牛血清蛋白质多态性检查方法

牛血清蛋白质多态性检查方法中国奶牛协会血型鉴定中心（天津３００２２１）王津原，李明清，黄华祥关于牛血型鉴定的应用情况、检查血型用标准抗血清的制备及国际标准检验、牛血清检查的方法，我们在《牛血型鉴定方法及其应用》（《中国奶牛》１９９４年第４期）中已作了...     

如何做好新生犊牛血清的生产管理和质量监控

进行动物细胞、器官或组织的培养时，大多都需要在培养基中添加必需的新生犊牛血清或者胎牛血清。由于价格上新生犊牛血清比胎牛血清要低得多，并且也足以满足一些常规培养的要求，因此，新生犊牛血清制品在很长一段时间内会拥有广阔市场，生产这一产品会带来很大经济效益。由国家药品监督管理局颁布的《中国生物制品生产用主要原辅材料质控标准》(2000年版)，首次登录了“牛血清”条目，     

水牛卵母细胞体外受精及其早期胚胎性别鉴定

从屠宰场收集了本地水牛卵巢380个，平均每个卵巢回收3．29枚可用卵母细胞。分别采用添加5％、10％自制发情牛血清和国产胎牛血清培养液体外成熟培养水牛卵母细胞，结果表明，发情牛血清影响牛卵母细胞体外成热的效果与胎牛血清的效果无显著差异（48．89％vs51.11％，52．22％Vs50．00％），2种浓度间亦无显著差异。在胚胎培养液中添加10％的发情牛血清，比添加5％发情牛血清的卵裂率和胚胎发育率显著升高（34．85％Vs23．58％，39．13％Vs31.48％），差异显著。通过自主设计的两对引物扩增公水牛特有的Sry基因以及公母水牛共有的水牛1．715卫星DNA序列，采用连续多重PCR方法，能够有效地对水牛早期胚胎进行性别鉴定。     

NSP—ELISA鉴别FMDV感染与免疫

利用大肠埃希氏菌表达的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC多肽作为抗原，建立了一种可区分FMDV感染与接种灭活疫苗免疫牛的间接酶联免疫吸附试验(I—ELISA)。通过对336份正常牛血清、508份注射疫苗牛血清、60份人工感染牛血清和58份豚鼠免疫血清的检测，确定了血清抗体阴性与阳性效价的临界值。试验证明，该方法简易、快速，灵敏度比VIAA—AGID高。     

应用MTT比色法评价不同牛血清促细胞生长作用

细胞培养过程中血清的选择对细胞的促生长增殖具有重要作用。本试验分别以商品新生牛血清、自制新生牛血清、自制成年牛血清培养成纤维细胞、骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞，通过MTT比色法来判断细胞的增殖能力，进而对血清质量作出评价。结果表明，自制新生牛血清具有良好的促细胞生长作用(相对生长率＞0.96)，并且3次试验结果比较差异不显著(P＞0.05)，具有较好的重复性；而成年牛血清和无血清空白对照组促细胞作用不明显。因此应用MTT比色法能够评价血清质量。     

荧光光谱法在半抗原-载体蛋白偶联物鉴定中的应用

对苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物进行荧光光谱鉴定。结果显示,对苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物的荧光光谱与其半抗原和载体蛋白相比均发生变化,苯甲酸-牛血清白蛋白偶联物和苯胺-牛血清白蛋白偶联物合成成功。研究表明,荧光光谱法是一种鉴定半抗原-载体蛋白偶联物的可行的方法。     

环形泰勒虫裂殖体感染细胞培养技术的改进

在环形泰勤虫裂殖体胶冻细胞苗工厂化生产中，将小转瓶培养改为大转瓶培养，在此基础上又用成年健康黑白花牛血清代替犊牛血清，加犊牛血清的培养液收获细胞数为１４６．０万个／ｍＬ，而加成年牛血清的培养液在２次细胞培养中收获细胞数分别达１５３．８万个／ｍＬ和１６２．０万个／ｍＬ。     

中草药治疗牛血痢

牛血痢在农村中是一种常见的疾病，临床以血性下痢为主要特征，常呈地方性流行，如治疗不及时或治疗不当，常造成死亡。１９８３年莲花县良坊，闪石，湖上，南岭等乡发生牛血痢病，耕牛死亡１８０余头。笔者自１９８３年以来采用中草药治疗牛血痢５００多头，均取得了满意...     

