双孢蘑菇三种类型菌株的RAPD扩增研究

用７２个随机引物,对三种类型双孢蘑菇菌株２７９６（杂交型）,８２１１（优质型）,０１（高产型）等进行了ＲＡＰＤ扩增,发现２６个引物均产生三种不同的带型。用该２６个引物进一步作三种类型９株双孢蘑菇白色菌株的ＲＡＰＤ扩增,发现引物Ｕ１６,Ｕ２０,Ｂ１,Ｈ４,Ｈ５,Ｍ７能很好地区分三类菌株,尤以Ｕ２０和Ｈ５为佳,其产生的三种带型稳定整齐,差异带明显,为双孢蘑菇菌株特性的早期预测提供了ＤＮＡ水平的标记。     

姬松茸与双孢蘑菇不同菌株的RAPD扩增研究

以4个姬松茸菌株和2个双孢蘑菇菌株为材料，用20个随机引物对它们进行RAPD扩增，通过对供试菌株遗传相似系数的估算和系统聚类分析，构建姬松茸和双孢蘑菇遗传相关树状聚类图谱，结果表明，进行RAPD扩增的20个随机引物中，有12个能产生三种带型，当遗传相似系数升至0.8713时，这6个菌株被分为3类，第一类为菌株18和26，第二类为菌株13和12，第三类为菌株33和45。     

中国主栽双孢蘑菇菌株的DNA多态性

本文以中国双孢蘑菇不同主栽产区的9个具代表性的双孢蘑菇菌株为材料,用20个随机引物对其进行RAPD分析。结果表明,20个随机引物中,有15个随机引物的扩增产物DNA片段表现出明显的多态性,其中每个引物对不同菌株扩增出的DNA片段数目各不相同,而且不同引物扩增出的DNA带谱也不同,差异较大。这15个引物对供试菌株总共扩增出168条DNA片段,其中最大的片段可达6.77kb,最小的DNA片段仪有0.31kb。同时,比较了供试菌株两两间的遗传相似性,发现它们之间的变化不大,其相似系数从0.6891到1.0000,而平均相似系数仅为0.8500,表明供试菌株之间的亲缘关系较近,遗传变异不丰富。另外,采用系统聚类法中的类平均法,对供试菌株相似系数两两间进行聚类分析并生成树状图谱,直观准确地揭示了它们之间的差异。当相似系数为77％时,所有供试菌株都被聚为一大类,说明我国主栽双孢蘑菇菌株的遗传基础较狭窄,可能来源于同一品系,这为进一步开展双孢蘑菇菌种的遗传改良提供了理论依据。     

冰箱保藏双孢蘑菇菌株的遗传特性研究

从菌落形态、生理生化特性和DNA水平等方面研究双孢蘑菇菌株于4℃冰箱保存后的遗传特性。结果表明,冰箱保存菌株的活力普遍下降;部分菌株的菌落形态发生变化,酯酶同工酶也存在一些差异;但RAPD分析表明,冰箱保存菌株与生产栽培菌株无明显的遗传差异。     

双孢蘑菇不同菌株生物学特性的研究

比较研究了13株双孢蘑菇菌株的菌丝生长势、出菇性状、菌丝拮抗性、酯酶同工酶酶谱等。结果表明,13个菌株中表现出一定的遗传差异性,部分菌株为同物异名。Ag-004菌株菌丝生长势最强,日平均生长速度0.54 cm·d~(-1),23d长满试管;出菇试验表明棕色蘑菇品种表现出比白色蘑菇品种产量高、较耐低温和抗逆性强的特性。大多数菌株之间表现出一定的拮抗反应,少部分菌株间拮抗现象不明显。酯酶同工酶酶谱出现3个区域,Rf=0.1758、0.2424、0.7697为所有菌株共有,可能为双孢蘑菇酯酶同工酶的特征谱带,Rf=0.8060为白色蘑菇品种的酯酶同工酶的特征条带,而Rf=0.7151为2个棕色蘑菇菌株所有,在所有的白色品种中几乎没有,Rf=0.7151可能为棕色蘑菇菌株的特征谱带。     

双孢蘑菇的保鲜研究

蘑菇保鲜技术是影响货架寿命和一品质量的关键问题，有较大的经济价值和研究价伍。后熟过程是导致采后蘑菇变质的原因。质量的变化表现为菌盖褐化、开伞、微生物感染和组织消耗。这个问题可通过冷藏、气调、减压、化学、微孔薄膜、辐照、微波、电磁、电离等一系列保鲜方法得以缓解。蘑菇保鲜技术以其后熟过程一的生物学特性研究为基础，尤其是生理生化变化工接影响对保鲜技术的研究与应用，双孢蘑菇后熟与酪氨酸酶、蛋白酶的活性、呼吸作用、碳水化合物、含氮物质有机酸及维生素等成分的变化有关，并会温湿度、氧化电势、Ｏ＿２含量、膜渗透、激活剂和抑制剂的影响。蘑菇褐变由乾促褐变、非酶促褐变、微生物感染等多种因素引起。枯萎由失术和组织消耗引起。目前开发了十几种蘑菇保鲜技术，其保鲜机理业已基本探明。     

