α-半乳糖苷酶产酶菌种的定向筛选及诱变选育

从土壤样品分离、实验室保藏菌种及引进菌种共200多个菌株中，经纸层析定向筛选，获得20株具有显著产α-半乳糖苷酶活性特性的菌株。进一步以R15^#菌株为出发菌株，经^60Co诱变处理，及紫外-亚硝基胍复合诱变，得到产廿半乳糖苷酶性能稳定、活力较高的变异菌株3个，其产酶活力达231U／g以上，平均比出发菌株提高190．9％。其中RM48^#菌株经连续传代7代，产酶性能未出现较大的变异，具有较好的遗传稳定性。该菌株经鉴定为黑曲霉变种（Aspergillus niger v．Tiegh）。     

草酸降解菌的筛选及其对油菜菌核病的生物防治作用

采用以草酸作为惟一碳源的培养基筛选草酸降解菌，获得对培养基pH具有明显调节作用的3株代表菌：AODU－1，AODd-2和AODd-3。用高效液相色谱系统（HPLC）测定其草酸降解率，其中AODU-1的草酸降解率最高。用草酸降解菌AODU－1，W－1和WB（W－1与油菜菌核病菌拮抗菌B2的混合物）对菌核病进行油菜离体叶片的室内防病试验以及油菜的田间防治试验。在室内试验中，经AODU-1处理后，油菜叶片菌核病的发病率与病斑面积分别比对照减少44．75％和55．29％；而经W－1处理后则分别比对照减少50．28％和67．06％。在田间试验中，经AODU－1、W－1和WB处理后，油菜病株率与病情指数均比对照显著降低（P＜0．05）。     

培养基中糖的选择对小麦花药培养中胚产量的影响

从植物上取下花药进行特殊的培养，可以发现未成熟的花粉可被引导分化形成胚。在培养基中，蔗糖一般作为碳源，曾有过报道，通过改变培养基中的含糖量，在大麦花药培养中胶产生的频率增加，这个结果鼓励着人们在小麦花药的液体培养基培养中，改良基本培养基，试用麦芽糖或别的糖代替蔗糖。培养介质以WMZS为基本培养介质，其中含有Nb培养基的无机盐和维生素，10％（W／V）聚蔗糖类400－DL，0．5％（W／V）肌醇，0．5％（W／V）葡萄糖，160mg／L－L谷氨酸和5mg／L，2．4－D，几种不同培养基，区别在于它们所含峋糖量和糖的种类不一样，…     

裙带菜凝集素的分离及性质研究

裙带菜（Undaria pinnatifida)经Tris-HCl缓冲液粗抽提，然后进行硫酸铵分级实验，测定盐析范围为50％硫酸铵饱和度，经50％硫酸铵饱和度分级后，裙带菜凝集素（UPL）纯化倍数为7．7，总活力回收为167％，UPL粗抽提液中糖的质量分数为5．72％。该凝集素在pH为4．0－10．14时均为活性，但在pH为5．0－9．51时活性较高，pH等于4．0时活力保留25％，pH等于10．14时活力保留50％，该凝集素不被D－果糖，葡萄糖，γ－球蛋白所抑制。     

脂肪酶产生菌的筛选·产酶条件及酶特性研究

[目的]筛选脂肪酶高活性菌株作为脂肪酶生产菌株和脂肪酶基因的供体菌。[方法]从油脂厂等地采集26份含菌样品,采用溴甲酚紫平板对样品进行初筛,以产脂肪酶发酵培养基摇瓶复筛,获得1株产脂肪酶活性较高的菌株09-7-1,经鉴定该菌株为黑曲霉（Aspergillus niger）。采用正交试验对影响该菌株产酶的因素进行了研究,并探讨了该菌株所产脂肪酶的性质。[结果]该菌株最佳产酶条件：碳源为0.5%的可溶性淀粉,氮源为0.2%的酵母膏,培养温度为32℃,发酵液pH为5.2,该菌株最初发酵液中酶活力为13.164 U/ml,优化后酶活力达24.112 U/ml,是最初酶活力的1.83倍。该菌株所产脂肪酶最适作用温度为30℃,最适作用pH为7.0;酶液在60℃保温90 min后,活性损失较少,pH为5.5～10.0内稳定。[结论]该研究可为脂肪酶生产和基因研究奠定基础。     

培养基对节杆菌产β─呋喃果糖苷酶活力的影响

节杆菌（ＡＳ）能够产生一种β－呋喃果糖苷酶,该酶能以蔗糖和乳糖为底物,合成低聚乳果糖（ＬＳ）。这是一种功能性低聚糖,对人体健康有益,有很好的发展前景。实验研究了培养基组成对节杆菌产β－呋喃果糖苷酶活力的影响,确定最佳培养基的配方为蔗糖４％、酵母膏１．６０％、牛肉膏０．５０％、ＫＨ_２ＰＯ_４０．２０％、（ＮＨ_４）_２ＨＰＯ_４０．４０％。     

