“O”型口蹄疫病毒生物合成多肽苗保护性抗体的免疫应答

ｐＸＺ５００持粒表达的生物合成多肽苗分别以总剂量３２μｇ／头和０．３４６ｍｇ／头分两次免疫接种豚鼠和猪，均可获得保护性抗体的良好免疫应答。豚鼠和猪在第一次免疫接种后４０ｄ和４５ｄ时，其血清的乳鼠保护指数均在２．０以上；分别用５０个发病单位强毒攻击，均可获得１００％保护。     

猪口蹄疫灭活苗最佳免疫途径研究初报

猪口蹄疫灭活苗最佳免疫途径研究初报何家惠丁再棣刘冬霞诸长贵杨英（江苏省农业科学院畜牧兽医所农业部畜禽诊断重点开放实验室南京２１００１４）（江苏省畜牧兽医总站）当前控制猪口蹄疫最有效的方法之一是进行主动免疫。但是目前国内生产的猪口蹄疫灭活苗注射后反应严...     

动物对口蹄疫病毒的免疫应答及口蹄疫疫苗的质量评估

介绍了动物对口蹄疫病毒的免疫应答,包括FMDV感染后出现的免疫球蛋白和FMD免疫后动物所产生的抗体等内容;同时对口蹄疫疫苗的质量进行了评估,指出疫苗中的抗原量、140S完整病毒颗粒的含量与疫苗的质量关系密切。     

蓝耳病对猪O型口蹄疫浓缩苗免疫效果的影响

为了解蓝耳病对O型口蹄疫浓缩苗免疫效果的影响,该研究将30头仔猪随机分成3组,每组分别按厂家推荐剂量肌肉注射3种不同的O型口蹄疫浓缩苗,45日龄、75日龄、105日龄、135日龄、165日龄采血检测抗体。结果表明,蓝耳病造成3种O型口蹄疫浓缩苗免疫抗体滴度增长缓慢,且长时间内低于保护水平,抗体合格率严重偏低。     

不同厂家猪口蹄疫O型疫苗免疫效果评估

为了筛选效果好的猪口蹄疫疫苗来免疫猪群,试验分两组,分别选用A和B两种不同厂家猪口蹄疫O型灭活疫苗对猪群进行两次免疫,每组重复4个批次,每组每批次随机选择40头猪,每批次猪在同一栋舍饲养,在一免前、一免后4周,二免前、二免后4周、二免后8周分别进行五次采样检测,跟踪免疫猪群不同日龄抗体变化情况,来评估两种疫苗的免疫效果。结果显示,两组疫苗免疫抗体变化总体趋势一致,叠加效应好,均能取得一定效果,但是B组疫苗较A组疫苗免疫抗体阳性率高、且持续时间长。     

商品猪牛O型、亚洲-I型口蹄疫2价苗免疫效果的评价及免疫方案的探索

参照既定的商品猪O型口蹄疫疫苗免疫方案,对47头不同日龄的商品猪免疫牛口蹄疫O型、亚洲-I型2价灭活疫苗,并通过免疫应激反应观察、抗体效价跟踪监测,以评价该疫苗的免疫效果及摸索合适的免疫方案。结果表明,受试的47头不同日龄的猪,除个别出现一过性采食下降外,均未出现其他异常表现;该2价苗在猪只30日龄以1ml/头肌肉注射做基础免疫,间隔30d以>2ml/头剂量做加强免疫,其效果比较好。     

口蹄疫病毒部分免疫功能肽段的合成、鉴定及免疫功能评价

利用微波多肽合成仪Liberty,合成O型口蹄疫病毒VP1 140~160和200~213氨基酸序列的两条肽段,并用高压液相色谱仪及质谱分析仪就合成的多肽片段进行分析纯化和鉴定;将合成的多肽片段作为半抗原与载体蛋白BSA偶联,免疫小鼠,进行血清制备和抗体效价测定.结果表明:成功合成了口蹄疫2条免疫功能短肽,其纯度均达到80%以上.半抗原成功与载体蛋白偶联;小鼠抗血清经过抗体效价检测证明半抗原与载体蛋白偶联组的抗体水平高于其余2个对照组,但是达不到免疫保护的水平.同时说明Liberty是一种操作简单、方便,合成效率高的多肽合成仪,可高效合成研究用多肽.     

