H_2S在内毒素致肝损伤中的作用及CA的保护效应

为探讨气体信号分子硫化氢(H_2S)在内毒素(ET)致肝脏损伤中的作用及阳离子A(CA)的保护效应,本试验将72只健康大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、ET致病组、CA保护组,3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏作为检测样本,H.E染色观察肝脏病理损伤,并采用分光光度法检测肝脏中H_2S含量。结果表明:NS组肝脏组织未见异常,ET组出现微循环障碍与细胞变性坏死等病变,CA保护组则病理变化程度较弱,出现的时间较迟;ET能够使肝脏组织中H_2S水平显著升高,而CA保护组H_2S在肝脏组织中的含量都显著低于ET组。说明H_2S参与了ET致肝脏损伤的病理过程,而CA通过下调肝脏组织中H_2S的水平从而对ET的炎性损伤发挥了保护作用。     

H2S在内毒素致肝损伤中的作用及CA的保护效应

将72只健康大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、内毒素(ET)致病组、阳离子A(CA)保护组.3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏作为检测样本,HE染色观察肝脏病理损伤,并采用分光光度法检测肝脏中硫化氢(H2S)含量.结果显示,NS组肝脏组织未见异常.ET组出现微循环障碍与细胞变性坏死等病变,CA保护组则病理变化程度较弱,出现的时间较迟;ET能够使肝脏组织中H2S水平显著升高,而CA保护组H2S在肝脏组织中的含量均显著低于ET组.结果表明,H2S参与了ET致肝脏损伤的病理过程,而CA通过下调肝脏组织中H2S的水平从而对ET的炎性损伤发挥了保护作用.     

内毒素致肝细胞凋亡与Survivin蛋白表达的关系及阳离子A保护效应

72只SD大鼠随机分为对照组（Ⅰ组）、内毒素组（Ⅱ组）和CA保护组（Ⅲ组）。3组动物经相应处理后分别在第3、4、8、12h采集肝脏作为检测样本,用流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况,免疫组织化学染色技术检测Survivin蛋白的表达情况。结果显示,在4个时段中,Ⅱ组凋亡肝细胞百分比都极显著高于Ⅰ组（P〈0．01）;在3、12h,Ⅱ组极显著高于Ⅲ组（P〈0．01）,在4h,Ⅱ组显著高于Ⅲ组（P％0．05）;在8h,1I组肝细胞凋亡百分比呈上升趋势,Ⅲ组在3、4、8h3个时间点呈上升趋势,在12h有下降趋势。Ⅱ组Survivin的表达极显著低于Ⅰ组（P〈0．01）,且Ⅱ组一直呈减少趋势;Ⅱ组极显著少于Ⅲ组（P〈0．01）,Ⅲ组在3、4、8h这3个时间点呈下降趋势,在12h上升。结果表明,在内毒素血症中肝细胞凋亡与Survivin蛋白的表达呈负相关的关系,而cA则能明显上调Survivin在肝脏的表达水平,从而抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤有可能发挥一定的保护作用。     

内毒素血症中肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白表达的关系及阳离子A拮抗保护作用的研究

为研究内毒素血症中肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白表达的关系及阳离子A(CA)的拮抗保护作用,本研究将72只SD大鼠随机分为对照组、内毒素(ET)组和CA保护组。3组动物经相应处理后分别在第3 h、4 h、8 h和12 h采集肝脏样品,采用流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况、免疫组织化学染色技术检测Caspase-3蛋白的表达情况。结果显示,凋亡肝细胞百分比ET组极显著高于对照组和CA保护组,ET组肝细胞凋亡百分比呈上升趋势,CA保护组在3 h、4 h和8 h 3个时间点呈上升趋势,在12 h呈下降趋势。ET组Caspase-3表达极显著高于对照组和CA保护组。研究表明,在内毒素血症中肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白的表达呈正相关,而CA则能够明显下调Caspase-3在肝脏的表达水平,从而抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤发挥保护作用。     

