饲用地衣芽孢杆菌抗逆性与益生性的体外评价

为了探讨地衣芽孢杆菌的抗逆性与益生性,研究通过5个试验评定地衣芽孢杆菌的耐高温、耐酸性、耐胆盐、抑菌性和黏附性,于85℃水浴分别处理地衣芽孢杆菌2.5 min、5 min、7.5 min模拟制粒条件;利用pH值分别为2,3,4的人工胃液模拟胃液环境;用0.3%的胆盐模拟肠液环境;抑菌试验测定地衣芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制能力;以蛋鸡肠道上皮细胞为模型测定地衣芽孢杆菌的黏附能力。结果表明:85℃处理地衣芽孢杆菌2.5 min后活菌数最高,与对照组相比提高了2.25%(P>0.05);用pH值为2,3,4的胃液分别处理,与对照组相比活菌数分别提高0.77%(P>0.05)、1.54%(P>0.05)、1.34%(P>0.05);地衣芽孢杆菌发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌环直径分别为0和16.16 mm;在黏附性试验中,每100个蛋鸡肠道黏膜上皮细胞上平均可以黏附27个地衣芽孢杆菌。说明制粒过程、人工胃液、人工肠液不影响地衣芽孢杆菌的活菌数,地衣芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌有显著抑制作用,使金黄色葡萄球菌基本不能在蛋鸡消化道内定植。     

6株猪源芽孢杆菌的分离鉴定及其益生性研究

本研究旨在通过高温处理和常规厌氧菌分离法从健康肥猪粪便中分离芽孢杆菌,并通过培养性状、生化试验、PCR、肠道耐受、抗菌活性和接种试验动物等方法鉴定筛选性状稳定、优良的益生性芽孢杆菌。结果显示,共分离到6株芽孢杆菌,其中1株巨大芽孢杆菌、1株死谷芽孢杆菌、2株解淀粉芽孢杆菌和2株枯草芽孢杆菌;分离菌对多黏菌素和青霉素耐药性较强,对其他12种常用药物较敏感,对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好;4种芽孢杆菌均可在酸性、高胆盐和高温条件下生存,特别是巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌耐受能力较强;分离的芽孢杆菌对小鼠均无致病性,其中巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌有较明显的促进试验动物生长的作用。结果提示,巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌可作为益生性芽孢杆菌的初步选择。     

猪源乳酸菌的抗逆性及益生性研究

在对猪肠道中分离到的乳酸菌的抗逆性和益生性进行研究,拟为获取可用于发酵饲料生产接种菌奠定基础。采用体外法,对筛选得到的11株乳酸菌进行耐酸、耐胆盐、抑菌、温度敏感性和耐抗生素试验检测。结果显示:11株乳酸菌中,编号为L71、L76和L104的乳酸菌株可耐受p H2.5环境,暗示其对胃酸环境有一定的耐受性;L33、L35、L37和L104菌株可耐受猪肠道的胆盐环境;L22、L24、L26、L71、L76和L96菌株发酵液上清对大肠杆菌K88、K99和鸡白痢沙门氏菌均有较好的抑制效果;L76和L96菌株对60℃温度具有一定耐受性;L71、L76和L96对抗生素最低耐受量在益生菌的测定最低限制浓度范围内。研究表明:编号为L71和L76的2株乳酸菌具有较好的抗逆性,有用作发酵饲料生产接种菌的潜力。     

降解黄曲霉毒素枯草芽孢杆菌的解毒性、抗菌性及抗逆性研究

试验对筛选得到的高效降解黄曲霉毒素B1、G1和M1的枯草芽孢杆菌(霉立解060菌)进行解毒活性、抗菌活性及抗逆性研究。将枯草芽孢杆菌发酵液分成上清液、菌悬液和胞内液组分,验证各组分对黄曲霉毒素的解毒效率。试验结果表明,枯草芽孢杆菌发酵后的上清液对AFB1、AFG1和AFM1的降解活性最高,确定发酵后的上清液中存在解毒活性组分;对解毒活性物质进行加热和蛋白酶K变性处理后,解毒活性显著降低,表明起解毒作用的活性物质是其分泌的一种胞外酶;试验进一步证明枯草芽孢杆菌具有显著抑制大肠杆菌、沙门氏菌以及金黄色葡萄球菌,抵抗胃酸、胆盐、高温等不利环境的特性,具有很强的抗菌性和抗逆性。     

一株土壤源地衣芽孢杆菌的鉴定及生物学特性研究

试验旨在筛选优质土壤源益生菌菌种资源,为畜牧生产中微生态制剂研发提供候选菌株。试验以北京市郊区农田土壤为材料,经紫外诱变、革兰氏染色和接触酶试验分离并筛选出1株对金黄色葡萄球菌具有明显抑制能力的菌株。通过16S rRNA基因进化分析和种属鉴定,判定该菌为一株地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）。进一步通过耐热、耐酸、耐胆盐和抗生素敏感性检测,发现该地衣芽孢杆菌在85℃处理10 min后存活率高达93.33%,pH为3.0及2.5时对其活性均影响较小,并且在0.3%、1.0%和2.0%的胆盐浓度下培养3 h仍可继续生长,表现出优良的抗逆性。通过与病原菌混合培养以及对多种致病菌的抑菌试验检测,发现该菌株对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有抑制作用。     

