方法检测结果的总符合率分别为97.0%、98.3%和98.3%,该地区个体阳性率0.91%,群体阳性率10.0%。在此基础上,应用布鲁氏菌病国家标准阳性血清对4种方法的敏感性进行了测定,结果显示,cELISA检测方法敏感性最高,其次为试管凝集试验与胶体金快速检测卡。综上得出,胶体金检测方法既可以作为布病血清学检测的初筛试验,也可以与cELISA检测方法共同用作布病血清学检测的复核试验。     

兰州市城关区犬布鲁氏菌病血清学调查与分析

为了解甘肃省兰州市城关区犬布鲁氏菌病的流行情况，从兰州市城关区动物医疗机构和兰州市流浪动物救助站共采集犬血清343份，采用光滑型虎红平板凝集试验、粗糙型虎红平板凝集试验、通用型胶体金检测法和光滑型胶体金检测法进行检测，对4种方法检测出的阳性血清进行通用型快速PCR复检；对光滑型虎红平板和粗糙型虎红平板凝集试验检测出的阳性血清再分别进行光滑型试管凝集试验和粗糙型试管凝集试验复检。结果表明，4种方法共检出34份阳性血清，其中抗体检测法虎红平板凝集试验、试管凝集试验及布鲁氏菌通用型抗体检测试纸条分别检测出阳性血清22份、18份和12份，抗体阳性率分别为6.4%、5.2%和3.5%;抗原检测法通用型快速PCR检出阳性血清25份，抗原阳性率为7.2%。22份虎红平板凝集阳性样本经光滑型试管凝集试验和粗糙型试管凝集试验复检，共检出阳性血清18份，且均为粗糙型；布鲁氏菌光滑性抗体金标快速检测卡检测均为阴性。说明兰州市城关区犬感染的主要是粗糙型布鲁氏菌，快速通用型荧光PCR的阳性检出率最高。     

青海都兰野生反刍兽和啮齿动物布鲁菌病血清学检查

采集青海省都兰县境内动物血清:野生马鹿15份,野生岩羊6份,野生黄羊血清20份,高原鼠兔100份,喜马拉雅旱獭20份进行布鲁菌病检测,结果:被检野生马鹿血清15份,试管凝集阳性反应的2份,占13.3%,虎红凝集试验阳性反应1份,占6%;被检野生岩羊6份,试管凝集阳性反应1份,占16.7%,虎红凝集试验为阴性反应;被检野生黄羊血清20份,试管凝集阳性反应的3份,占15%,虎红凝集试验阳性反应1份,占5%;被检高原鼠兔血清100份,试管凝集阳性反应的3份,占3%,虎红凝集试验有阳性反应1份,占1%;被检喜马拉雅旱獭20只,试管凝集阳性反应的1只,占5%,虎红凝集试验为阴性反应。     

应用利凡诺尔血清试管凝集试验检测牛布氏杆菌病

对1202头自然感染和免疫牛血清作利凡诺尔试管凝集试验(Riv-T),并与标准试管凝集试验(SAT)和温感作微量补体结合试验(CFT)作比较,证明 Riv-T 是检测血清中 IgG 类抗体的一种方法,操作比 CFT 简单,并与 CFT 有较好的符合率(85.95～98.14%).