牛大力茎段组织培养污染率控制方法的初步研究

最近几年,广东和广西民间大量使用牛大力做药膳,导致牛大力野生资源渐渐枯竭。而可以通过组织培养技术解决此问题,组织培养技术可以使牛大力大量繁殖。已有相关报道显示,利用组织培养快速繁殖牛大力已成为现实。在对茎段进行诱导组织培养中,褐化现象十分常见,而阻碍研究进展进程的另一大因素则是高污染率。针对该问题,对牛大力茎段组织培养污染率控制的方法进行了初步研究,现报道如下。     

牛大力组织培养技术研究

本试验通过组织培养手段,以牛大力种子为材料,对外植体诱导及无菌组织培养进行了尝试,以期获得牛大力外植体诱导、增殖和生根的适宜培养基和培养条件。结果表明,消毒方式为75%酒精消毒30 s+0.1%氯化汞消毒15 min,外植体诱导培养基为改良1/2 MS+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.15 mg/L+益培灵0.20 g/L,增殖培养基为改良MS+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L+6-BA 0.6 mg/L+NAA0.20 mg/L+益培灵0.10 g/L,生根培养基为改良1/2 MS+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L+IBA 1.5 mg/L+ABT 1 1.5 mg/L+益培灵0.05 g/L,较适宜牛大力组织培养。     

柱花草茎段组织培养研究

以‘热研2号’柱花草茎段为外植体,研究不同激素种类及组合对试管苗诱导、增殖和生根的影响。结果表明:将带芽茎段接种在MS+6-BA 5.0 mg/L+GA30.5 mg/L的培养基中腋芽诱导率最高可达90%;最佳不定芽增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其分化率达100%;最佳生根培养基为MS+IBA 1.0 mg/L+IAA1.0 mg/L。综上所述,该研究结果改变了丛生芽的产生途径,缩短了分化时间,提高了增殖速度,是快速繁殖柱花草苗的有效方法。     

药用植物刺山柑茎段组织培养研究

以药用植物刺山柑初秋茎段为外植体,研究了不同灭菌时间对刺山柑无菌外植体建立的影响及不同激素、不同浓度组合对刺山柑丛生芽的诱导、增殖、壮苗和生根的影响.结果表明:外植体灭菌采用0.1;升汞消毒8 min效果最佳,其污染率和死亡率分别为5.6;和6.3;;诱导丛生芽的最适培养基为MS+6-BA 0.6 mg/L,其侧芽萌发率可达90;;增殖的最佳培养基为MS+6-BA 0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,其增殖倍数可达到4.5倍;壮苗培养基以MS+NAA 0.2 mg/L+GA3 0.2 mg/L效果较好,长势比较旺盛,平均株高、平均芽数均较高;诱导生根的最佳培养基为MS+IBA 0.5 mg/L+0.1;活性炭,生根率达65;,基部几乎无愈伤,且根数较多.     

实生核桃茎段的组织培养研究

以室内实生核桃苗的茎段为试材，以MS培养基为基本培养基，适当添加植物生长调节剂，对核桃纽织培养的一系列影响因子进行了研究。结果表明，适宜于室内实生核桃组织培养的各项因子分别为：最佳外植体取材时间为5月～6月份：初代培养培养基为MS＋琼脂5g／l＋蔗糖30g／l；继代培养基为Y．S＋BA0.5＋IBA0.01＋琼脂5g／l＋蔗糖30g／l，核桃芽苗在增殖过程中的继代周期以28d～30d为宜；生根培养基为1／2MS＋IBA0.5＋琼脂5g／l＋蔗糖30g／l。     

大叶黄杨带腋芽茎段组织培养研究

以大叶黄杨带腋芽茎段为材料,以MS和1/2MS为基本培养基,进行组织培养研究。结果表明:以pH值6.2的MS+6BA2.0mg/L为培养基,用浓度0.1%升汞溶液消毒大叶黄杨带腋芽茎段5min,其试管苗生长良好,成活率可达93%;生根培养基采用1/2MS+NAA1mg/L+0.5%活性炭,生根率可达95%。     

草莓茎段组织培养快繁技术的研究

草莓(ＦｒａｇａｒｉａａｎａｎａｓｓａＤｕｃｈ)为蔷薇科(Ｒｏｓａｃｅａｅ)蔷薇亚科(Ｒｏｓｏｉｄｅａｅ)草莓属,又名大果草莓,多年生草本植物,高10～30ｃｍ,匍匐茎纤细,节间长,节上长不定根,掌状三出复叶,聚伞花序,花瓣白色,聚合瘦果,花托肉质多汁,果肉鲜红色至淡红色,花期4～5月,果熟期5～7月。草莓是一种经济价值较高的天然高档食品,除供鲜食外,还可加工成罐头、酱、酒、汁等制品,全国各地都在积极引种,生产中常用扦插的方法来繁殖,但由于插穗来源不足,繁殖系数低等原因,不能大面积、大规模育苗,为加速草莓的迅速繁殖及品种换代,推广…     

红瑞木茎段组织培养技术研究(英文)

