雏鹅人工感染沙门菌的病理组织学观察

为了研究沙门菌感染雏鹅的主要病理组织学变化。采取腹腔注射沙门菌人工感染7日龄健康雏鹅,对发病雏鹅进行病理剖检,并采取肺脏、肝脏、脾脏和肠道病料制作病理切片,光学显微镜下进行病理组织学观察。受感染雏鹅剖检病变可见皮下、心肌、肺脏、脾脏、肠道、脑膜等多处出血,肝脏坏死,胆囊、脾脏肿大;显微病理组织学变化为肝、脾、肺、肠道等器官出血、细胞变性、坏死,有炎性细胞浸润。结果表明,感染沙门菌雏鹅出现了广泛性的组织损伤,同时伴随着机体各器官明显的炎症反应。     

雏鹅链球菌的分离与鉴定

某种鹅场发生了以5日龄雏鹅死亡为主的急性传染病，死亡率达65％，经病原分离，鉴定和病原回归动物试验，确诊为由粪链球菌引起的链球菌病。     

雏鹅鸭肝炎病毒的分离与鉴定

本市某鹅场饲养的7日龄雏鹅发生以昏迷倒地、头后仰、角弓反张、四肢痉挛划动等神经症状为主的传染病,死亡率为43%.剖检病变主要是肝脏肿大,呈土黄色,胆囊肿胀,胆汁充盈,部分鹅肝脏可见表面出血点及斑状条纹.为弄清发病原因,进行了病原分离与鉴定.     

一例鹅副粘病毒病的病毒分离鉴定及病理组织学观察

鹅副粘病毒病是由禽副粘病毒I型引起的一种禽鸟共患的高发病率、高死亡率的传染病。以呼吸困难、肿头、流泪、喜卧、下痢、脾脏和胰腺肿大、散布大小不一坏死灶,肠道粘膜出血、坏死、溃疡、结痂为主要特征。该病于1997年7月在我国江苏、广东等地的部分县市雏鹅中首次发生,造成了重大的经济损失。2008年夏季,泰安某养鹅场暴发了类似传染病,引起鹅大量死亡。根据流行病学调查、临床症状、病理组织学观察及实验室诊断,确诊为鹅副粘病毒病,现报道如下。     

雏鹅大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

为有效防治雏鹅大肠杆菌病,试验无菌采集疑似大肠杆菌病例雏鹅的肝、脾等组织,进行病原菌的分离培养,经过培养特性、形态染色、生化特性以及致病性试验,鉴定为大肠杆菌。选用7种临床常用抗菌药物进行药敏试验,药敏试验结果表明,分离菌株对庆大霉素、阿莫西林、氧氟沙星、头孢唑啉产生耐药性,对丁安卡娜高度敏感。试验结果为雏鹅大肠杆菌病的临床治疗提供依据。     

雏鹅烟曲霉菌病的诊治

１发病情况及病因分析邵武市长坪村某养鹅场于２００２年３月２７日从外省购进１日龄太湖白鹅２８０只，饲养１周后有数只雏鹅精神不振，食欲减退，呼吸困难，饲养者随即采用青霉素、链霉素、强力霉素进行治疗，３天均未见效。至１４日龄共发病４６只，出现症状２～７天死亡，共死亡１８只，病死率为３９．１％。由于当时气候闷热，连日下雨，饲料、垫料易被曲霉菌污染，鹅在采食含有曲霉菌的饲料过程中吸入孢子及吸入含有孢子的空气，致使外源性毒物内侵遂成其患。２临诊症状病初见雏鹅精神沉郁，羽毛松乱，两翅下垂、食欲减退乃至废绝，饮…     

雏鹅新型病毒性肠炎病毒的分离、鉴定及病原特性的研究

利用原代鸭胚成纤维细胞培养及蚀斑克隆技术从具有典型渗出性、坏死性病变的雏鹅新型病毒性肠炎（NGVE）病例的实质器官和肠道内容物中分离到26株病毒。经鉴定,26株病毒的中和性抗原是一致的。病毒（NGVEV）呈球形或椭圆形,无囊膜,直径70－90nm。不凝集鸡、鸭、鹅、鸽、黄牛、水牛及猪的红细胞。对氯仿处理1－3次不敏感。病毒于－15℃和0 ℃至少可以分别保存36和20个月;于37℃45d45℃48h、56℃5h、60℃1h不影响地细胞的致病变能力和对雏鹅的致病性;于80℃5min和煮沸（96℃）10s可以使病毒失活。病毒经药物抑制法和酶消化法均鉴定其核酸类型为DNA。在CsCl中浮密度为1．32g/cm^3.pH1．0和PH10．0处理1h可使病毒失活pH2．0和9．0可使病毒滴度有所下降,PH3．00－8．0对病毒的感染性没有影响。NGVEV与鸭瘟病毒和小鹅瘟病毒没有中和抗原相关性。分离和病毒通过滴鼻、点眼、皮下注射、肌肉注射、口服等途径人工感染均可复制出与临床表现一致的病例,其中口服最佳感染途径。根据分离到的病毒特性,这种病毒为一种雏鹅新的腺病毒。     