地衣芽孢杆菌对鸡致病性的研究

本文主要研究了地衣芽孢杆菌引起鸡病的流行病学、临诊症状变化、病原鉴定与免疫防治试验。从患病鸡脏器和渗出液，选分得鸡源（Ｓ１－Ｓ２０）２０个菌株，根据形态及染色特征、培养特性和生化鉴定Ｓ１－Ｓ２０均定为地衣芽孢杆菌。经试验动物小白鼠和本动物鸡的回归试验，大部分能发病，所表现的临诊症状、病理变化与自然病例基本一致，死后从脏器中分离到原注射菌。并进行了免疫攻毒试验。１９８８－１９９３年用研制的“鸡八联灭     

一株地衣芽孢杆菌的体外益生作用研究

本研究对从腊肉中分离得到的13株芽孢杆菌进行筛选,选择对大肠杆菌K88、K99具有最强抑制效果的一株菌,进行下一步的耐酸耐胆盐的试验,结果表明,筛选得到的这株芽孢菌能够很好地耐酸耐胆盐,用16SDNA基因片断的PCR扩增与序列分析,该菌株YB6与地衣芽孢杆菌的同源性为98％。本试验为动物饲用益生菌产品的开发和推广应用打下基础。     

一株新饲用乳杆菌的分离鉴定及益生性研究

从猪粪便中分离得到一株新饲用乳杆菌,对其16S rDNA基因进行了测序,该段基因序列已提交GenBank,登录号为HQ641209。将该菌株16S rDNA基因序列进行在线BLAST比对并与其他乳杆菌属菌株的16S rDNA序列建立系统发育树,结果显示该菌16S rDNA序列与NCBI公布的约氏乳杆菌Lactobacillus johnsonii (AB295648)的同源性为99.7%,因此该菌鉴定为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii),将其命名为"Lactobacillus johnsonii Sun001"。经测试,该菌株对E.coli K88、K99菌株的生长有抑制作用,在pH为2.5的模拟胃液中处理3 h存活率为68.8%,在0.3%胆盐浓度的模拟肠液中处理3 h存活率为21.4%。     

地衣芽孢杆菌的研究进展

本文就地衣芽孢杆菌的生物学特性、作用机理及其在饲料生产和环境防治中的应用作一综述。     

枯草芽孢杆菌BS2株和地衣芽孢杆菌BL1株对DDGS发酵条件的优化

试验旨在基于枯草芽孢杆菌BS2和地衣芽孢杆菌BL1的组合作用下对DDGS发酵条件进行优化,以提高DDGS的饲用价值。以DDGS中的醇溶蛋白含量为响应值,通过单因素试验、Plackett-Burman设计、响应面试验等途径对DDGS的发酵条件进行了优化。研究结果表明,当发酵条件为麦麸含量为10%、玉米蛋白粉含量为10%、蔗糖含量为6 mg/kg、KH₂PO₄含量为0.5 mg/kg、FeSO₄含量为0.2 mg/kg、MgSO₄含量为0.1 mg/kg、温度30℃时,发酵48 h后发酵底物中的醇溶蛋白含量最低。利用凯氏定氮仪测量,发酵混合物中醇溶蛋白含量为4.88 mg/100 mL,较优化前12.69 mg/100 mL降低了7.81 mg/100 mL。因此,运用响应面试验预测的该模型有一定的实践指导意义,为后续在DDGS发酵生产中的应用提供理论基础。     

饲用地衣芽孢杆菌的生物学特性研究

从饲料应用学的角度对地衣芽孢杆菌的各项特性进行测试,并总结出一套可行的试验方法和结果判断标准.通过对地衣芽孢杆菌的形态和生化培养性质观察,不同梯度的温度、酸度、胆盐和人工胃液处理对地衣芽孢杆菌存活率的影响,及常用药物添加剂和微量元素对地衣芽孢杆菌的影响,及地衣芽孢杆菌对几种致病菌和抗营养因子的影响进行研究.结果表明,地衣芽孢杆菌对各种试验处理呈现出特征性表现,这说明,地衣芽孢杆菌具备良好的饲料学特性,是优良的益生菌菌株.     

