不同采收期丹参中丹酚酸B的含量测定

[目的]考察不同采收期丹参中丹酚酸B的含量。[方法]采用高效液相色谱法（HPLC）,对不同采收期丹参中丹酚酸B含量进行测定、分析。[结果]结果表明,不同采收期丹参的丹酚酸B含量间有显著差异,尤以9、10月份最高,4、5月份次之。[结论]在丹参的加工生产中应注意不同的采收季节对其质量的影响。     

药用植物丹参中丹酚酸B的提取工艺优化研究

[目的]建立一种高效、经济的丹酚酸B的提取工艺。[方法]对提取过程中涉及的主要影响因素采用正交试验方法进行分析,确定各自的影响程度和最佳水平。[结果]丹酚酸B的最佳醇提条件为：将药材粉碎成粗颗粒,投料,不经浸泡,用浓度20%乙醇于100℃回流提取。[结论]该方法提取效率高,重现性较好。     

响应面优化超声波-酶法提取丹参中丹酚酸B的工艺研究

利用响应面分析法对丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)中丹酚酸B的超声波协同酶法提取工艺进行优化。在单因素试验基础上,选取酶解时间、酶解温度、纤维素酶用量和酶解p H进行4因素3水平的Box-Behnken中心组合研究。通过响应面分析法对提取条件进行了优化,确定超声波协同酶法提取丹参中丹酚酸B的最佳工艺为酶解时间54 min,酶解温度49℃,纤维素酶用量2.70 mg/g、酶解p H 4.4。在该条件下,丹参中丹酚酸B的提取量为4.83 mg/g。     

高效液相色谱法测定丹参注射液中丹酚酸B含量

目的:通过高效液相色谱法(HPLC)测定丹参注射液中丹酚酸B的含量,为其质量控制提供可靠方法依据。方法:丹酚酸B标准溶液作为外标溶液,采用高效液相色谱法测定丹酚酸B的含量。结果:丹酚酸B在0.0986~0.9860mg/mL范围内与峰面积具有良好线性关系。结论:高效液相色谱法测定丹参注射液中丹酚酸B的含量,范围广、分辨率高、数据处理速度快、结果准确、误差小,可作为测定丹参注射液水溶性成分质量的方法。     

丹参酮ⅡA和丹酚酸B在丹参根组织中的分布特征研究

对生长在粘土、沙土和马骨石土上1~2年生丹参不同根组织的分析表明,丹参酮ⅡA主要分布在木栓层,丹酚酸B分布在木质部和韧皮部.1年生丹参根木栓层的丹参酮ⅡA含量较2年生丹参为高,而1年生丹参根木质部和韧皮部中的丹酚酸B含量与2年生丹参没有显著差异.粘土地栽培丹参根中的丹参酮ⅡA含量较沙土、马骨石土地栽培丹参为高,但不同类型土壤上丹参根中丹酚酸B含量的差异不显著.     

丹参素和丹酚酸B对骨髓基质干细胞成骨与成脂分化的影响

目的探讨丹参素和丹酚酸B对大鼠骨髓基质干细胞(MSCs)成骨与成脂分化的影响。方法分离纯化大鼠MSCs,观察不同浓度丹参素和丹酚酸B对成脂分化率、脂蛋白脂酶mRNA表达和碱性磷酸酶(ALP)活性影响。结果丹参素和丹酚酸B处理明显减少MSCs中脂肪细胞数、油红染色比色值和脂蛋白脂酶表达,但增加ALP活性(P<0.01)。结论丹参素和丹酚酸B均能抑制大鼠MSCs成脂分化,并促进成骨分化。     

市售9批丹参药材中丹参酮Ⅱ_A和丹酚酸B含量测定

目的比较市售9批丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量差异。方法按照2010年版《中华人民共和国药典》要求,采用HPLC测定9批市售丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量。结果丹参酮ⅡA含量6号(安徽野生)样品最高,为0.309 3%;8号(山东栽培)样品最低,仅为0.044 7%。丹酚酸B含量9号(山东野生)样品最高,为4.410 0%;2号(四川栽培)样品最低,为3.533 3%。结论目前市场上丹参质量差异很大,建议加强对丹参药材种植的规范化管理。     