NO在内毒素诱导肝细胞凋亡中的作用及阳离子A的保护效应

为研究内毒素（ET）诱导肝细胞凋亡的作用机制及阳离子A（CA）对肝细胞的保护效应，采用ET所致家兔内毒素休克的模型，分别在3、4、8、12h检测肝脏组织中一氧化氮（NO）水平的动态变化、肝细胞凋亡指数和肝细胞凋亡的形态学变化，并观察CA注射液对上述指标的影响。ET组中各时间段的肝组织中NO水平均显著升高（P〈0．01），随着NO水平的增加，肝细胞凋亡指数先上升，然后下降，最后又上升到最高值；肝细胞及肝脏组织的损害程度也与此类似。CA组的NO水平则明显降低（P〈0、05），肝细胞凋亡及病理组织学改变亦轻。提示NO参与内毒素休克的发病机制介导了肝细胞的凋亡，同时，在一定范围内又有保肝作用。而CA可有效地中和血循环中的ET，减少肝脏中过量NO的产生，减轻炎症反应及其对肝脏的损害，对内毒素休克有一定的防治作用。     

阳离子A对内毒素诱导兔自由基损伤的保护作用

将56只白兔随机分成3组Ⅰ组为正常对照组,共8只;Ⅱ组为内毒素(endotoxin,ET)处理组,共24只;Ⅲ组为阳离子A(cationA,CA)+ET组,共24只.Ⅰ组静注等量的生理盐水,Ⅱ组静注ET 300 μg/kg,Ⅲ组静注CA 200 mg/kg后,静注ET 300μg/kg.1、2、3、4、5 h后分别采集血液制备血浆样品.2、5 h捕杀Ⅰ组兔4只,Ⅱ、Ⅲ组兔各12只,迅速采集肝脏制备组织匀浆.检测血浆T-AOC、CAT活性和MDA含量,肝GSH、GSH-ST、GSH-Px活性.结果显示Ⅰ组各项指标均保持相对稳定;Ⅱ组MDA含量比Ⅰ组升高(P＜0.01),Ⅲ组MDA含量升高不显著;Ⅱ组T-AOC、CAT活性比Ⅰ组降低(P＜0.01),Ⅲ组显著高于Ⅱ组(1、2、3 h,P＜0.01;4、5 h,P＜0.05);Ⅱ组肝脏GSH和GSH-ST活性显著降低(P＜0.01),第5 h GSH-Px活性降低(P＜0.01),第2 h(P＜0.05);Ⅲ组GSH、GSH-Px(第5 h显著降低)、GSH-ST活性降低不明显.结果提示自由基参与了ET休克的病理过程,CA能有效地保护血浆和肝脏免受自由基的损伤.     

内毒素对兔红细胞膜磷脂含量的影响及阳离子A对其的拮抗效应

利用高效液相色谱法分别测定正常对照组（Ⅰ组）、内毒素组（Ⅱ组）和内毒素＋阳离子A拮抗组（Ⅲ组）中兔红细胞膜磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰丝氨酸（PS）和磷脂酰肌醇（PI）含量。结果显示，Ⅱ组中除PE在处理后0．5h没有明显变化外（P〉0．05），PC、PE、PS、PI含量在0，5、1、3、5、7h均低于Ⅰ组（P〈0.05，P〈0．01）；而Ⅲ组中除PS、PE和PI在处理后0．5h、PC在1h、PI在3h没有明显变化外（P〉0．05），整个时间段中上述4种磷脂的含量均高于Ⅱ组（P〈0．05，P〈0．01）。可见，内毒素能使兔红细胞膜磷脂含量降低，而阳离子A在一定程度上具有对内毒素的拮抗作用和对红细胞膜的保护效应。     