非特异性抑制病毒因子的理化特性及作用机理

为探讨牛血清中非特异性抑制病毒因子的理化特性，作用机制及存在形式，本研究以鸡传染性法氏囊病毒Ｄ７８（ＩＢＤＶ－Ｄ７８），貉细小病毒（ＲＥＶ）为指标病毒，应用蚀斑形成抑制试验，核内包涵体形成抑制试验等证明，成牛血清对病毒有较强的非特异性抑制作用（平均抑制率为８０％以上）而胎牛血清的这种作用很弱；成牛血清经乙醚，高岭土，受体破坏酶（ＲＤＥ）处理后，抑制作用显著降低。     

浅论新生牛血清病毒检测

<正>近年来,生物制品在生产以及应用方面取得了不小的进展,与社会生活的联系也愈发紧密。由于新生牛血清中病毒来源广、种类多,因此针对新生牛血清的病毒检测十分必要。本文通过研究新生牛血清病毒检测的特点和概况,简要分析了常用的病毒检测方法,以期提高牛血清中病毒的检出率,提高我国生物制品质量以及行业水平。1新生牛血清病毒检测概况1.1新生牛血清的定义新生牛血清指的是在一段时间未进食的牛身上经过采血以及除菌过滤后制成的血清,常用于     

用RPHA与ELISA检测牛血清中的类HBsAg物质

用ＲＰＨＡ和ＥＬＩＳＡ检测２４６头份牛血清中的ＨＢｓＡｇ。结果，ＲＰＨＡ检出阳性率为３６．６０％，ＥＬＩＳＡ检出阳性率为７．３％，将ＲＰＨＡ检出阳性牛血清与人的ＨＢｓＡｇ阳性血清比较，其阳性滴度远比人的低。牛血清经５７℃１小时热处理后，阳性率明显下降。牛血清中ＨＢｓＡｇ不能被ＨＢｓＡｂ完全抑制，表明，用ＲＰＨＡ检测血清中ＨＢｓＡｇ时，存在较高的非特异性。     

反复冻融新生牛血清对促细胞生长效应的影响

选择促细胞生长性能良好的三批新生牛血清，经不同次数冻融后用其配制MEM培养淹，用于培养SP2／0细胞，从细胞最大增殖量和倍增时间2个指标测定促细胞生长效应。结果，用经不同次数冻融的新生牛血清配制的MEM培养液，对SP2／0细胞的最大增殖量和倍增时间影响不大；但反复冻融20次以上的新生牛血清配制的培养没使细胞的倍增时间延长。由此可见，为了防止细胞倍增时间延长，所用新生牛血清的冻融次数应该控制在20次以内。     

酶联免疫吸附试验诊断环形泰勒虫感染牛的研究

用层析法制备的牛环形泰勒虫抗原用于ＥＬＩＳＡ试验，检测６２头份带虫牛血清，阳性符合率９６．６７％；在疫区检测１５０头份牛血清，阳性率８０．４３％；在瑟氏泰勒虫流行区检测４５４头份牛血清，有交叉反应，阳性率２８．１９％；检测８９头份安全区牛血阴性符合率１００％。用正常红细胞抗原和环形泰勒虫抗原分别对人工感染和自然感染牛作了特异性试验，结果ＥＬＩＳＡ前者ＯＤ值为阴性，后者ＯＤ值来阳性。２头人工感染牛于     

