旋毛虫不同株同工酶比较的研究

本文对７株旋毛虫６种同工酶进行了分析比较，各株旋毛虫原始虫科分别来自哈尔滨，长春，天津，河南邓县，新野，云南保山及西安。除长春株畜主为犬外，其余均为猪。采用ＩＥＦ电泳，分别显示６种酶：ＧＰＩ，ＰＧＭ，Ｇ６ＰＤＨ，ＭＤＨ，ＡＬＡＴ及ＡＳＡＴ。结果长春犬株与哈尔滨猪株在ＧＰＩ，ＰＧＭ，Ｇ６ＰＤＨ，ＭＤＨ，ＡＳＡＴ５种酶的同工酶谱均有差异。同工酶分析及长春犬与哈尔滨猪株在其它生物学特征方面的差异提示它们     

用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行球虫同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳,对柔嫩艾美耳球虫和斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊,进行了乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖磷酸同分异构酶(GPI)和6—磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)同工酶的初步研究。结果表明柔嫩艾美耳球虫和斯氏艾美耳球虫的LDH和GPI同工酶酶谱存在明显差异,6PGD同工酶酶谱则一致。柔嫩艾美耳球虫的LDH、GPI和6PGD均为1条带,而斯氏艾美耳球虫的LDH为2条带,其位置与柔嫩艾美耳球虫明显不同,斯氏艾美耳球虫的GPI呈现2条带,其中1条的位置同柔嫩艾美耳球虫基本一致。作者认为,聚丙烯酰胺凝胶电泳可作为球虫同工酶研究的一种方法。讨论了同工酶技术在球虫虫种、虫株的鉴定,在致弱株、耐药株的确定,以及在遗传学、免疫学等方面的应用前景     

不同性别野牛草同工酶酶谱分析

利用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳技术对3种性别野牛草(Buchloe dactyloides)的幼叶和幼穗的过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和多酚氧化酶(PPO)同工酶酶谱进行分析,以期通过酶谱的差异表达对野牛草进行早期性别鉴定。结果表明:雄株野牛草幼穗的POD和PPO同工酶各有1条特异条带Rf0.12和Rf0.15;雌雄同株的幼穗PPO同工酶酶谱中有1条特异条带Rf0.12;雌株的叶片PPO同工酶酶谱有Rf0.12的特异性条带。通过分析上述3种同工酶的酶谱发现,叶片的POD和PPO同工酶酶谱可以用来对野牛草进行早期性别鉴定。     

柔嫩艾美耳球虫耐药株与鸡3种球虫的同工酶的研究

对不同离子载体抗生素具有抗药性的柔嫩艾美耳球虫和药物敏感的柔嫩区美耳球虫、布氏匀美耳球虫和堆型艾耳球虫的孢子化卵囊,采用聚安凝胶垂直板电泳,进行了乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、葡萄糖磷酸异构酶（ＧＰＩ）和葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）等同工酶华不同离子载体抗生素具有抗药性的柔嫩艾美耳球虫和药物同工酶酶谱可以反应出球虫种间差异;而柔嫩艾耳球虫抗性虫株的ＬＤＨ酶谱是２条带,敏感虫株是３条带,抗性株比敏感株     

四川野生假俭草同工酶比较研究

以四川不同地区的5个野生假俭草为材料,采用聚丙酰胺凝胶电泳法,检测了过氧化物酶和酯酶同工酶.结果表明:不论从酶的条带数,还是从相同酶带的活性来比较,5种生态型均存在差异性;在过氧化物酶同工酶位点上,酶带数为3～7条,乐山假俭草、巫溪假俭草和雅安假俭草差别甚小,表现出较强的同源性,而都江堰假俭草、峨眉假俭草差异较大,同源性不强;在酯酶同工酶位点上,酶带数多为4～5条,各材料在酶带的数量、活性上存在较大差异.     

猪、犬旋毛虫DNA限制性片段长度多态性分析

以旋毛虫国际标准虫种Ｔ．ｓｐｉｄａｉｓ和Ｔ．ｎａｔｉｖａ作对照,应用ＤＮＡ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术对黑龙江省猪、大旋毛虫进行虫种鉴定。结果显示：猪旋虫和Ｔ．ｓｐｉｒｌａｉｓ酶切图谱相同;犬旋毛虫和Ｔ．ｎａｔｉｖａ酶谱一致,结果提示,黑龙江猪旋毛虫为Ｔｓｐｉｒａｌｉｓ,犬旋毛虫为Ｔ．ｎａｔｉｖａ。     

旋毛虫各隔离种杂交实验

种间杂交是研究旋毛虫分类的重要方法.旋毛虫各隔离种之间的最大差异是由杂交试验所证实的,生殖隔离是命名虫种的最重要的依据[1].为了搞清我国旋毛虫的分类问题,国内学者对此做了一些工作,但结果不尽一致[2,3].本文用单对和多对杂交试验对旋毛虫各隔离种进行了比较研究,现将结果报告如下,以期为虫种分类提供理论依据.     