内毒素致兔红细胞膜ATP酶活性改变及阳离子A的保护作用

为观察内毒素(ET)致兔红细胞膜(ECM)ATP酶(ATPase)活性变化及阳离子A(CA)的保护作用.采用定磷法分别测定正常对照组(Ⅰ组)、内毒素组(Ⅱ组)和阳离子A拮抗组(Ⅲ组)兔ECM的3种ATPase活性.结果除Na+-K+-ATPase、Mg2+-ATPase活性在0.5 h时与Ⅰ组比较无显著差异(P＞0.05)外,Ⅱ组3种ATPase活性在3.0 h内均显著增高(P＜0.01,P＜0.05),而5,7 h全部下降(P＜0.01);与Ⅲ组比较中,Ⅲ组除1 h时Mg2+-ATPase的活性无显著差异(P＞0.05)外,3种ATPase的活性均显著增强(P＜0.05,P＜0.01).结果表明ET可使ECM上3种ATPase活性先增高后降低,而CA对膜ATPase活性有明显保护作用.     

SSCP检测内毒素致mtDNA基因突变及阳离子A的保护作用

将60只健康试验大鼠随机分为3组：正常对照组（A组）、ET处理组（B组）、CA＋ET处理组（C组）,运用PCR-SSCP技术对肝脏mtDNAtRNAcysTyr、COI基因片段一等基因进行了分析,同时运用分光光度计法对血清丙二醛的含量进行测定,观察ET致mtDNA的突变效应以及cA对该效应的保护作用。,结果发现,B组mtDNAtR—NA Cys-Tyr基因片段在第5238与5242碱基处发生了插入1个碱基T的插入突变,COI一基因片段发生T5322G和T5331G处置换点突变,其他各组无基因突变发生。B组血清MDA含量均明显高于其他二组（P〈0．05）、C组明显低于B组但高于A组（P〈0．05）。结果表明,ET可导致mtDNA基因发生突变,而cA对ET致基因突变具有保护效应。     

NO在内毒素诱导肝细胞凋亡中的作用及阳离子A的保护效应

为研究内毒素(ET)诱导肝细胞凋亡的作用机制及阳离子A(CA)对肝细胞的保护效应,采用ET所致家兔内毒素休克的模型,分别在3、4、8、12 h检测肝脏组织中一氧化氮(NO)水平的动态变化、肝细胞凋亡指数和肝细胞凋亡的形态学变化,并观察CA注射液对上述指标的影响.ET组中各时间段的肝组织中NO水平均显著升高(P＜0.01),随着NO水平的增加,肝细胞凋亡指数先上升,然后下降,最后又上升到最高值;肝细胞及肝脏组织的损害程度也与此类似.CA组的NO水平则明显降低(P＜0.05),肝细胞凋亡及病理组织学改变亦轻.提示NO参与内毒素休克的发病机制介导了肝细胞的凋亡,同时,在一定范围内又有保肝作用.而CA可有效地中和血循环中的ET,减少肝脏中过量NO的产生,减轻炎症反应及其对肝脏的损害,对内毒素休克有一定的防治作用.     

钙信号转导与缺氧诱发肉鸡心肌细胞c-fos和c-myc基因表达的关系

利用细胞培养、免疫组化、原位杂交、图像分析技术研究钙信号与缺氧诱发心肌细胞癌基因c-fos、c-myc表达的关系,进一步阐明钙信号转导与以右心肥大衰竭为特征的肉鸡腹水综合征(AS)的关系。结果显示,钙通道拮抗剂异搏安(V)、硝苯吡啶(N)、环孢霉素A(C)显著抑制缺氧引起的癌基因c-fos和c-myc mRNA的表达(c-fosmR-NA:常氧149.6±22.4;缺氧205.4±57.6,缺氧+V151.3±20.1,缺氧+N154.5±25.2,缺氧+C 166.5±22.1;c-myc mRNA:常氧155.2±25.7;缺氧197.4±26.2,缺氧+V 160.5±19.4,缺氧+N 171.3±25.4,缺氧+C158.9±23.6)。同时显著抑制缺氧引起的癌基因c-fos和c-myc蛋白的表达(c-fos蛋白:常氧159.1±37.1,缺氧240.3±49.6,缺氧+V 165.2±52.2,缺氧+N 166.5±49.8,缺氧+C 190.8±33.6;c-myc蛋白:常氧149.6±24.9,缺氧236.3±55.4,缺氧+V178.9±42.1,缺氧+N174.4±36.3,缺氧+C 16...     