无蒸煮生淀粉糖化酶菌的选育

从２３份土样中筛选出１０５株野生型霉菌,其中有１０株具有较高的糖化淀粉的能力,尤以Ａ－４（Ⅱ）Ｃ和Ｅ６株菌酶活力最高,分别达１１２５．２８２５．１和８２５．１个酶活性单位;对Ｃ株菌进行紫外光诱变,从诱变后的菌株中筛选出有较大正向突变的２株菌株Ｃ（１）和Ｃ（５）,与诱变前相比,Ｃ（１）菌的生淀粉糖科活力提高了２７．３％,经生淀粉酒精发酵试验,相同条件一酒精度提高敢２２．４％;Ｃ（５）菌的生糖化酶活力     

培养基对节杆菌产β—呋喃果糖苷酥活力的影响

节杆菌（ＡＳ）能够产生一种β－呋喃果糖苷酶,该酶能以蔗糖和乳糖为底物,合成低聚乳果糖（ＬＳ）。这是一种功能性低聚糖,对人体健康有益,有很好垢发展前景,实验研究了培养基组成对节杆菌产β－呋喃果糖苷酶活力的影响,确定最佳２基的配方为蔗糖４％、酵母膏１．６０％、牛肉膏０．５０％、ＫＨ２ＰＯ４０．２０％、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４０．４０％。     

溶栓纳豆菌的筛选鉴定及其发酵特性研究

为开发具有特定生理活性的新型纳豆保健品，从酱豆，豆豉及纳豆中分离和筛选到5株有明显纤溶活性的芽孢杆菌，其中NK－5菌活性最高，被用作溶栓纳豆生产菌，根据形态，生理生化特征以及DNA中G＋G含量，鉴定NK－5菌株为枯草杆菌（Bacillus subtilis)，该菌株的重要特点是产生强力纤溶酶和大量胞外粘质，后经鉴定为γ－多聚谷氨酸，用NK－5菌株试制的纳豆既有日本纳豆的感官特征和营养组成，又有很高的纤溶活性，庐酶在4度下贮存两个月后仍能保持70％酶活力。     

恶臭假单胞菌诱变与底物类似物抗性筛选

提高海因酶产生菌株的活力，能为β-内酰胺类抗生素的重要中间体D-对羟基苯甘氨酸的生产带来应用价值，对产海因酶的恶臭假单胞菌MZ-4S-0315进行紫外、微波诱变处理，在加有适量底物类似物5-FU的选择培养基上进行筛选．结果表明：经测定的140株菌株，其海因酶活力大部分比原菌株产酶能力有所提高；其中在微波（800w,2450Hz）40s诱变条件下筛选到一株产酶活力比原菌株提高2．44倍的菌株ZF-109．该方法比以往化学试剂结合的诱变操作简单，危害性小，特别是筛选速度有了极大提高．     

芦苇内生真菌Mü1W1C6菌株的生物学特性研究

研究了一株具有生防潜力的芦苇内生真菌Choiromyces aboriginum Mü1W1C6菌株的生物学特性。结果表明,与麦芽糖培养基、查彼培养基相比,该真菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）和基本培养基上生长较好;在PDA培养基上1,0～35℃均能生长2,0～30℃时生长较好2,5℃时最适;葡萄糖、果糖能显著促进该真菌的生长,而乳糖、淀粉、麦芽糖则没有明显的促进作用;有机氮源更有利于菌丝生长,无机氮源不利于菌丝生长;该内生真菌对pH的适应范围很广,在pH 5～11的范围内都能生长良好,相比之下,在中性偏碱性的环境中生长最好;光周期、生长因子、微量元素对芦苇内生真菌的生长均无显著影响。     

海南五指山野生美花兰根部内生真菌研究

美花兰(Cymbidium insigne)为大花蕙兰(Hybrid cymbidium)杂交育种的主要原生种之一,具有极为重要的保护和开发利用价值。内生真菌在兰科植物整个生活史中起着重要的作用。为了解美花兰内生真菌菌群种类,本研究采用组织分离法首次对海南岛五指山地区的野生美花兰根部的内生真菌进行分离,并根据所分离真菌的形态和ITS序列进行鉴定。共分离到内生真菌132株,确定为14属,隶属于半知菌类的Pestalotiopsis 5株,Aspergillus 16株,Penicillium 27株,Trichoderma 13株,Cylindrocarpon 14株,Curvularia 4株,Nigrospora 3株;Nodulisporium 11株,子囊菌门的Chaetomium 3株,Pezicula 1株,Neonectria 6株,Cryptosporiopsis 6株;担子菌门的Tulasnella 9株;Ascomycete sp.9株,因未见产孢暂不能确定其具体分类地位;5株菌(W2-2 1株、W2-6 2株及W6-5 2株)经诱导未见产孢,且其ITS序列与GeneBank中的序列相似性较低,可能是新的属或种。将所得ITS序列提交GeneBank,获得新的登陆号HQ889705-HQ889725。     