以红瑞木茎段为外植体,研究了其组织培养技术。结果表明:适合红瑞木芽启动培养的培养基为MS+BA0.5 mg·L~(-1)+IBA0.5 mg·L~(-1),诱导率可达93%;增殖培养基以MS+BA0.5mg·L~(-1)+IBA0.3 mg·L~(-1)为最佳,增殖系数可达4.15;生根诱导的最适培养基为1/4MS+IBA0.05 mg·L~(-1),生根率可达90%;生根苗在温室条件下成活率可达80%以上。     

蓝玉簪龙胆茎段的组织培养技术

采用西藏著名野生花卉蓝玉簪龙胆茎段为组织培养材料。通过多次试验后确定,蓝玉簪龙胆的启动培养中适宜的培养基为ＭＳ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ．＋ＢＡ０．４～０．５ｍｇ／Ｌ,或者为ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ;继代培养阶段的适宜培养基为ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ;生根阶段的适宜培养基为１／２ＭＳ＋ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ。为蓝玉簪龙胆在组培条件下大量繁殖     

南方红豆杉茎段组织培养

采用带芽嫩枝茎段为外植体直接诱导植株,研究南方红豆杉组织培养条件.结果表明:DCR+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.8mg/L适合诱导南方红豆杉的芽;1/2MS+NAA 0.1 mg/L可以进行南方红豆杉根的诱导.将诱导出高约2 cm健壮小苗转入DCR+NAA 0.1 mg/L培养基诱导生根,45天左右有根长出,待根长约0.5 cm时,移栽至泥炭细沙混合培养基质中,在温度25℃、65%以上湿度下栽培30天左右,逐渐加大光照强度,植株成活率可达57.3%.     

牛大力种子组培快繁技术研究

[目的]研究牛大力组织培养与快速繁殖技术。[方法]以牛大力种子为外植体,采用以芽繁芽途径,比较3种不同种源牛大力种子无菌发芽率、继代增殖、生根培养的表现差异。[结果]以MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L为诱导培养基,种子无菌发芽率分别为98.23%、92.13%和95.01%;以改良MS+6-BA 0.6 mg/L+IBA 0.3 mg/L+KT 0.2 mg/L为继代增殖培养基,添加半胱氨酸8 mg/L,FeSO_4·7H_2O加至MS用量的1.2倍,增殖系数分别达5.57、3.20、5.30;以1/2MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 1.5 mg/L、1/2MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 3.0 mg/L、1/2MS+NAA 1.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L为生根培养基,生根率分别达78.00%、67.33%、70.33%;生根苗移栽在V黄心土∶V细河沙∶V泥炭土=8∶1∶1基质中培育60 d后,成活率分别达94.00%、85.43%和89.97%。采用控根容器培育大苗,可实现育苗与种植同步。[结论]该研究为牛大力种苗快速繁殖及产业化生产提供科学依据。     

牛大力种子发芽研究

［目的］为牛大力种子检验和种子质量标准的制定提供参考。［方法］分别进行不同种子处理在同一光照培养箱中的发芽试验和不同基质种子发芽试验,研究不同种子处理及河沙、赤红壤和石灰土等不同萌发基质对牛大力种子萌发的影响。［结果］清水浸种为较好的牛大力种子处理,种子平均发芽率达61.25％;其次为40℃水浸种,种子平均发芽率为59.75％;而磨伤后清水浸种,种子平均发芽率仅42.50％;不磨皮、不浸种的对照组种子平均发芽率仅35.50％。河沙为较好的牛大力种子萌发基质,播种后35d就开始发芽,种子平均发芽率达55.00％;其次为石灰土,播种后38d开始发芽,种子平均发芽率达43.50％;而赤红壤播种后40d陆续发芽,种子平均发芽率仅37.00％。［结论］牛大力种子直接用清水浸种处理后发芽效果较佳;用河沙作萌发基质可以得到较好的发芽效果。     

药用植物牛大力组织培养初探

以牛大力幼嫩茎段为外植体,采用0.1%HgCl2不同处理时间对外植体进行灭菌;以MS为基本培养基,探讨不同浓度6-BA（2.0、2.5 mg/L）和NAA（0.2、1.0 mg/L）对无菌外植体愈伤组织和芽的诱导效果;以1/2MS为生根培养基,分别附加不同浓度NAA（0～2.5 mg/L）和IBA（0～2.5 mg/L）,探讨对生根培养的效果。结果表明,0.1%HgCl2处理15 min,外植体褐化率和污染率较低;MS培养基中添加不同浓度6-BA和NAA组合均能诱导牛大力茎段产生愈伤组织,但以添加1.0mg/L NAA的愈伤组织诱导率最高;添加NAA和6-BA可诱导牛大力茎段上的腋芽萌动再生,但最高出芽率仅78.6%;再生芽的适宜增殖培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L NAA,培养30 d,增殖倍数可达4～5倍;在培养基1/2MS＋NAA 2.5mg/L＋IBA 2.5 mg/L中培养,其生根率可达66.7%;经过炼苗,移栽到菜园土和河沙（3∶1）的混合基质中,30 d后试管苗的移栽成活率可达85%以上。     

