应用鸭胚肝细胞培养鸭肝炎病毒的研究

利用鸭胚肝细胞成功地培养了鸭肝炎病毒．并呈现典型ＣＰＥ，向其细胞维持液中加入１％的鸭胚尿囊液，ＣＰＥ的维持时间可延长至６０小时．将该病毒的细胞培养物回归鸭胚和雏鸭，其致病力不见明显减弱．鸭胚中和试验证明，鸭肝炎病毒在鸭胚肝细胞上形成ＣＰＥ的能力能被特异抗血清所中和．     

鸡减蛋综合症病原分离鉴定

通过鸭胚传代、病毒中各试验、ＨＩ交叉试验、理化特性测定、血凝谱试验、琼脂免疫扩散试验、电镜观察证实．我们所分离的病原为减蛋综合症病毒（暂定为ＥＤＳＶ－Ｒ９３１），该病毒的鸭胚毒价为１０（１４．４４）ＥＩｄ（５０）／０．１ｍｌ。     

应用鸭胚肝细胞培养鸭肝炎病毒的研究

利用鸭胚肝细胞成功地培养了鸭肝炎病毒，并呈现典型ＣＰＥ，向其细胞维持液中加入１％的鸭胚尿囊液，ＣＰＥ的维持时间可延长至６０小时，将该病毒的细胞培养物回归鸭胚和雏鸭，其致病力不见明显减弱。鸭胚中和试验证明，鸭肝炎病毒在鸭胚肝细胞上形成ＣＰＥ的能力能被特异血清所中和。     

郑州地区家鸭EDS－76血清学调查

郑州地区９个鸭场鸭群中有７个鸭场为ＥＯＳ－７６ＨＩ抗体阳性，阳性率为６６～１００％．不同日龄和不同品种鸭群对感染无明显差异．被感染ＥＤＳ－７６病毒鸭群虽无可见临床症候，对产蛋率也无明显影响，但有一定流行病学意义．试验证明，使用ＥＤＳ－７６ＨＩ母原抗体４．８Ｌｏｇ２以下的鸭胚，用ＨＡ５×２１２的种毒接种，对其病毒增殖没有明显的影响，可用于制造ＥＤＳ－７６灭活疫苗．但鸭胚母原抗体超过４．８Ｌｏｇ２以上，每增加１个滴度，所培养的病毒ＨＡ价下降５×２１．７．不宜作为制苗鸭胚．鸭群ＥＤＳ－７６血清抗体和卵黄抗体检测比较结果表明，被检的血清和卵黄抗体平均效价基本相同，可用卵黄代替血清作为血清学检查的被检材料．     

雏鸭病毒性肝炎的研究

１９９１年从云南某地疑似鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）的病雏鸭肝脏分离到一株病毒，经鸡胚染试验，电镜形态观察，中和试验鉴定，证明为鸭病毒性肝炎病毒１型（ＤＨＶ－Ｉ）毒株。该病毒对鸡胚高度适应，传递至８０代对雏鸭无致病力，经易感雏鸭连传代毒力无反强现象，故命名为ＤＨＶ－ＫＭ６０株。鸡胚测试其滴度为ＬＤ５０１０６－７．３２／０．２ｍｌ。采用ＤＨＶ－ＫＭ６０制备疫苗，经口服免疫，对１日龄雏鸭的安全性高，免疫原性     

鸡,鸭体内传染性法氏囊病病毒的分离及理化性质比较

从疑似传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病鸡及同群饲养的鸭体内各分离到１株病毒，用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ试验证明两病毒均为ＩＢＤＶ，病毒血清型为Ⅰ型。病毒可致死鸡胚，适应于鸡胚成纤维细胞并产生细胞病变（ＣＰＥ）。理化性质比较表明，两病毒为同源ＩＢＤＶ。研究表明，鸭可成为ＩＢＤＶ的携带者或传染源。     

新城疫病毒D10毒株稳定性及最小免剂量测定

将ＮＤＶＤ１０毒株于鸭胚尿囊腔和绒毛膜两个途径接种传代至５０代，分别测定不同代次胚液病毒ＨＡ，ＥＩＤ５０及免疫原性，结果表明该病毒尿囊腔途径接种也可获得较滴度病毒，不同代次病毒液ＨＡ和ＥＩＤ５０都分别在１：２５６和１０＾８．０／０．１ｍｌ以上免疫原性良好，但鸭胚致性随传代数增加而减轻，１２０小时内死亡率仅说明该病毒稳定性良好，该病毒于－２０℃和－５０℃保存期分别达６个月和１２个月，最小免疫剂量≤亡     