推荐口蹄疫免疫程序

牲畜一般春、秋两季进行免疫。牲畜免疫21天后方可外调。所有牛、羊在进行口蹄疫亚洲1型-O型双价灭活（浓缩）疫苗免疫时，首免时要采取二次免疫法：第一次免疫后间隔21-28天再进行加强免疫1次。以后每半年免疫1次。猪采用猪O型灭活苗首免时，也采取二次免疫法。第1次注射后间隔30天再注射1次。     

猪O型口蹄疫O/MYA98/BY/2010株灭活苗与合成肽苗免疫效果对比研究

通过监测湖南省娄底市娄星区4年的猪O型口蹄疫疫苗免疫抗体效果,对猪O型口蹄疫O/MYA98/BY/2010株灭活疫苗与猪O型口蹄疫合成肽疫苗在临床应用中的免疫效果进行比较性研究。结果表明:4年的猪O型口蹄疫疫苗抗体免疫合格率差异显著(p0.05),2014年使用O/MYA98/BY/2010株口蹄疫灭活苗免疫合格率最高,为89.3%;除2013年外,其余3年的疫苗免疫合格率均达到国家农业部规定的70%的要求;相应猪O型口蹄疫疫苗当年在不同养殖场中的免疫效果表现均有一定的差异,但各年的变异系数间差异不显著(P0.05),两种类型的疫苗在连续使用后出现不同程度的效力减退现象。     

不同厂家猪O型口蹄疫合成肽苗免疫效果分析

为分析A、B、C 3个厂家O型口蹄疫合成肽苗的免疫效果,将80头苏太杂交仔猪随机分成4组,I组为空白对照,II~IV组按厂家推荐剂量分别肌肉注射3种不同的O型口蹄疫合成肽苗,每组编号为1~10的供试猪45日龄免疫一次,编号为11~20的供试猪45日龄和73日龄分别免疫一次。结果表明,3个厂家合成肽苗免疫副反应均较小;3种合成肽苗抗体合格率二免较一免均无显著差异(P0.05),但B、C厂家合成肽苗可使机体在短时间内获得较高水平的抗体滴度,且维持时间较长。     

猪O型口蹄疫灭活疫苗免疫效果评估

为了考察市售高效灭活疫苗与政府采购疫苗免疫效果之间差异分别选取了两家疫苗公司生产的政府采购疫苗和高效灭活疫苗,分别在4个猪场展开免疫效果评估。4个猪场按照相同的免疫程序进行免疫,分别采集免疫前、加强免疫后30 d、加强免疫后60 d的血清,用O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA试剂盒进行抗体检测。结果表明,加强免疫后30 d,抗体平均效价依次为1∶196.9、1∶251.9、1∶256.0、1∶243.8。高效灭活苗与政府采购疫苗在同样的免疫程序和免疫剂量下,同一时间点其抗体水平效价差异不显著;但免疫副反应方面,高效灭活疫苗比政府采购疫苗低,且差异极显著。     

商品猪牛O型、亚洲-Ⅰ型口蹄疫2价苗免疫效果的评价及免疫方案的探索

参照既定的商品猪O型口蹄疫疫苗免疫方案,对47头不同日龄的商品猪免疫牛口蹄疫O型、亚洲-Ⅰ型2价灭活疫苗,并通过免疫应激反应观察、抗体效价跟踪监测,以评价该疫苗的免疫效果及摸索合适的免疫方案.结果表明,受试的47头不同日龄的猪,除个别出现一过性采食下降外,均未出现其他异常表现;该2价苗在猪只30日龄以1 ml/头肌肉注射做基础免疫,间隔30 d以＞2 ml/头剂量做加强免疫,其效果比较好.     