双孢蘑菇工厂化栽培菌株的筛选

本研究在中波相互合作的基础上,从波兰引进了7株工厂化双孢蘑菇栽培菌株,通过小试、中试的筛选工作,获得了Ap2菌株,其工厂化栽培产量达到21.76kg/m2。现将结果汇报如下:1 材料与方法1.1 供试菌株①小试菌株和常规栽培试验菌株:Ap1～Ap7共7个参试考察菌株和一个CK（F56）共8个菌株,从波兰蔬菜作物研究所食用菌研究室引进。②中试菌株:Ap1、3、6、7、2共5个参试考察菌株和一个CK（F56）共6个菌株。从波兰蔬菜作物研究所食用菌研究室引进（小试和中试在山东     

双孢蘑菇杂交育种研究进展

双孢蘑菇人工栽培已有三百多年的历史,菌株选育的方法也得到不断的发展。从自然采种、纯种培养、组织分离保种到多孢或单孢分离、选种,曾经为双孢蘑菇商业性栽培提供了许多重要的菌株,但改良菌株的进程缓慢。应用杂交技术有可能把不同类型菌株的各个优良性状结合于一个新菌株上,因此,杂交育种比组织分离、多孢分离和单孢分离等选种方法更有希望莸得既高产又优质的新菌株。由于双孢蘑菇的性特征是次级同宗配合,故大多数孢子是自体可育的异核体,不能用于杂交。从稀有     

双孢蘑菇原生质体同核体及杂交异核体的RAPD分析

本研究以双孢蘑菇原生质体同核体及杂交异核体为材料,用5对随机双引物进行RAPD分析。结果表明,RAPD反应扩增出的特异DNA谱带能够将原生质体同核体与异核体出发菌株以及杂交异核体与同核体亲本明显区别开来。因此,RAPD分析是一种快速有效的手段,能够在双孢蘑菇的遗传研究和菌种改良中发挥重要作用。     

不同覆土处理对双孢蘑菇产量和品质的影响

分析了泥炭与田泥分别以1：3、1：1、3：1的比例混合,以及纯泥炭作为覆土材料,并以常用的田泥稻壳土的覆土材料作为对照,研究了不同覆土的理化性质对双孢蘑菇产量和品质的影响。结果表明泥炭的持水率高、孔隙度大、电导率高、容重轻、含氮量高,这些特性有利于双孢蘑菇的生长,因此纯泥炭作为覆土时产量最高,随着添加田泥比例的升高,容重升高,其他参数降低,双孢蘑菇的产量有所降低,泥炭和田泥以1：1的比例混合时产量和对照没有显著差异,且在双孢蘑菇的品质方面也优于对照,作为覆土材料较为经济。     

危害双孢蘑菇木霉株系的遗传差异测定

本文选用了102个分离于双孢蘑菇菇床上的木霉菌株(Trichoderma sp.),其中93株来自美国,3株来自加拿大,6株来自英国。利用RAPD技术进行遗传差异测定。25个随机引物共扩增出223条DNA带,在此基础上分析并构建了遗传相关聚类图。结果表明,美国与加拿大双孢蘑菇菇床上分离的木霉菌株相似性极高,达95％左右;而与英国的木霉菌株遗传距离较远,遗传相似性低于50％。     

双孢蘑菇和姬松茸灭活原生质体融合育种研究

以双孢蘑菇和姬松茸为亲本菌株,通过灭活原生质体融合,经过初筛和复筛,1株新的稳定的双孢蘑菇和姬松茸杂交高产菌株被选育出来。双孢蘑菇原生质体被热灭活（65％,30rain）,姬松茸原生质体被紫外线灭活（30w,30cm,10min）,双亲存活率为3．1×10^-7～3．3×10^-8。在聚乙二醇诱导下融合继续生存,亲本原生质体融合被实现,重组频率为4．8×10^-5。     

双孢蘑菇褐变的酶学机理研究（续）

从图谱可以看出,从蘑菇开始扭结成小米粒大到开伞整个过程中,其ＰＰＯ同工酶图谱基本相似,但褐变程度却有些不同。在生长的开始阶段,电泳迁移率大的快泳区域（Ｒｆ０－６８～０－７０）具有较强的ＰＰＯ酶活力,褐变程度亦深,但随着蘑菇生长,其活性强带主要是集中的Ｒｆ中等区域（Ｒｆ０－２３～０－５３）,而随着蘑菇的成熟开伞,其活性强带主要是在Ｒｆ中慢泳区域（Ｒｆ０－２３～０－３７）。开伞菇薄菇始薄膜扣菇中菇小菇中豆菇小豆菇图２　蘑菇表层组织在常温中放置的ＰＰＯ同工酶图谱２－５　蘑菇采后ＰＰＯ酶活性变化　一般情…