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究──EDS_（76）—NE_（4）株病毒的培养与鉴

在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚（ＣＥ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＣＥＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１∶２０４８０─１∶３２７６８０倍。     

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究：EDS76—NE4株病毒的培养与鉴定

在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＥＣＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１：２０４８０－１：３２７６８０倍。     

鸡减蛋综合征病毒GC2毒株稳定性测定

将ＥＤＳ７６ＧＣ２毒株接种于１０～１１日龄鸭胚尿囊腔内,连续传至第３０代,分别测定不同代次胚液病毒ＨＡ、ＥＩＤ５０及其免疫原性。结果,该病毒不同代次胚液ＨＡ和ＥＩＤ５０分别在１∶２１５和１０５．０／０．１ｍＬ以上,免疫原性良好,对鸭胚致死性随传代次数增加而减弱,说明该病毒稳定性良好。于－２０℃和－５０℃可分别保存６和１２个月以上。     

郑州地区家鸭EDS—76血清学调查

郑州地区９个鸭场鸭群中有７个鸭场为ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体阳性，阳性率为６６～１００％，不同日龄和不同品种鸭群对感染无明显差异。被感染ＥＤＳ－７６病毒鸭群虽无可见临床症候，对产蛋率也无明显影响，但有一定流行病学意义，试验证明，使用ＥＤＳ－７６ＨＩ母原抗体４．８Ｌｏｇ２以下的鸭胚，用ＨＡ５×２＾１２的种毒接种，对其病毒增殖没有明显的影响，可用于制造ＥＤＳ－７６灭活疫苗，但鸭胚母原抗体超过４．８Ｌｏｇ２以     

地高辛标记的核酸探针检测EDS病毒的研究

地高辛标记的核酸探针检测ＥＤＳ病毒的研究王雪敏（邯郸农业高等专科学校牧医系河北永年０５７１５０）郑明球蔡宝祥陈溥言（南京农业大学动物医学院１材料与方法１．１地高辛标记的ＥＤＳ病毒核酸探针制备将ＥＤＳ病毒ＮＥ４株（南京农大传染病教研室提供）鸭胚尿囊液（...     

鸡减蛋综合征的研究──Ⅱ．鸡减蛋综合征病原的分离和鉴定

用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种１０～１２日龄鸭胚盲传，分离到一株ＥＤＳ－７６·ＥＸＫ２病毒。自第３代起至第１０代，均从鸭胚尿囊液中检出血凝素．凝集鸡红细胞的特性可被ＥＤＳ－７６阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集兔红细胞。应用第３和第４代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡．成功地复制了ＥＤＳ－７６。攻毒后３５天内１１只试验鸡的总产蛋数无明显变化．产蛋率为８５～９４％，但产各种异常蛋占总产蛋数的２９％。电镜下发现原囊液中病毒颗粒呈球形、大小为７０～８０ｎｍ、无囊膜。     

鸭肝炎病毒A_(66)弱毒的冻干试验

鸭病毒性肝炎Ａ６６鸡胚弱毒冻干疫苗的毒价为１０７．２４ＣＥＬＤ５０／０．１ｍｌ，冻干前同批鸡胚毒毒价为１０７．４０ＣＥＬＤ５０／０．１ｍｌ。冻干过程中损失的毒价在０．５个滴度之内。本冻干苗的免疫期与鸡胚混合毒相同，对雏鸡至少为４５天。冻干苗的有效保存期为：－２０℃，２年；０～４℃，８个月，２０～３０℃，１０天     

新城疫病毒D_(10)毒株稳定性及最小免剂量测定

将ＮＤＶＤ１０毒株于鸭胚尿囊腔和绒毛膜两个途径接种传代至５０代,分别测定不同代次胚液病毒ＨＡ、ＥＩＤ５０及免疫原性,结果表明该病毒用尿囊腔途径接种也可获得较高滴度病毒,不同代次病毒液ＨＡ和ＥＩＤ５０都分别在１∶２５６和１０８．０／０１ｍｌ以上,免疫原性良好,但鸭胚致死性随传代次数增加而减轻,１２０小时内死亡率仅说明该病毒稳定性良好。该病毒于－２０℃和－５０℃保存期分别达６和１２个月,最小免疫剂量≤５０００ＥＩＤ５０     