宁夏某肉牛场牛支原体分离鉴定及病理组织学观察

为了分离鉴定宁夏某肉牛场牛支原体和分析该病原对靶器官的损伤,采用Thiaucourt's液体筛选培养基和固体培养基进行病原分离,设计牛支原体16SrRNA通用引物和uvrC特异性引物进行基因序列扩增并测序,使用DNA Star软件将分离菌株测序结果与GenBank中的标准株序列进行同源性比较,采用MEGA6.0软件中的邻接法(Neighbor-joining,NJ)依据16SrRNA和uvrC序列构建分离株系统发育树并进行遗传进化分析,采用石蜡切片,HE染色,病理组织学观察。结果表明,病原菌落呈油煎蛋样,16S rRNA和uvrC扩增片段与阳性对照一致,16S rRNA和uvrC基因序列构建的系统发育树与牛支原体在同一分支;肺组织结构消失,部分肺泡腔实变、塌陷,局灶性肺出血,肺泡腔内可见炎性细胞浸润;肺泡隔增厚、出血,肺泡内有少量脱落的上皮细胞;肺泡壁断裂,肺泡腔可见红色的炎性渗出物,有纤维结缔组织增生。     

犊牛脑炎病原菌的分离鉴定及病理组织学观察

为了确定导致初生犊牛脑炎的主要病原菌,采用生化试验、PCR技术及16 S rRNA测序对分离的病原菌进行鉴定,动物试验确定主要病原菌的致病性,药敏试验确定其药物敏感性,通过石蜡切片观察其脑组织的病理组织学变化.结果显示,分离株符合乳房链球菌的生物学特性；该菌株对小鼠致病性较强,死亡率为5o％,而对家兔无致病性；对万古霉...     

禽源烟曲霉菌和黄曲霉菌的分离鉴定及几种中药抑菌作用研究

【目的】对保定市临床真菌感染病鸭进行菌株分离鉴定,并筛选分离菌株的体外抑菌药物。【方法】通过形态学观察、PCR扩增、测序及动物回归试验对菌株进行鉴定,并采用微量稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)及体外药敏试验统计菌落数量和直径来探究石菖蒲、黄柏、决明子、苦参、辣蓼、白头翁和蒲公英对烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus)和黄曲霉菌(Aspergillus flavus)的体外抑菌活性。【结果】成功分离到烟曲霉菌和黄曲霉菌。动物回归试验结果显示,雏鸡出现与病鸭相似的症状,剖检可见肝脏长出灰白色结节,且病变组织出现肉芽肿病变,说明2种病原菌均可使雏鸡感染。烟曲霉菌MIC₈₀结果显示,石菖蒲、黄柏、决明子和苦参MIC₈₀分别为8、16、32和64μg/μL,辣蓼、白头翁和蒲公英均为128μg/μL;黄曲霉菌的MIC₈₀结果显示,石菖蒲、决明子和黄柏MIC₈₀分别为8、16和32μg/μL,苦参和辣蓼均为64μg/μL,白头翁和蒲公英均为128μg/μL。体外药敏试验结果显示,在石菖蒲浓度为16...     

雏鸡烟曲霉感染NOD1信号通路关键分子mRNA水平的变化

为明确烟曲霉菌感染雏鸡后肺组织内核苷酸结合寡聚化结构域1(nucleotide-binding oligomerisation domain1,NOD1)信号通路中关键分子mRNA水平的变化情况,取10日龄雏鸡40只,随机分为2组。感染组(Aspergillus fuigatus,Af)雏鸡滴鼻烟曲霉菌孢子悬液,50μL/只;对照组雏鸡滴鼻等量生理盐水。分别于感染后12、24、48 h处死雏鸡。无菌取肺组织,菌落计数法测定肺组织中烟曲霉菌的负荷;实时定量PCR方法检测肺组织中NOD1、Rip2、NF-kBp65 mRNA的表达情况。结果表明,Af组0 h未见烟曲霉菌生长,其他各时间点均有霉菌生长,且霉菌负荷量逐渐增加。对照组未见烟曲霉菌生长。在烟曲霉菌感染后24、48 h肺组织中NOD1和NFkBp65 mRNA的表达水平显著高于对照组(P<0.05)。感染后12、24 h肺组织中Rip25 mRNA的表达水平显著高于对照组(P<0.05)。由此说明,NOD1信号通路在烟曲霉菌感染后被激活,其在抗烟曲霉菌感染免疫中必定扮演重要作用,详细机制有待进一步研究。     