环境低温对肉鸡肺小动脉壁c-mycmRNA表达的影响

对环境低温诱发肉鸡肺动脉高压综合征(Pulmonary hypertension syndrome,PHS)过程中肺小动脉壁c-mycmRNA的表达变化进行了研究,从而初步确定原癌基因c-myc在环境低温诱发肉鸡PHS过程中的参与作用,为肉鸡PHS发生机制的研究提供基础。120只雄性AA商品代肉鸡15日龄时随机分为对照组((22±1.5)℃)和低温组((11±2)℃)。15～50日龄,每周每组随机取6只,肺组织做石蜡切片,应用原位杂交染色法进行c-myc mRNA杂交,并结合图像分析法,测定环境低温诱发肉鸡PHS过程中肺小动脉壁原癌基因c-myc mRNA的表达情况。结果显示,低温组肉鸡PHS发生率(15.00%)极显著高于对照组(1.67%)(P<0.01);低温组肉鸡肺小动脉壁c-mycmRNA的表达从22日龄开始较对照组明显增加(P<0.05),从29～50日龄较对照组极显著升高(P<0.01)。结果表明,环境低温明显诱发了肉鸡肺小动脉壁c-myc mRNA的表达,且c-myc mRNA的表达参与了环境低温诱发的肉鸡PHS的发生发展。     

维生素A对动物基因表达的调控

本文主要综述了维生素A对调节视力的视蛋白基因的表达调控,时糖元异生起关键作用磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)基因的调控,多不饱和脂肪酸合成中△5-去饱和酶基因以及对与生长有关的类胰岛素生长因子(IGF)基因的调控,为研究日粮中维生素A添加对动物营养机理的研究提供理论依据.     

原癌基因c-myc在塔里木马鹿茸不同生长期的表达

为探讨原癌基因c-myc对鹿茸生长的调控作用,选择3头成年塔里木马鹿生长期为30、60d的新鲜鹿茸,剖分成茸皮层、间充质细胞层、成软骨细胞层和软骨细胞层。首先用2种免疫组化的方法进行基因表达定位,然后通过荧光定量PCR技术对不同组织基因表达定量进行分析。结果显示：该基因在茸皮的毛囊内根鞘、毛母质和皮脂腺呈阳性反应,在动脉血管的环形平滑肌、真皮乳头层与表皮基部连接的基底层呈阳性反应。在静脉血管、神经和其他附属器反应均呈阴性。定量分析结果表明c-myc基因在不同生长阶段不同组织层均有表达。茸皮层从生长期30～60d,c-myc表达下调,而在其他3个组织中均上调表达;同一生长期茸皮和软骨层的表达量均高于间充质细胞层和成软骨层（P〈0.05）;不同生长期30、60d组织间基因的表达没有显著的变化。研究结果表明,c-myc基因在鹿茸快速生长期参与了茸皮的增殖与分化;在软骨组织中高表达特别是生长后期,说明原癌基因c-myc对马鹿茸软骨发育及骨形成有着一定调控作用。     

热应激对奶牛血液中内毒素含量和抗氧化指标的影响

选用16头健康的中国荷斯坦奶牛,随机分为两个处理（夏季组和冬季组）,每个处理8个重复,每个重复1头牛。当夏季组奶牛牛舍温湿度指数（THI）〉72的时间连续达到15d,冬季组牛舍THI〈72的时间连续达到15d时,颈静脉采血15mL制备血清,检测血清中内毒素、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性,以及丙二醛（MDA）的含量。结果表明：夏季热应激可导致奶牛血清内毒素、MDA含量极显著升高,SOD和GSH-Px活性极显著和显著（P〈0.05）下降。     