贵州省鸡减蛋综合征病毒分离株的生物学特性鉴定

从贵州省出现产蛋下降等症状的鸡群中分离出１株病毒，命名为ＨＳ－１。该病毒对鸭胚致死率达５５．６％－６６．７％；在尿囊液中产生高效价的红细胞凝集素，第７代鸭胚尿囊液的血凝效价达到２＾１５－１８。     

鸡减蛋综合征病毒分离株AA－2基因组Hind Ⅲ酶切部分片段的分子克隆

以非免疫鸭胚增殖的减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ），经差速离心法纯化，电镜下观察到病毒无囊膜，大小为７０～８５ｎｍ。以蛋白酶Ｋ法抽提病毒基因组，琼脂糖凝胶电泳只出现１条分子量约３４ｋｂ、背景清晰的核酸带。ＨｉｎｄⅢ酶切ＥＤＳＶＤＮＡ可见１０条片段，以ｐＵＣ１９质粒为载体，采用鸟枪法对病毒基因组的ＨｉｎｄⅢ酶切片段进行分子克隆，获得１７个重组质粒，通过酶切、斑点杂交鉴定，证实已经成功地克隆到ＥＤＳＶ的５．２４ｋｂ、２．０２ｋｂ、１．６５ｋｂ、１．４７ｋｂ、１．４１ｋｂ等５个ＤＮＡ片段。     

一种新型鸭瘟病原的分离鉴定及其特性

从2000年起．山东省的潍坊、临朐、昌乐、昌邑、沂源等饲养肉鸭集中的地区发生一种同鸭瘟症状、剖检变化相似的疾病．但该病主要侵害1月龄以下的雏鸭．成年鸭发病率较低。从自然感染该病典型病死鸭脏器中获得1株病毒，病毒粒子直径80～200nm，呈圆形．有囊膜。进一步试验鉴定，该病毒核酸类型为DNA,ELD50为10^-3.46／0．2mL，对樱桃谷鸭胚、番鸭胚、麻鸭胚及SPF鸡胚的致死率分别为100％、90％、20%和0％。该病毒对氯仿、乙醚、酸碱处理敏感，56℃ 30min能使病毒灭活，该病毒无血凝活性．不能凝集“O”型人、鸡、鸭、鹅、猪、小鼠、豚鼠、绵羊等的红细胞。血清学试验表明，该病毒与鸭肝炎病毒阳性血清、雏番鸭细小病毒阳性血清、小鹅瘟阳性血清之间无中和作用，而能部分中和鸭瘟病毒阳性血清，表明该分离株与传统鸭瘟病毒呈部分相关性。初步确定该病毒为疱疹病毒属疱疹病毒科成员。鉴于该病用传统的鸭瘟疫苗不能预防．故现暂定名为“新型鸭瘟”。     

鸡减蛋综合征的研究Ⅱ.鸡减蛋综合征病原的分离和鉴定

用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种１０－１２日龄鸭胚盲传，分离到一株ＥＤＳ－７６·ＥＸＫ２病毒。自第３代起至第１０代，均从鸭胚尿囊液中检出血凝素，凝集鸡红细胞的特性可被ＥＤＳ－７６阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集免红细胞。应用第３和第４代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡，成功地复制了ＥＤＳ－７６。攻毒后３５天内１１只试验鸡的总产蛋数无明显变化，产蛋率为８５～９４％，     

雏鸭病毒性肝炎的诊治

取疑似雏鸭病毒性肝炎病死鸭肝脏制成１：１匀浆，分别接种９日龄鸡胚和１１日龄鸭胚，鸡，鸭胚均于接种后２４～３６小时全部死亡，取鸡胚尿囊膜制成１：２匀浆 接种１１日龄鸭胚，鸭胚于接种后６４小时死亡，取鸡胚尿囊液回归４日龄雏鸭进行人工发病雏鸭于２４～９６小时全部死亡，用已知抗鸭肝病毒卵黄液对发病鸭群紧急被动免疫注射，病鸭群于注射后３天全面停止死亡，取鸡，鸭胚尿囊液制成油乳剂免疫注射后３天全面停止死亡，了