用DNA限制性片段长度多态性鉴定旋毛虫各隔离种

以旋毛虫国际标准虫种：旋毛形线虫（Trichinella spirlais）和本地长形线虫(Trichinella nativa）作对照,应用DNA限制性片段长度多态性（PELP）技术对黑龙江省猪、犬旋毛虫进行虫种鉴定。结果显示：猪旋毛虫和旋毛形线虫酶切图谱相同;犬旋毛虫和本地毛形线虫酶谱一致。结果提示,黑龙江猪旋毛虫为旋毛形线虫,犬旋毛虫为本地毛形线虫。     

中国旋毛虫形态度量学分析

对来自中国８个地区的猪、犬源旋毛虫（哈尔滨海伦猪株、哈尔滨五常犬株、长春犬株、沈阳猪株、河南南阳猪株、湖北十堰猪株、西安猪株、云南大理猪株）,系统测量了其不同发育阶段,包括包囊、肌幼虫、成虫（、♀）的长度、宽度,包囊形态学指数,肌幼虫和成虫体部大小。旋毛虫各发育阶段之间形态学变化缺乏规律性,表现在包囊大,幼虫和成虫不一定大,反之亦然;各地虫株长宽度间虽然也有差异,但也缺乏一定的规律性。因此,旋毛虫形态学在种株分类研究中不能作为依据。     

四川野生假俭草同工酶比较研究

以四川不同地区的5个野生假俭草为材料，采用聚丙酰胺凝胶电泳法，检测了过氧化物酶和酯酶同工酶，结果表明，不论从酶的条带数，还是从相同酶带的活性来比较，5种生态型均存在差异性，在过氧化物酶同工酶位点上，酶带数为3－7条，乐山假俭草，巫溪假俭草和雅安假俭草差别甚小，表现出较强的同源性，而都江堰假俭草，峨眉假俭草差异较大，同源性不强，在酯酶同工酶位点上，酶带数多为4－5条，各材料在酶带的数量，活性上存在较大差异。     

旋毛虫各隔离种杂交试验

种间杂交是研究旋毛虫分类的重要方法。旋毛虫各隔离种之间的最大差异是由杂交试验所证实的 ,生殖隔离是命名虫种的最重要的依据 [1]。为了搞清我国旋毛虫的分类问题 ,国内学者对此做了一些工作 ,但结果不尽一致 [2 ,3 ]。本文用单对和多对杂交试验对旋毛虫各隔离种进行了比较研究 ,现将结果报告如下 ,以期为虫种分类提供理论依据。1　材料与方法1 .1　材料1 .1 .1　旋毛虫各隔离种　猪旋毛虫 (T.swine,T.sw) :来自黑龙江省海伦县猪体内 ;在小鼠中传代 50次。犬旋毛虫 (T.dog,T.d) :来自黑龙江省五常县犬体内 ;在小鼠中传代 50次。T.spira…     

东北地区4株猪、犬旋毛虫间及与国际标准虫株间的杂交试

为了给中国旋毛虫虫株的分类提供依据,将分离自中国东北地区的4株猪、犬源旋毛虫虫株(猪2,犬2)分别接种于小鼠,按常规分离出肌幼虫,纯化后,设8个杂交试验组,将每2个虫株的雌、雄幼虫体各5条混合,以食管灌注法接种于小鼠,42 d后扑杀,消化、集虫、计数回收肌幼虫数.同法进行了哈尔滨猪株、犬株与国际标准虫株Trichinella spiralis(T.s)、T.nativa(T.na)之间的杂交试验.结果:猪株间、犬株间杂交结果与对照无差异(P>0.05),而猪、犬株间杂交结果与对照差异极显著(P<0.01);哈尔滨猪株与T.s、犬株与T.na杂交结果与对照无差异(P>0.05),而猪株与T.na、犬株与T.s杂交结果与T.s对照差异极显著(P<0.01),表明哈尔滨猪源旋毛虫为T.s,犬源旋毛虫为T.na.     

异质生境条件下扎龙湿地羊草过氧化物同工酶的差异性表达

为了探讨异质生境条件对羊草(Leymus chinensis)过氧化物同工酶表达的影响,揭示羊草种群对不同土壤生境的响应机制,并为植物的趋异适应和生态可塑性研究提供依据,对扎龙自然保护区内的3种不同生境沙土、碱土、草甸土中生长的3种羊草过氧化物同工酶进行了研究。结果表明:碱土生境条件下羊草条带数最多,草甸土羊草条带数最少;在同一生境条件下,羊草根系的过氧化物酶的条带数最多,叶的条带数最少。其中,迁移率(Rf)值为0.08、0.10、0.17的条带是主带,在7个样品中出现;Rf值为0.35、0.73的条带是弱带,只在1-2个样品中出现;叶片的Shannon-Weinner指数在3个生境间变化较大,根茎的变化较小。因此,异质生境导致了扎龙自然保护区内的羊草过氧化物同工酶的表达存在差异。     