生物絮凝剂生产菌的分离与鉴定及其絮凝特性分析(摘要)(英文)

[目的]对分离自土壤样品中的一株微生物絮凝剂产生菌W5进行系统鉴定并分析其絮凝特性。[方法]以细菌的16SrDNA通用引物对其基因组进行PCR扩增,并采用单因素法分析培养基的pH值、碳源和氮源对絮凝活性的影响,采用红外光谱法进行功能基团的分析。[结果]同源性比对结果表明菌株W5与Hymenobacter gelipurpurascens具有98.34%的同源性,为革兰氏阴性,长杆菌。菌株W5生长发酵培养基最佳条件为pH值7.04、葡萄糖为碳源、酵母粉为氮源。对菌株W5所产的微生物絮凝剂(MBF-W5)进行提取纯化,所得产物微红色絮状物。红外分析结果表明,MBF-W5中主要的功能基团为羟基、羧基和氨基。[结论]在絮凝剂用量为150～500μl,温度为5～65℃,pH值为2～10的范围内均具有85%以上的絮凝活性。     

生物絮凝剂生产菌的分离与鉴定及其絮凝特性分析(摘要)(英文)

[目的]对分离自土壤样品中的一株微生物絮凝剂产生菌W5进行系统鉴定并分析其絮凝特性。[方法]以细菌的16SrDNA通用引物对其基因组进行PCR扩增,并采用单因素法分析培养基的pH值、碳源和氮源对絮凝活性的影响,采用红外光谱法进行功能基团的分析。[结果]同源性比对结果表明菌株W5与Hymenobacter gelipurpurascens具有98.34%的同源性,为革兰氏阴性,长杆菌。菌株W5生长发酵培养基最佳条件为pH值7.04、葡萄糖为碳源、酵母粉为氮源。对菌株W5所产的微生物絮凝剂(MBF-W5)进行提取纯化,所得产物微红色絮状物。红外分析结果表明,MBF-W5中主要的功能基团为羟基、羧基和氨基。[结论]在絮凝剂用量为150～500μl,温度为5～65℃,pH值为2～10的范围内均具有85%以上的絮凝活性。     

生物絮凝剂生产菌的分离与鉴定及其絮凝特性分析

[目的]对分离自土壤样品中的一株微生物絮凝剂产生菌W5进行系统鉴定并分析其絮凝特性。[方法]以细菌的16S rDNA通用引物对其基因组进行PCR扩增,并采用单因素法分析培养基的pH值、碳源和氮源对絮凝活性的影响,采用红外光谱法进行功能基团的分析。[结果]同源性比对结果表明,菌株W5与Hymenobacter gelipurpurascens具有98.34%的同源性,为革兰氏阴性,长杆菌。菌株W5生长发酵培养基最佳条件为pH值7.04、葡萄糖为碳源、酵母粉为氮源。对菌株W5所产的微生物絮凝剂（MBF-W5）进行提取纯化,所得产物微红色絮状物。红外分析结果表明,MBF-W5中主要的功能基团为羟基、羧基和氨基。[结论]在絮凝剂用量为150～500μl,温度为5～65℃,pH值为2～10的范围内均具有85%以上的絮凝活性。     

生防链霉菌ML27和柑橘内生放线菌P3Y2原生质体融合研究

为了将生防链霉菌ML27和柑橘内生放线菌P3Y2的优良特性整合在一起,对两株菌进行了原生质体融合研究。结果表明,菌株ML27和P3Y2的种子液分别转移到蔗糖浓度为20%和10%以及甘氨酸浓度为1.5%和1.0%的培养液中培养,收获的菌丝体对原生质体形成和再生最有利;分别选用5 mg/m L、90 min,及5 mg/m L、120 min的溶菌酶浓度与酶解时间制备ML27与P3Y2的原生质体能达到较高的形成率和再生率;在60℃条件下,菌株ML27和P3Y2的原生质体热灭活时间分别以10 min和15 min适宜;在20 W紫外灯下15 cm处分别照射7 min和5 min时,菌株ML27和P3Y2原生质体的灭活程度适宜。在此基础上,进行菌株ML27和P3Y2的原生质体融合,根据形态学特征、抑菌活性检测和定殖能力测定初步筛选出1株融合菌株MP45。试验结果可为这两株柑橘病害生防菌株的改良和充分利用奠定基础。     