牛大力恒温保湿催芽育苗技术

从种子采收、贮存、浸种等方面介绍了牛大力恒温保湿催芽育苗技术。采用该技术,牛大力种子催芽效果好,可以实现产地采种、异地育苗,克服非产地育苗因早春气温偏低出苗延迟的问题。同时,结合轻基质无纺布育苗容器杯点播育苗发芽率高,且出圃合格苗率较高。     

牛大力多糖含量的测定

[目的]测定牛大力多糖含量,为牛大力抗疲劳活性研究提供依据。[方法]采用苯酚–硫酸法测定牛大力醇提物中水溶性成分多糖的含量。[结果]该试验方法在1～9μg/ml浓度范围内具有线性关系,稳定性和精密度良好,加样回收率为103.4%,测得牛大力多糖含量为62.3%。[结论]牛大力多糖作为抗疲劳活性的主要成分之一,具有进一步研究的价值。     

不同种源和修剪方式对牛大力叶绿素荧光参数的影响

[目的]研究不同种源和不同修剪方式的牛大力叶片叶绿素荧光参数的影响。[方法]选择成熟的牛大力叶片通过暗适应后,采用MINI-PAM测定初始荧光(F0)、最大荧光(Fm)、PSII光量子效率(Yield)和光合电子传递速率(ETR)等叶绿素荧光参数。[结果]牛大力不同种源间的F0和Fm差异不显著,其中种源7猪仔笠的光合效率稍高于其他几个种源。所有种源在广东气候条件下均能正常生长。不同修剪方式与自然生长的牛大力叶片叶绿素荧光参数下降不明显,不降低光合作用。F0和Fm在各修剪方式中比较接近。[结论]控制高度1 m,保留主茎蔓1条和侧蔓4条的修剪方式与自然调控的牛大力叶片的光合能力相当。种源7猪仔笠的光合效率稍高于其他几个种源。     

四季杨茎段组织培养初步研究

[目的]为四季杨苗木繁育与生产提供参考,满足道路绿化和短周期工业用材对四季杨苗木的需求。[方法]以四季杨茎段为材料,在MS培养基上添加不同浓度的6-BA和NAA,研究不同处理对外植体芽分化的影响。[结果]6-BA和NAA浓度分别以2.0mg/L和0.2mg/L对外植体不定芽的诱导率效果最好,且在MS＋2.0mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA培养基上外植体芽分化率最高,可达到60.2%,是四季杨茎段组织培养初代培养基筛选出的最佳培养基配方。[结论]适宜的植物生长调节剂浓度对提高四季杨外植体启动率有重要影响。     

牛大力速溶茶的研制加工

分析了原料粉碎细度、煮制时间、醇沉时乙醇含量等因素对牛大力速溶茶原料浸提液制备的影响。结果表明:牛大力、千斤拔和五指毛桃等原料粉碎成10目的细粉状,煮制60 min,醇沉时乙醇含量为50%~70%,静置12 h,麦冬用15倍重量的沸水煮制45 min,菊花用20倍用量的软化水在80℃的温度下浸提45 min,浓缩,调配,喷雾干燥得成品牛大力速溶茶。通过成品各指标的检测表明,牛大力速溶茶色、香、味俱佳,口感好,味道淳厚,并无重金属、有害物质、微生物超标的现象,说明牛大力速溶茶原料选取安全合理,配比科学,其加工工艺具有一定的安全性,稳定性和成熟度,为其开发应用提供了理论依据。     

牛大力花苞、花朵和果荚脂溶性成分GC-MS分析

采用索氏提取法和溶剂萃取法分别提取牛大力(Millettia speciosa Champ.)花苞、花朵和果荚的脂溶性成分,经GC-MS分析,从花苞脂溶性成分中鉴定出24个化合物,占总脂溶性成分的88.31%,主要为烷烃和烯烃类(52.00%)、醇类(17.46%)化合物;从花朵脂溶性成分中鉴定出29个化合物,占总脂溶性成分的91.38%,主要为烷烃和烯烃类(60.64%)、醇类(17.178%)化合物;从果荚脂溶性成分中鉴定出32个化合物,占总脂溶性成分的80.01%,主要为烷烃和烯烃类(32.56%)、苯基及其衍生物类(22.46%)、脂肪酸类(12.54%)化合物,其中6个化合物为共有成分。     

大岩桐的组织培养和快繁技术研究

以大岩桐新生嫩叶为外植体进行了植株再生和快速繁殖研究.结果表明:诱导不定芽以MS 3%蔗糖 0.5%琼脂 0.05 mg/L NAA 0.50 mg/L 6-BA效果最好,分化率达100%;增殖培养以MS 3%蔗糖 0.5%琼脂 0.10 mg/L 6-BA 0.10 mg/L NAA培养基增殖倍数最大,为6.5倍;诱导不定根,在1/2MS 1.5%蔗糖 0.5%琼脂 0.10 mg/L NAA培养基上生根率为100%,达到植株再生和快繁的目的.