烟曲霉感染对肉鸡部分免疫指标的影响

为了研究烟曲霉感染对肉鸡血清免疫球蛋白(Ig)、γ干扰素(IFN-γ)浓度及传染性法氏囊病(IBD)抗体效价的影响,选用96只15日龄罗斯308肉鸡,随机分成试验组和对照组,每组4个重复,每个重复12只鸡。试验组连续滴注霉菌孢子5 d,对照组滴注生理盐水。试验后的第3、4和5天,分别从试验组和对照组每个重复随机抽出2只鸡进行剖检诊断和实验室检测;试验后的第7 (21日龄)和14天(28日龄),分别检测肉鸡血清中Ig A、Ig G、Ig M、IFN-γ和IBD抗体水平。结果:试验后的第3～5天,试验组鸡血液中均分离到烟曲霉;试验组鸡血清中Ig A、Ig G和Ig M浓度均极显著低于对照组(P<0. 01),血清中IFN-γ的浓度极显著高于对照组(P<0. 01),血清中IBD抗体效价极显著低于对照组(P<0. 01)。研究表明烟曲霉菌感染能显著降低肉鸡的免疫功能。     

Development of a method for the identification, using the polymerase chain reaction, of Aspergillus fumigatus isolated from ostriches

Objective To develop a method for identifying DNA of Aspergillus fumigatus from ostriches, using the polymerase chain reaction (PCR). A fumigatus is the principal causative agent of avian aspergillosis.
Design A biochemical trial.
Sample population Twelve Aspergillus fumigatus isolates and three other Aspergillus species.
Procedure PCR primers that were based on the sequence of the alkaline protease gene from human isolates of A fumigatus were used.
Results We successfully tested the method on ostrich isolates from five states and showed that the test is specific for A fumigatus.
Conclusions In most cases the DNA sequence of A fumigatus isolates from ostriches is similar to that of human isolates. DNA sequences vary significantly among A fumigatus isolates, including those from affected ostriches in the same flock. The genetic variation may be used to trace aspergillus infections in ostrich flocks and determine if the disease is transmitted by contact with infected birds.     

鸭疫里默氏菌的分离鉴定及病理组织学观察

从吉林某鸭场疑似鸭疫里默氏菌感染病/死鸭的脑部、心血分离到一株革兰阴性小杆菌,经细菌形态、生理生化、病理学观察、血清型鉴定与动物回归等试验,结果均证实分离株为RA,并将其命名为JL-RA1。该分离株对青霉素、替米考星、氟苯尼考高度敏感;而对头孢他啶、头孢曲松、磷霉素等多种药物完全耐药。     

1株黄曲霉颉颃菌的鉴定及其抑菌活性成分分析

【目的】筛选黄曲霉颉颃菌,探究其最佳培养条件及有效抗菌成分,为实际生产中应用生物防治方法抑制黄曲霉污染提供新的理论依据。【方法】通过平板对峙法及分子生物学鉴定方法对待测菌株进行筛选鉴定。以抑菌率作为衡量标准,判断所得黄曲霉颉颃菌的最佳培养温度、培养时间、接种量、转速、pH及装液量。通过硫酸铵沉淀法从颉颃菌无菌发酵上清液中提取蛋白,观测粗提物对黄曲霉菌丝生长的影响。通过离子交换色谱和凝胶过滤色谱进一步纯化粗提蛋白,并进行质谱测序及序列对比分析,筛选鉴定颉颃菌产生的有效抑菌成分。【结果】筛选到1株解淀粉芽孢杆菌B10(菌种保藏号CCTCCNO:M2018353)。最佳培养条件为温度40℃,培养时间36 h,接种量3%,转速120 r/min, pH 6.0,装液量30 mL,最大抑菌率可达46.56%。其粗提蛋白能有效抑制黄曲霉生长,破坏菌丝正常形态,并从中筛选出几丁质结合蛋白、壳聚糖酶、葡聚糖酶等8种可能的有效抑菌成分。【结论】本试验分离鉴定出1株抑制黄曲霉正常生长发育的解淀粉芽孢杆菌B10,其产生的多种蛋白成分对黄曲霉有显著抑菌活性。     