一株凝结芽孢杆菌的分离鉴定及益生性研究

试验旨在分离鉴定一株来源于池塘底泥的具有益生功能的凝结芽孢杆菌,并研究其益生性能。从自然池塘底泥分离得到一株产酸能力强的杆状细菌,通过生理生化特征分析和16S rDNA序列比对,鉴定分离菌为凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）。该分离菌株对大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、无乳链球菌和嗜水气单胞菌有抑制作用;在pH 2.5的模拟胃液中处理12 h存活率为71.9%;在胆盐浓度为0.3%的模拟肠液中处理12 h,存活率为84.4%。该分离菌株可有效降解亚硝酸盐,48 h降解率达到96.80%。将270只1日龄AA肉鸡分成3个处理组,日粮分别添加0（Ⅰ组）、1.0×10⁶（Ⅱ组）和1.0×10⁷ CFU/g（Ⅲ组）剂量的凝结芽孢杆菌NJ102,试验期42 d。结果显示,Ⅱ、Ⅲ组肉鸡的平均日增重和终末体重显著高于Ⅰ组（P<0.05）,料重比显著低于Ⅰ组（P<0.05）,各组间平均日采食量差异均不显著（P>0.05）。结果表明,来源于池塘底泥的凝结芽孢杆菌NJ102有一定的抗逆性和益生能力,能改善肉鸡的生长性能,具备作为微生物饲料添加剂开发的潜力。     

一株凝结芽孢杆菌芽孢抗逆性研究及其产孢条件优化

试验研究一株凝结芽孢杆菌BCRC11592的耐高温、耐酸、耐胆盐及对革兰氏阴性菌抑制的能力,并分析培养时间、温度、初始pH值、接种量和摇床转速等因素对菌体生长和产孢率的影响。结果证实该菌株芽孢有良好的抗逆性,具备开发为微生态饲料制剂的潜力。经优化后其最佳培养条件为培养时间24 h、温度40℃、初始pH值6.5、接种量106cfu、摇床转数140 r/min,在此条件下菌液活菌数为3.5×108cfu/ml,芽孢数为3.0×108cfu/ml,产孢率为85.7%。     

一株高产α-淀粉酶的地衣芽孢杆菌的筛选及鉴定

芽孢杆菌属的一些菌株对动物和人类具有广泛的作用而被认为是益生菌,其中地衣芽孢杆菌是芽孢杆菌中较具有应用潜力的菌种之一.本文从健康的鸡、鸭、鹅、马、牛、羊粪便及周边土壤中分离出12株芽孢杆菌,并通过产总淀粉酶活性和α-淀粉酶活性筛选出6株产淀粉酶的芽孢杆菌,通过形态学分析、生理生化分析及分子鉴定,确定产酶性能最优的1株芽...     

地衣芽孢杆菌产芽孢培养基和培养条件的优化

本研究以地衣芽孢杆菌CICC 20514为对象,芽孢数和芽孢率为目标参数,采用单因素、正交试验方法对培养基配方进行筛选,并在此配方基础上对培养条件进一步优化。结果表明：最终产芽孢发酵培养基的最佳组合为20 g/L果糖、20 g/L豆粕、5 g/L K₂HPO₄、7 g/L NaCl、0.8 g/L CaCO₃和0.8 g/L MgSO₄;产芽孢最佳培养条件为37℃,220 r/min,接种量5%,装样量20%,初始pH 6.5～7.5,发酵培养时间48 h。优化后的地衣芽孢杆菌CICC 20514培养基芽孢数及芽孢率均具有良好的稳定性,发酵液芽孢数达5.8×10⁹CFU/mL,比优化前提高了58倍。     

地衣芽孢杆菌对多宝鱼生长的影响

为探讨地衣芽孢杆菌对多宝鱼生长性能的影响,选用地衣芽孢杆菌作为多宝鱼饲料添加剂进行投喂试验。试验选择一批健康度良好、大小接近的多宝鱼幼苗120尾,进行随机分组,分为对照组和试验1组、试验2组、试验3组,每组30尾,对照组饲喂基础日粮,试验1组、试验2组、试验3组分别在饲喂添加105、107、109cfu/g密度的地衣芽孢杆菌的基础日粮。试验过程记录多宝鱼的体重变化、存活数、体长变换,然后通过计算成活率、质量相对增长率、体长增重率来判断地衣芽孢杆菌多宝鱼生长的影响。结果显示体长增长率试验3组、2组和对照组的相比差异显著（P<0.05）,试验3组和试验2组相比体长增长率有下降的趋势;质量增长率试验组和对照组相比增长率差异显著（P<0.05）,以试验2组的质量增长率最高;成活率试验2组和对照组对比差异极显著（P<0.01）,试验3组和对照组相比差异显著（P<0.05）,以上结果表明地衣芽孢杆菌能促进多宝鱼生长并提高其成活率,而且地衣芽孢杆菌添加密度的高或过低都不利于提高多宝鱼的生长。     

地衣芽孢杆菌对奶牛泌乳性能的影响

试验选用80头荷斯坦泌乳奶牛,按单因子随机配对设计,研究添加地衣芽孢杆菌制剂对泌乳奶牛生产性能的影响。结果表明,每千克精饲料中添加20亿单位的地衣芽孢杆菌产奶性能最好(p<0.05);奶品质有了改善但差异不显著(P>0.05)。