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用抗原免疫构建分泌兔出血症病毒抗独特型抗体的杂交瘤细胞 总被引:3,自引:0,他引:3
用纯化的兔出血症病毒(rabbithaemorhagicdiseasevirus,简称,RHDV)免疫Balb/c小鼠。正如网络学说所指出的,从免疫鼠的杂交瘤细胞克隆中,不仅筛选出能分泌抗RHDV抗体(Ab1)的细胞克隆,同时也筛选出能分泌抗RHDV独特型抗体(anti-idiotypicantibodies,Ab2)的杂交瘤细胞,用抗原而不用单克隆抗体(Ab1)免疫,诱导产生抗独特型抗体(Ab2)是一种具有广阔的应用前景的新技术 相似文献
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用纯化的兔出血症病毒免疫Balb/c小鼠。正如网络学说所指出的,从免疫鼠的杂交瘤细胞克隆中,不仅筛选出能分泌抗RHDV抗体的细胞克隆,同时也筛选出能分泌抗RHDV独特型抗体的杂交瘤细胞,用抗原而不用单克隆抗体免疫,诱导产生抗独特型抗体是一种具有广阔的应用前景的新技术。 相似文献
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将用犬细小病毒(CPV)免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,用血凝抑制试验(HI)筛选,以有限稀释法克隆3次,得到6株分泌抗CPV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,其中4株分泌IgG_1,2株分泌IgM;6株杂交瘤细胞染色体数目介于96—103之间;在半年传代期间(45代),均能稳定地分泌McAb。将杂交瘤细胞注射BALB/C小鼠诱生腹水,其HI效价介于1:128—1:512之间,置-20℃保存1年,其效价不变。用交又HI法对2株单克隆抗体作特异性分析,该McAb只特异地与CPV发生反应,而不与猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)、水貂肠炎病毒(MEV)发生反应。 相似文献
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抗兔轮状病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
用小鼠骨髓瘤细胞与经兔轮状病毒免疫的BALB/c系小鼠脾细胞进行融合,融合成功率为22%。经间接酶联免疫吸附试验和斑点酶联免疫筛选杂交瘤细胞,阳性率为29%左右。对其中6株强阳性的杂交瘤细胞进行了亚克隆,获得高产亚克隆杂交瘤细胞,用BALB/c小鼠生产了腹水,鉴定后选取2株强阳性高效价的杂交瘤细胞,以ELISA阻断试验检验其分泌抗体的特异性,以直接ELISA测其敏感性,用琼脂双扩散试验鉴定类和亚类 相似文献
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将猪细小病毒(PPV)免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,用血凝抑制试验(HI)筛选,以有限稀释法克隆3次,得到5株分泌抗PPV单克隆抗体(McAb),选择抗体分泌较高的4F4、A4或E8进行较详细的研究,结果表明,其核内染色体数为93和87,抗体属性为IgG1,其中1株为K轻链,用交叉HI法对2株McAb作特异性分析,该McAb只特异地与PPV发生反应,而不与日本乙 相似文献
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为制备犬细小病毒(CPV)单克隆抗体,用F81细胞繁殖CPV,病毒液经二乙烯亚胺(BEI)灭活、纯化后免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经筛选获得2株分泌抗CPV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为F1和B6.F1和B6分泌的单克隆抗体Ig亚类均为IgG1;以F1和B6制备的腹水,经检测,间接ELISA效价均为1×105,免疫荧光效价分别为1:3200和1∶6400;F1和B6培养上清的抗体中和效价分别为1∶1024和1∶2048,血凝抑制效价分别为1∶2048和1∶4096;免疫印迹(Western-blotting)和抗原表位分析结果显示,F1和B6分泌的单克隆抗体可能分别针对CPV的空间表位和线性表位.2株分泌抗CPV单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立可进一步用于开发CPV特异性诊断制剂和治疗制剂. 相似文献
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刘长明 《中国预防兽医学报》1994,(3)
以纯化的兔出血症病毒(RHDV)免疫BALB/C鼠,应用杂交瘤技术获的了分泌抗RHDV单抗(McAb)杂交瘤细胞17诛。其中有3株杂交瘤细胞分泌单抗的ELISA效价为1:409600(腹水)、1:4096(上清);5株单抗具有血凝抑制活性。兔抗RHDV高免血清对17株McAb的ELISA抑制率都大于90%。5株McAb亚类为IgG_1,8株为IgG_20,4株为IgG_20。各株McAb与欧洲棕色兔病病毒无抗原交叉反应,也无沉淀反应特性。 相似文献
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利用抗兔出血症病毒(RHDV)的特异性单克隆抗体(McAb)建立了ELISA阻断试验用以检测血清抗体,并与血凝抑制(HI)和琼脂扩散试验(ID)进行了比较.结果ELISA阻断试验敏感性超过HI,更远胜于ID.具有灵敏、特异、准确等优点.适于大批血清样品的快速检测. 相似文献
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采用腹腔的接种1次脾内注射禽呼肠孤病毒(ARV)蛋白免疫小鼠,经3次融合后,共筛选8株分泌抗禽呼肠孤病毒(单克隆抗体杂交瘤细胞株,这8株McAb均可与ARVS1133株,FDO株发生反应,而与IBDV,MDV,EDS-76病毒不发生反应,经亚类鉴定,AE7,AF8,BD1,DH10,EE5为IgG1;AD6,CG4为IgC2a,AG7为IgG2b。腹水效价在10^3~10^5之间。 相似文献
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兔出血症病毒(RHDV)研究进展 总被引:6,自引:1,他引:5
兔病毒性出血症 (RHD)是由兔出血症病毒( RHDV)引起的一种高度接触传染性、急性、致死性传染病,以传染性极强、呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、淤血及出血性变化为特征,其发病率和致死率都很高,是兔的一种毁灭性传染病。目前所有已测的兔的品种(系)都表现出对该病的易感性,但在自然条件下, RHDV只感染年龄较大的家兔, 2月龄以下的仔兔自然感染时一般不发病。该病自 1984年春在我国江苏无锡、江阴等县市首先暴发后,迅速流行蔓延开来,迄今为止,包括台湾地区在内的所有省份都有 RHD的流行报道。此后朝鲜于 1986年开始… 相似文献
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分泌抗猪伪狂犬病病毒(北京株)单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
用纯化的猪伪狂犬病病毒免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合 ,经间接ELISA筛选,3次有限稀释法克隆,获得了2株能稳定分泌抗伪狂犬病病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株1H7和3B5,经鉴定两株单抗均为IgG1亚类、Kappa型轻链,杂交瘤细胞的平均染色体数为97,细胞培养液上清及腹水效价分别为1:1024、1:1024和1:10^8、1:10^7;1H7、3B5单克隆抗体不与猪繁殖-呼吸综合征病毒、猪温病毒、猪细小病毒发生交叉反应,显示良好的特异性,为进一步应用奠定了基础。 相似文献
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