大孔吸附树脂纯化丹酚酸B的工艺研究

[目的]利用大孔吸附树脂优化丹参中高纯度丹酚酸B的纯化工艺。[方法]大孔吸附树脂纯化考察包括树脂类型的选择、上样量、除杂溶剂、洗脱溶剂等多方面因素。[结果]确定丹参中丹酚酸B的纯化树脂为大孔吸附树脂HP300、上样量为1∶2(丹参∶树脂)、2BV水除杂、3 BV的40%乙醇洗脱。收集40%乙醇洗脱部分回收溶剂喷雾干燥,丹酚酸B纯化物中丹酚酸B的含量为73.6%、68.9%。[结论]大孔吸附树脂优化的纯化条件为丹酚酸B进一步研究开发奠定了实验基础。     

丹参主要农艺性状与丹参酮ⅡA、丹酚酸B的相关性及通径分析

采用田间小区试验,对27个丹参品系的形态学性状与丹参酮ⅡA、丹酚酸B的含量进行相关性及通径分析。结果表明,丹参酮ⅡA含量与花轮数、根条数呈显著正相关。丹酚酸B含量与分枝数呈显著正相关,与花枝数呈极显著正相关。可见,花轮数、根条数和分枝数可作为高丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量丹参品种选育的重要指标。     

丹酚酸B调节胆固醇代谢的研究

[目的]研究丹酚酸B对血液胆固醇代谢的调节作用。[方法]选取SD大白鼠,建立高脂模型,进行丹酚酸B干预试验,测定大鼠血液及粪便胆固醇与胆汁酸含量。[结果]丹酚酸B干预的大鼠血液中胆固醇含量显著低于高脂模型组大鼠,粪便中胆固醇及胆汁酸含量显著高于高脂模型组。[结论]丹酚酸B主要通过促进粪便胆固醇与胆汁酸的排泄降低血液中胆固醇。     

丹酚酸B重要中间体的合成与表征

［目的］探讨二氢苯并呋喃衍生物的人工合成及其影响因素。［方法］以异香兰醛为原料,经过6步反应最终合成二氢苯并呋喃衍生物。［结果］在第1步反应中产物2溴3羟基4甲氧基苯甲醛的收率为93.2%。在第2步反应中产物2溴3甲酰基6甲氧基苯乙酯的收率为96.3%。在第3步反应中产物缩醛的收率为97.7%。在第4步反应中,以溴代苯和丙二酸二乙酯为原料,乙醇钠作强碱,CuBr作催化剂,六甲基磷酰三胺（HMPA）作溶剂,在氮气的保护下加热回流12h,产物取代苯丙二酸二乙酯的收率为39.1%。在第5步反应中产物1羟基2甲氧基6甲酰基苯乙酸的收率为95.6%。在第6步反应中产物二氢苯并呋喃衍生物为淡黄色固体,收率为65.2%,熔点为159-162℃。［结论］该研究为丹酚酸B及其类似物的合成奠定了理论基础。     

四川道地药材丹参适宜干燥加工方式的优选研究

目的 探索出最适宜川产道地药材丹参的干燥加工方法。方法 针对丹参摊晾时间、烘烤温度、烘烤时间以及每次烘烤后摊晾时间四个因素设置了四因素三水平正交实验设计(处理T1-T9),加上鲜品按照不同温度直接烘干(处理T10-T12)、鲜品经过摊晾12小时再进行烘干和直接阴干(处理T13-T16)共设置16个处理,研究不同的干燥加工方式对丹参主要化学成分丹酚酸B和丹参酮类含量的影响。结果 不同的加工方法对于丹参的水溶性成分丹酚酸B含量有显著的影响,以丹参鲜品通过40℃烘干的初加工工艺最佳;直接阴干处理对于丹参酮类含量的保存更有利。结论 从药效成分的保留、节约成本等方面综合考虑,四川丹参的现代产地初加工方法采用低温(40-50℃)烘干方法较为适宜。     

外源激素对丹参愈伤组织诱导和有效成分含量的影响

以丹参(S a lv ia m iltiorrh iza)无菌苗的叶为外植体,接种于附加2,4-D、NAA、6-BA及其组合的M S固体培养基上,研究了外源激素对愈伤组织的诱导及有效成分含量的影响。结果表明:单独使用3种外源激素在一定浓度范围内均能诱导外植体产生愈伤组织;2,4-D对丹参愈伤组织的生长有促进作用,但当2,4-D的浓度在4 m g/L以上时,对愈伤组织的生长有抑制作用;配合使用外源生长素和细胞分裂素,能获得出愈率高、生长快、质量好的愈伤组织;外源激素的适宜组合为2,4-D 2.0 m g/L 6-BA 1.0 m g/L;愈伤组织中丹酚酸B的含量随培养时间的延长呈下降趋势。     