加减白头翁汤治疗犊牛血痢和仔猪白痢

1犊牛血痢 1994年6月，在大通县某兽医站先后接收治11例病牛，症状表现为血便、极度消瘦，主要侵害动物8—13月龄犊牛，犊牛血痢发病季节多在春末夏初。死亡率不高，但对动物生产价值影响很大。采取病畜血便，涂片和培养分别做微生物学检验，未发现致病性病原菌。食源调查，没有喂麻渣等能致血便的草料。初步诊断为“犊牛血痢”。     

敌百虫治疗牛睑虱的疗效

后备牛群发生牛眼睑部血虱，用2％敌百虫药液进行一次过患部涂擦，3小时后，牛血虱消灭清光；用1％敌百虫患部涂擦，3小时后，眼睑部还有牛血虱寄生，两组疗效差异显著。     

不同生长时期牛血清对细胞培养效果的影响

[目的]为了检测不同生长时期的牛血清的细胞培养效果,从而在今后的实验中更加合理地选择牛血清进行细胞培养。[方法]实验采用两组采自不同年龄段的牛血清对Sp2/0—Ag14细胞进行培养,并对细胞生长的细胞数量、细胞形态等定期进行测定及观察并绘制出细胞生长曲线,计算出细胞倍增时间,以比较两组牛血清细胞培养的效果。实验分为两组:一组为3月龄采血的牛血清(A组),另一组为14日龄采血的牛血清(B组)。[结论]结果表明,应用两组牛血清培养的Sp2/0—Ag14细胞的培养倍增时间分别为A组牛血清17.8h和B组牛血清17.1h;表明B组牛血清的细胞培养效果优于A组牛血清。     

衣原体单克隆抗体在牛羊血清诊断上的应用

采用淋巴细胞亲交瘤技术，研制出的抗衣原体单克隆抗体，应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，对本地区所采集的１２８份羊血清、９０份牛血清进行检测，结果，羊血清阳性检出率为２５．８％，牛血清阳性检出率为３２．２％，选择５０份羊血清、５０份牛血清用已建立的检测衣原体抗体ＥＬＩＳＡ与间接血凝试验（ＩＨＡ）进行比较，牛血清ＥＬＩＳＡ阳性检出率为３２．０％，ＩＨＡ为２４．０％，ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡ试验高出８个百分点；羊血清ＥＬＩＳＡ阳性检出率为２６．０％，ＩＨＡ为２２．０％，ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡ高出４个百分点。     

新生牛血清促细胞生长活性检测方法的建立与应用

牛血清是医药生物技术产品中重要的原辅材料之一,做好牛血清的质量控制是提高生物制品质量的重要环节。本研究通过应用PK15、BHK21和ST三种兽用生物制品研制中常用的细胞作为载体,选用国内同等价位5个不同厂家生产的新生牛血清作为比较对象,采用细胞倍增时间测定法、细胞克隆形成率测定法、细胞三次连续传代培养法、MTT比色法和微量终点稀释法五种血清质量鉴定的方法进行比较,检测新生牛血清的促细胞生长活性,最终确定了MTT比色法作为便捷高效快速筛选新生牛血清的检测方法。     

应用黄土汤治疗牛血便症

近年来，随着农村产业结构的调整，畜牧业已成为农村经济发展的支柱产业，牛饲养量不断增加，牛血便症成为牛消化系统疾病的常见病、多发病，发病率不断上升，给畜牧业生产带来了一定经济损失。笔者使用黄土汤治疗牛血便症，取得良好疗效，现介绍如下。     

犊牛注射佐剂后血清中抗体的测定

３０头５日龄犊牛腹膜腔内注射自制的油包水佐剂，１４天后，应用补体结合反应与双相琼脂扩散反应，检测犊牛血清中的抗体浓度。结果表明，试验组犊牛血清中的抗体浓度均比对照组高７．５－８个滴度，呈现免疫有效。