“三苗同步、两点注射”法与常规免疫法的免疫效力对比

本试验分别利用"三苗同步、两点注射"的新型免疫方法和常规免疫方法,检测生猪重大动物疫病(猪瘟、高致病性猪蓝耳病、猪O型口蹄疫)的抗体水平,比较2者间的免疫效果差异。     

雏鸡新城疫疫苗三种不同免疫程序的免疫效力

新城疫（ND）油乳剂灭活苗与LaSota株弱毒疫苗,采用三种不同方法对试验雏鸡进行免疫,依据HI抗体滴度的检测和攻毒试验,比较了雏鸡三种不同免疫程序的免疫效力,结果表明,3种程序免疫的雏鸡60日龄时对强毒攻击均得到完全保护,对母源抗体HI滴度5．2（log2HI值）的雏鸡,2日龄用ND油乳剂灭活苗和LaSota疫苗免疫优于2日龄用ND油乳剂灭活苗免疫或10日和20日龄用LaSota疫苗二次免疫。     

O型口蹄疫病毒间接免疫荧光检测方法的建立

为建立猪O型口蹄疫病毒(FMDV)间接免疫荧光(IFA)检测方法,以猪抗O型口蹄疫病毒阳性血清为一抗、异硫氰酸荧光素(FITC)标记的SPA蛋白(葡萄球菌蛋白A)为二抗,通过反应条件的优化,建立检测方法。结果表明,IFA最佳工作条件为,一抗最适稀释度为1∶50,FITC标记的二抗的最适稀释度为1∶800,最适孵育时间均为1h。特异性试验表明,用建立的IFA检测方法只能检测O型FMDV,而A型、AsiaⅠFMDV型和猪水疱病病毒(SVDV)检测结果均为阴性。建立的检测O型FMDV抗原的IFA检测方法具有特异、敏感、简便、快速等优点,可用于FMDV感染的实验室诊断及其在感染机体中的定位和动态分布研究。     

表达H5亚型禽流感病毒HA基因的DNA疫苗免疫保护效力研究

 表达高致病力禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1) [GD/1/96(H5N1)]HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA5具有良好的免疫保护性,为了将其开发并应用于实际,对其免疫保护效力进行了进一步的研究。结果表明,用10、40、70、100和150g pCIHA5和油苗1次免疫后,其免疫保护率分别为12.5%(1/8)、58.3%(7/12)、72.7%(8/11)、50.0%(6/12)、66.7%(8/12)和100%(12/12),其中70和100g剂量组的病毒分离结果     

猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗原多肽的串联表达及活性鉴定

为获得含合成肽疫苗抗原多肽的重组表达蛋白,根据猪口蹄疫O型合成肽疫苗中抗原多肽的氨基酸序列,使用大肠杆菌偏好性密码子人工合成该抗原多肽的双拷贝基因序列,并克隆至表达载体pET32a中,构建原核表达质粒pET32a - P2.将重组质粒转化BL21 (DE3),经IPTG诱导表达,收集诱导的菌液进行SDS - PAGE电...     

猪口蹄疫与猪瘟猪肺疫双联苗同步免疫研究

 口蹄疫与猪瘟猪肺疫双联苗同步免疫与分步免疫对比试验。结果表明：同步免疫与先注射猪口蹄疫疫苗1月后再注射猪瘟、猪肺疫双联苗以及先注射猪瘟、猪肺疫双联苗1月后再注射猪口蹄疫疫苗3组注射反应率及免疫抗体效价差异不大,受试区随机抽查采集猪血清53头份进行抗体测定,猪口蹄疫免疫合格率为84.91%,猪瘟免疫合格率为84.9%,说明生猪一侧颈部深层肌肉注射猪口蹄疫O型灭活菌的同时另一侧可注射猪瘟、猪肺疫双联苗。     

口蹄疫病毒O型Cathay毒株的分离鉴定

[目的]研究FMD疑似组织病料,为口蹄疫相关研究工作提供试验参考。[方法]应用细胞培养、电镜观察、反向间接血凝试验、RT-PCR及测序技术对FMD疑似组织病料进行分离鉴定,确定其血清型及基因型。[结果]结果显示,分离鉴定的FMD疑似组织病料为O型Cathay口蹄疫病毒株。[结论]为口蹄疫的诊断、防治、流行病学调查及疫苗的研究使用奠定了基础。     

口蹄疫病毒O型病毒VP1蛋白表达及鉴定

利用大肠杆菌p ET-30a表达系统表达口蹄疫病毒(FMD)O型野毒株完整的VP1蛋白,并以Western blot试验进行鉴定。结果表明:VP1蛋白以可溶性表达,大小约为25 ku,可与标准O型口蹄疫病毒阳性血清特异结合。由此说明,口蹄疫病毒VP1原核表达蛋白有良好的反应原性,为构建口蹄疫病毒病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)和快速特异诊断试剂研制奠定基础。