中药材丹参中农药多残留量SPE-CGC检测方法研究

建立了中药丹参中12种农药多残留量的气相色谱分析方法。样品以丙酮石油醚(体积比为6∶4)混合溶剂提取,固相萃取法(SPE)净化、富集,在SPB 5弹性石英毛细管柱程序升温条件下分离样品,GC-ECD检测丹参中12种农药残留量。该方法的线性范围为0.01~10 mg.L-1,线性相关系数为0.992 2~0.999 7,最低检出限为0.01~0.05 mg.kg-1,加样平均回收率为76.8%~104.0%。     

基于高通量转录组测序初步揭示丹参根和叶中丹参酮和丹酚酸含量差异的分子机制

丹参的药用部位为干燥根及茎,叶片不作为药用部位。为了解析丹参不同组织部位药效的差异,本研究使用Illumina高通量测序平台完成丹参药用部位根和非药用部位叶的转录组测序和功能注释,分析比较了根和叶中的差异表达基因,并进行基因的深度挖掘。本研究共获得54.17 Gb Clean Data,各样品Clean Data均达到8.29 Gb以上,Q30碱基百分比在94.37%以上。共检测到表达基因32700个,其中已知基因25607个,新基因7093个;表达转录本共56230个,其中已知转录本24627个,新转录本31603个。根和叶中差异表达基因有6959个,其中3265个基因上调表达,3694个基因下调表达。对丹参酮生物合成通路(二萜代谢通路map00904)和丹酚酸生物合成通路(苯丙烷代谢通路map00940)上差异基因分析,分别获得2个差异表达的PAL基因和2个差异表达的CPS基因,这些差异表达基因可能与丹参酮、丹酚酸主要在丹参根中积累有关。本研究结果为参与丹参酮和丹酚酸生物合成功能基因的挖掘、药效物质次生代谢途径解析提供了丰富的信息。     

丹酚酸B对缺氧复氧诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用机制研究

目的 观察丹酚酸B（Sal B）对H9c2心肌细胞缺氧复氧（hypoxia-reoxygenation,H/R）损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法 首先构建H9c2心肌细胞缺氧复氧模型,采用噻唑蓝（MTT）法研究丹酚酸B与H9c2心肌细胞活力的量效关系,确定丹酚酸B的保护作用,给药方式为预给药。实验分为正常对照组、丹酚酸B组、模型组（H/R组）、H/R+丹酚酸B组,分别检测各组乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、活性氧簇（ROS）以及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）的含量变化。Western印迹检测添加丹酚酸B对Akt磷酸化的影响,添加Akt抑制剂LY294002加以比较。结果 与正常对照组相比较,模型组LDH、MDA、ROS以及Caspase-3含量水平显著升高（P<0.05）,SOD、GSH-Px以及CAT含量水平显著降低（P<0.05）;与模型组相比,丹酚酸B能够显著提高SOD、GSH-Px以及CAT含量水平（P<0.05）,显著降低LDH、MDA、ROS以及Caspase-3含量水平（P<0.05）。Western印迹结果显示与正常对照组相比较,模型组Akt磷酸化水平显著降低（P<0.001）,相对于模型组丹酚酸B能够显著提高Akt的磷酸化水平（P<0.01）,而这种保护作用能被LY294002所阻断（P<0.01）。结论 丹酚酸B对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤具有保护作用,其机制可能与磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K/Akt）通路相关。     

HPLC-ELSD法测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量

[目的]为了建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量的方法.[方法]采用ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1％甲酸(B)为流动相梯度洗脱,以蒸发光散射检测器检测绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙.[结果]绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙的回归方程分别在3.00-6.40,4.24-9.33,0.40-2.00 μg的质量范围内线性关系良好,R2分别为0.999,0.993,0.999.[结论]该方法操作简便、结果准确,专属性强,分离效果和重现性好,可有效缩短总分析时间.为较全面控制山银花药材的质量控制提供了简便可靠的方法.