猪、犬旋毛虫成虫免疫原性试验

通过提取猪、犬旋毛虫成虫抗原，制备成虫油佐剂免疫原，在小鼠体内进行同源特异性免疫试验和交叉免疫试验。试验得到猪旋毛虫成虫抗原同源免疫减虫率为５５．８０％，其对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率是３５．１１％；犬旋毛虫成虫抗原同源免疫的减虫率为３９．００％，其对猪旋毛虫的交叉免疫减虫率是２４．９６％。试验结果揭示，猪、犬旋毛虫成虫具有一定的免疫原性，其交叉免疫减虫率低于同源特异性免疫。猪旋毛虫成虫抗原对犬旋毛虫的交叉免疫与犬旋毛虫自身的同源特异性免疫差异不显著。     

应用PCR方法对中国旋毛虫虫株的鉴定

收集了中国８个地区不同宿主来源的旋毛虫虫株，提取虫体ＤＮＡ，应用Ｊｅａｎ设计的引物序列和不同的退火温度进行了ＰＣＲ扩增。结果：哈尔滨海伦猪株、长春犬株、沈阳猪株、河南南阳猪株、湖北十堰猪株、西安猪株、云南大理猪株均显示出家畜型旋毛虫特异的６０２ｂｐ目的ＤＮＡ基因片段；而哈尔滨五常犬株未见此片段。在４８℃和５０℃退火温度扩增显示，哈尔滨五常犬株和长春犬株均有３８０ｂｐＤＮＡ基因片段，而其他虫株未有此片段。     

旋毛虫T668基因真核表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达

利用RT-PCR技术从中国河南猪旋毛虫(国际标准虫种编号为ISS534)新生幼虫得到T668基因,并克隆入pEGFP-N1真核表达载体中构建重组质粒,该重组质粒在脂质体介导下转染BHK细胞。EGFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,Western blotting鉴定,细胞裂解液样品中有1条约77 000的条带,可被绿色荧光抗体及猪感染旋毛虫阳性血清所识别,与预计大小一致,表明成功构建T668-pEGFP-N1真核表达质粒,并在BHK细胞融合表达,表达产物具有抗原性。     

中国旋毛虫形态度量学分析

旋毛形线虫（Trichinella,spiralisowen1855）简称旋毛虫。其种属的分类学问题,较为复杂[1,2]。目前尚无统一的分类标准。形态是物种的重要的外部特征,也是物种分类的重要参数[3]。本文收集了中国八个地区,来源于不同宿主的旋毛虫虫株,进行了形态度量学分析,以期为中国旋毛虫种株的分类提供依据。1材料和方法1．1旋毛虫虫株的来源哈尔滨海伦猪株、哈尔滨五常犬株（来源于哈尔滨东北农学院寄生虫教研室）、长春犬株、沈阳猪株、云南大理猪株、湖北十堰猪株（来源于中国医科大学寄生虫教研室）、西安猪株（来源于兰州兽医研究所）、河…     

猪、犬旋毛虫新生蚴免疫原性试验

将猪、犬旋毛虫新生蚴制备成免疫原,在小鼠体内进行免疫试验,免疫１周后攻击感染肌幼虫,３５日蝗检查肌幼虫的减虫率。结果表明,猪旋毛虫新生蚴的同源免疫和其对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率分别为８３．１１％和７９．３９％,犬旋毛虫新生蚴的为８１．３７％和８０．６９％。结果揭示,旋毛虫新生蚴具有良好的免疫原性,同源免疫的减虫率比交叉免疫的高,猪旋毛虫新生蚴抗原对犬旋毛虫的交叉免疫与犬旋毛虫新生蚴抗原的同源免疫在减虫率上差异不显著。     

旋毛虫病的防治

旋毛虫病系由旋毛虫在人体及动物的肠或肌肉内寄生所致的疾病。最早发现于1881年,我国于1881年、1934年及1937 年分别在猪、犬及猫体内检到此虫。我国屠宰猪群中,旋毛虫检出率近年来有所增长。据某些地区报道,猪旋毛虫检出率高达2～7％,而河南南阳地区先后调查10个县,发现其中8个县均有旋毛虫病流行.旋毛虫病的发生和流行,严     

蛭形巨吻棘头虫的LDH同工酶

用聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛭形巨吻棘头虫（Ｍａｃｒａｃａｎｔｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓｈｉｒｕｄｉｎａｃｅｕｓ）雄虫、雌虫体液和宿主（猪）血清的ＬＤＨ同工酶的酶谱、相对迁移率和相对活性等进行比较表明，雄虫有３条酶带和雌虫有２条酶带显示出很强的特异性；不同浓度的抑制剂（硝硫氰醚）对雄虫和雌虫特有的ＬＤＨ同工酶酶带活性具有不同程度的抑制作用，尤其是雌虫第２带对抑制剂最敏感。蛭形巨吻棘头虫体液具有特异的且不同于宿主（猪）血清ＬＤＨ１～５的ＬＤＨ同工酶酶带，特有的ＬＤＨ同工酶可能由４条不同的区带组成。