内毒素对规模化猪场仔猪腹泻的危害

规模化猪场新生仔猪腹泻的发病率逐年提升,传统治疗方法应用抗生素杀死大量细菌的同时也释放大量的内毒素,导致仔猪腹泻治疗效果较差.不仅如此,母猪体内内毒素也通过胎盘屏障和乳汁传递给胎儿,增加仔猪腹泻的发病率,降低其免疫力而诱发其他致病性微生物对仔猪的感染能力.进而增加了仔猪腹泻的治疗难度,成为影响新生仔猪健康养殖的"瓶颈"...     

Alterations of endotoxin distribution across different biofluids and relevant inflammatory responses by supplementing L-theanine in dairy cows during heat stress

The present trial was performed to reveal the regulatory effects of L-theanine on the levels of lipopolysaccharide (LPS) endotoxin within different biofluids, as well as relevant inflammatory responses of dairy cattle under heat stress conditions. Thirty lactating Chinese Holstein dairy cattle (189 ± 47 d in milk, and 2 ± 1 parities) were allocated in a completely randomized design to each of 3 dietary treatments: the control (CON, 0 g/d per cow L-theanine), the low L-theanine dosage treatment (LL, 16 g/d per cow L-theanine), and the high L-theanine dosage treatment (HL, 32 g/d per cow L-theanine). This trial consisted of 38 d (7 d for adaption and 31 d for data and sample collection), and sample collection for rumen liquid, blood plasma or serum, and milk were conducted on the d 27 and 38, respectively. Dairy cattle were constantly exposed to environmental heat stress during this experiment according to the recorded temperature-humidity index (THI). In the LL treatment, LPS concentration in rumen liquid was higher (P < 0.05), whilst LPS densities in plasma and milk were lower (P < 0.05) than those of the CON. Supplementing L-theanine at 2 dosages both significantly lowered (P < 0.05) the level of interleukin (IL)-1β in the serum. Results of the present study suggested that L-theanine could be a promising additive in reducing the detrimental effects of heat stress on dairy cows, and L-theanine supplementation at 16 g/d per cow is preferred because it reduced the LPS translocation into the peripheral blood and LPS accumulation in the milk, as well as mitigated LPS-induced inflammatory reactions in dairy cows during heat stress. Further studies are necessitated to investigate the underlying mechanisms of L-theanine in LPS alteration and inflammation alleviation.     

内毒素诱生自由基致兔血循环系统损伤及CA对其影响

将56只健康白兔随机分组:正常对照组( 组)8只,ET处理组( 组)、CA保护组( 组)各24只,第1、2、3、4和5小时分别采集血液制备血浆样品,检测血浆T-AOC、T-SOD活性和MDA含量,第2和第5小时捕杀并迅速采集心脏制备组织匀浆,检测心脏GSH、GSH-ST、GSH-Px活性,研究内毒素(endotoxin,ET)诱导休克兔产生自由基对血浆和心脏的损伤及阳离子A(cationA,CA)对其影响。结果表明: 组各项指标均保持相对稳定; 组MDA含量比 组升高(P<0.01),T-AOC、T-SOD活性比 组降低(P<0.01),而 组的MDA、T-AOC、T-SOD显著高于 组(P<0.05);除心脏GSH-Px活性第5小时降低不明显外, 组GSH、GSH-Px和GSH-ST活性显著降低(P<0.01), 组比 组GSH、GSH-Px、GSH-ST活性高(P<0.01)。结果提示:CA能减轻ET诱生自由基所致的过氧化损伤,有效缓解内毒素引起的血液循环系统毒性损伤。