鹅星状病毒的分离鉴定及全基因组序列分析

2017年10月—2019年5月,本实验室从广东、四川、河北、山东、安徽、辽宁等广大养鹅地区采集了67份典型雏鹅痛风样品进行了实验室检测以及病原的分离鉴定,检测结果表明：所有样品中均检测到了鹅星状病毒,并且约有94.03%的样品为两个不同种的鹅星状病毒混合感染。病原分离结果表明：鹅星状病毒FLX株的变异株病毒（命名为SCCD）可以在鹅胚上稳定增殖,并且能稳定致死10日龄鹅胚,致病力较鹅星状病毒FLX增强;新型鹅星状病毒株（命名为SDPD）不能在鹅胚和SPF鸡胚上稳定增殖。病毒的基因组测序结果表明：鹅星状病毒FLX株与鹅星状病毒FLX的变异株病毒SCCD株、新型鹅星状病毒SDPD株全基因组核苷酸相似性分别为89.7%、58.1%,ORF1b基因氨基酸相似性分别为98.4%、61.0%,ORF2基因氨基酸相似性分别为81.0%、42.5%。将新分离的鹅星状病毒株接种1日龄健康雏鹅,结果表明,鹅星状病毒SCCD株和鹅星状病毒SDPD株虽然能使雏鹅发生死亡,引起肝炎、肾肿胀和增重减少等变化,但雏鹅均无典型痛风（脏器尿酸盐沉积）表现,而两种鹅星状病毒株混合攻毒能使44%的雏鹅发生典型痛风,并与临床发病症状一致。因此,临床上引起雏鹅痛风的病原可能是两种鹅星状病毒,即新型鹅星状病毒和鹅星状病毒FLX的变异株病毒。     

Isolation,Identification and Complete Genomic Sequence Analysis of Goose Astrovirus

From October 2017 to May 2019, 67 samples of typical goslings gout were collected from Guangdong, Sichuan, Hebei, Shandong, Anhui, Liaoning provinces and other vast goose-raising areas in China. The results showed that goose astrovirus was detected in all samples and about 94.03% of the samples were infected by two different kinds of goose astrovirus. The pathogenicity of goose astrovirus FLX variant strain (named SCCD) which could stably proliferate in goose embryos and kill 10-day-old goose embryos was more virulent than goose astrovirus FLX strain. The new type of goose astrovirus strain (named SDPD) could't stably proliferate in goose embryos and SPF chicken embryos. The whole genome nucleotides homology of goose astrovirus FLX strain with goose astrovirus SCCD strain and the new type goose astrovirus SDPD strain were 89.7% and 58.1%, the amino acids homology of ORF1b gene were 98.4% and 61.0%, the amino acids homology of ORF2 gene were 81.0% and 42.5%, respectively. The newly isolated goose astrovirus strains were inoculated into 1-day-old healthy goslings, the results showed that although the goose astrovirus SCCD strain and the new type goose astrovirus SDPD strain could cause the death of goslings and the changes of hepatitis, kidney swelling and weight loss, none of the goslings showed typical gout characteristics (urate deposition in the organs of the body), however, 44% of goslings were characterized with typical gout which was consistent with the symptoms of natural disease after coinfected by the two goose astrovirus strains. Therefore, the pathogenic agents of goslings gout may be two different kinds of goose astrovirus, namely the new type of goose astrovirus and the variant of goose astrovirus FLX.     

7株牛源A型巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

对2014年沈阳地区患有呼吸系统疾病的育肥牛场进行病原分离,得到7株分离菌,对其进行培养形态及染色观察、病理组织切片观察、动物致病性观察及16S序列分析,初步鉴定为牛多杀性巴氏杆菌(Pm)。利用Pm种特异性引物及荚膜血清特异性引物进行PCR扩增,均得到目的基因条带。对分离菌进行药敏试验的结果显示,5株分离菌株已对阿米卡星、新诺明产生较强耐药性;7株分离菌均对氟苯尼考、恩诺沙星、四环素及氨苄西林敏感。由此确定,分离菌株均为牛荚膜A型巴氏杆菌,且已具有一定耐药性。     

野生水禽鸭瘟病毒的分离与鉴定

取急性死亡的某动物园野生水禽进行病毒分离,通过鸡(鸭)胚接种、动物回归试验、病毒主要理化特性测定、免疫预防试验等证实分离株为鸭瘟病毒,揭示野生水禽完全有自然感染鸭瘟的可能性,家鸭与野生水禽在相互间传播鸭瘟病毒上具有双向性.