培养基配方对白灵菇菌丝生长的影响

采用不同培养基配方对5个不同来源的白灵菇菌株,在液体和固体培养条件下研究了其菌丝生长的生物学特性。结果表明,不同氮源对菌丝生长有明显的影响,以豆粉、蛋白胨作氮源最佳,其次是麦麸即碳源,玉米粉和牛肉膏不适宜作为白灵菇菌丝生长的氮源。5个菌株在PDA、无机盐组合培养基上菌丝的生长速率明显不同。在PDA上,菌丝生长的快慢依次为天山2号、L1、白灵菇1号、W1W2和江都菌株。不同配方对菌丝生长的影响不同,固体培养条件下,B4、B3、B2、B1、B11配方比较适合于各菌株生长,但来自于江都的白灵菇菌株表现出对无机盐类有较强的适应性,菌丝生长较其它菌株快,日均生长率达10 mm以上;液体培养条件下,B9、B14和B16配方的菌丝生物量最大,其次是B1、B3、B5配方。表明,固体培养下的配方不一定完全适合于作液体培养基配方。5个菌株的对峙实验表明,白灵菇1号与L1菌株间亲缘很近,江都菌株与白灵菇1号、天山2号菌株间亲缘关系较远,而与L1、W1W2菌株间亲缘关系比较近。W1W2菌株与白灵菇1号、天山2号、L1、江都菌株间的亲缘关系较近。     

白鹭源禽I型副粘病毒L基因的克隆与序列分析

根据GenBank中已发表的鹅副粘病毒GPV—SF02株全基因组序列设计5对引物,采用RT—PCR扩增出白鹭源禽I型副粘病毒（W13株）L基因的IJA（1121bp）、LB（1481bp）、LC（1439bp）、LD（1476bp）、LE（1608bp）5个片段,用DNAStar软件比较分析后进行拼接,获得长约6760bp包含有L基因全长的核苷酸序列,而W13株L基因的mRNA全长为6704bp、开放阅读框（ORF）为6615个碱基、编码2204个氨基酸。氨基酸同源性分析表明：W13株I基因与鹅源SF02、ZJI、NA-1株及鸡源Guangxi7株的同源性均超过97．0％;而核苷酸同源性分析表明：W13株L基因与鹅源SF02、ZJI、NA-1株及鸡源Guangxi7株的同源性均超过93．0％。可见,W13株与鹅源SF02、ZJI、NA-1株及鸡源Guangxi7株的亲缘关系较近。     

乌兰布和沙漠地区灌水对成龄霸王生长及光合作用的影响

[目的]揭示灌水对成龄霸王生长及光合作用的影响。[方法]采用野外试验,通过对中国林科院沙林中心第一实验场植物园中成龄霸王[Zygophyllum xanthoxylum(Burge)Maxim]进行不同灌水量处理,研究人工深层坑渗灌条件下灌水量[开春水:W_115 kg/株、W_245 kg/株、W_375 kg/株、W_4150 kg/株,埋冬水:W_575 kg/株,无灌溉(CK)]对成龄霸王地上生物量、叶片相对含水量(RWC)、叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和水分利用效率(WUE)的影响。[结果]随着灌水量的增加,成龄霸王地上生物量不断增加;各处理的叶片RWC从大到小依次为W_3、W_2、W_4、CK、W_5、W_1;自然条件和人工灌水条件下,霸王叶片Pn、Tr的日变化均呈"双峰"曲线,且有明显的"午休"现象。各处理Pn日均值从大到小依次为W_3、W_2、W_4、W_1、CK、W_5;Tr日平均值从大到小依次为W_3、W_2、W_1、W_4、W_5、CK。WUE日平均值从大到小依次为W_3、W_2、CK、W_1、W_5、W_4。[结论]综合分析,最适宜的灌水时间是成龄霸王萌芽期,最佳的坑渗灌量为开春水75 kg/株。     

嗜盐嗜碱菌株20-13的生物学特性及系统发育学分析

对大庆盐碱土中分离到的菌株20-13进行表型特征、生理生化特性和系统发育学研究表明,菌株20-13为革兰氏阴性、能运动的杆菌,末端形成膨大的芽孢,嗜碱且中度嗜盐,能在NaCl浓度为1%~25%(W/V)的改良S-G培养基中生长,最佳生长发生在3%NaC(lW/V);生长的温度范围20~50°C,最适为30~32°C;pH范围8.0~11.0,最适pH 10.0。16S rRNA基因序列的系统进化分析表明,该菌株与厚壁菌门、碱杆菌属Alkalibacillus haloalkaliphilus的成员亲缘关系最近,相似性达99.4%,菌株20-13与Alkalibacillus haloalkaliphilus的表型特征与生理生化特性基本一致。综合分析,确定该菌株与碱杆菌属Alkalibacillus haloalkaliphilus为同一种,且与模式菌株不同的菌株。