茶叶中聚酯型儿茶素研究进展

聚酯型儿茶素（Theasinensins, TSs）是一类儿茶素的氧化产物,是在茶叶加工过程中由于揉捻等工序使茶叶细胞破碎导致儿茶素与酶接触,进而氧化形成的。近年来,一些研究结果表明TSs具有一定的生理活性功能。本文就从TSs的发现、形成机理、分析方法、分离制备、药理作用方面进行综述。     

茶树悬浮细胞培养儿茶素的产生

利用植物细胞培养方法生产有用次生代谢产物,是植物生物工程研究的一个重要方面.茶树是次生代谢产物较为丰富的植物种类,尤其是以儿茶素为主要代表的多酚类物质,在茶树细胞中含量较高,因此,利用细胞培养方法生产儿茶素类物质具有天然的有利条件.茶树组织培养次生代谢产物形成的研究最早见于英国Forrest的报道,其后,原苏联科学家对茶愈伤组织中酚类化合物的形成也作了一系列研究.中国农业科学院茶叶研究所在茶树愈伤组织培养儿茶素的形成方面也进行了一系列的研究,证实茶树培养细胞在一定条件下不仅能够保持其次生代谢产物的合成能力,而且可以通过培养基组分调节等方法大幅度提高其儿茶素含量.本文着重讨论茶树细胞悬浮培养下培养基配方、接种量、碳源和氮源浓度、激素、培养基初始pH值等因素对儿茶素形成的影响.     

红茶色素形成机理的研究

在茶鲜叶匀浆悬浮发酵体系中, 加入铜酶抑制剂NaDDC可使茶黄素(TFs) 的总量下降,而其各组分的消长趋势则各异, 然而对茶红素(TRs) 的形成似乎并无明显的影响( 高浓度的NaDDC除外) , 表明TRs 的形成存在多条平行途径; 在发酵体系中加入不同比例蒸青叶( 酶已钝化) 的试验表明, 对TFs 和TRs 的形成量未产生影响, 说明酶浓度不是红茶发酵的限制因子; 降低发酵体系的pH (pH=4-0) , 虽然使多酚氧化酶(PPO) 和过氧化物酶(POD) 的稳定性明显下降, 且PPO活性降幅大于POD, 但由于减缓了TFs 的非酶性氧化消耗速率, 因而TFs 的含量显著增加。     

茶儿茶素体外氧化产物分析

采用体外模拟发酵, 对从绿茶中提取的茶多酚( 其中儿茶素含量为78-09 % ) 进行酶促氧化、化学氧化和自动氧化, 制取茶色素, 经HPLC分析, 结果表明, 酶促氧化和化学氧化的产物吸收峰均能得到明确分辨, 其保留时间与红茶汤中茶色素成分相吻合, 而自动氧化的产物中则缺少TFs。优化的化学氧化法制得的茶色素中, TFs 和TRs1 含量高于酶促氧化制品。     

茶黄素、儿茶素和绞股蓝皂苷复方制剂降脂作用研究

以1 mmol·L^-1油酸孵育HepG2细胞24 h,建立体外高脂模型,在细胞存活率实验（MTT法）的基础上,以脂质清除率为指标,评价茶黄素（TFs）、儿茶素（Cs）和绞股蓝皂苷（SPs）的体外降脂效果;并结合Box-Behnken响应曲面法（RSM）对3种物质体外联合降脂的浓度进行优化。结果表明：茶黄素、儿茶素和绞股蓝皂苷均能清除肝细胞内堆积的脂肪,若三者同时作用,协同效果明显,能起到防治高血脂症的作用。     

咖啡碱和蛋白质对酯型儿茶素氧化形成TFDG的影响

对咖啡碱（CAF）和牛血清白蛋白（BSA）在双酯型茶黄素形成中的影响进行了研究分析。结果表明,咖啡碱和牛血清白蛋白对TFDG的形成均有明显的抑制作用,而且相同条件下,牛血清白蛋白和咖啡碱表现出相似的抑制作用。当牛血清蛋白与咖啡碱同在一个化学氧化反应体系中时,表现出随浓度不同而呈现复杂的竞争或协同作用。     

茶树酯型儿茶素水解酶鉴定及其检测体系的建立

本试验利用体外酶学方法,结合薄层层析（TLC）、高效液相色谱（HPLC）和液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析,首次从茶树中检测到活性较高的酯型儿茶素水解酶（Galloylated Catechins Hydrolase,GCH）的存在。在酯型儿茶素水解酶催化下,酯型儿茶素发生水解反应,生成没食子酸（GA）和非酯型儿茶素。试验确立了酯型儿茶素水解酶的最适检测体系,在2.5mL反应体系中包含0.2mmol/L酯型儿茶素、2.4mmol/L抗坏血酸、粗酶提取液若干（含0.1mg酶蛋白）和0.1mol/L磷酸缓冲液（pH6.5）,在30℃下,反应30min。此外,试验利用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析对该酶进行了初步纯化。     

儿茶素抑制蛋白质类老年色素荧光物质生成活性的研究

丙二醛(Malondialdehyde,MDA)是机体内普遍存在的活性羰基化合物代表成分之一,能够与蛋白质发生羰-氨交联反应,生成老年色素荧光物质。本文探讨儿茶素单体成分对MDA应激引起的蛋白质类老年色素荧光物质生成体系的影响,并对其构效关系进行初步分析。结果表明:儿茶素能显著抑制MDA诱导的蛋白质类老年色素物质生成,且酯型儿茶素活性较强,抑制作用除与直接清除MDA外,还与其结构的亲核性有关。本研究从一个新的角度揭示了儿茶素抑制羰-氨交联反应是其预防和治疗羰基应激相关疾病的潜在作用机制之一。     

儿茶素在食用植物油中的抗氧化应用效果

采用一种食用有机溶剂溶解儿茶素,而后添加到新鲜的植物油中,比较儿茶素与几种常用的合成抗氧化剂在植物油中的抗氧化效果,并用ＮＤ－１００１ＤＰ测色色差计测定儿茶素的氧化产物对油脂色泽及清亮度的影响。结果显示,儿茶素的抗氧化效力强于ＢＨＴ、ＴＢＨＱ和维生素Ｅ等合成抗氧化剂。不过,儿茶素氧化后对油脂的色泽及清亮度有一定影响,但可通过添加某些有机酸（如柠檬酸等）增效剂加以改善。文中还对儿茶素在植物油中的抗氧化机理和中介物质进行了讨论。     

茶儿茶素对鱼油的抗氧化活性

研究了添加茶儿茶素对鱼油中多烯脂肪酸（ＤＨＡ、ＥＰＡ）分解和过氧化物形成的抑制效果。结果表明，茶儿茶素可有效地抑制鱼油的过氧化物形成和多烯脂肪酸分解，在相同的温度（３０℃）条件下，茶儿茶素的抗氧化活性优于维生素Ｅ     

茶儿茶素对癌细胞凋亡作用的研究

本文研究茶儿茶素诱导白血病癌细胞凋亡的作用及其机理。结果表明 ,茶儿茶素 (包括EGCG ,ECG和EGC)在浓度超过 5 0 μg ml时促进白血病癌细胞的凋亡 ,并在 5 0～ 30 0 μg ml浓度范围内存在正的量 -效关系。茶儿茶素诱导癌细胞凋亡的可能机理之一是促进自由基的产生 ,并抑制癌细胞的抗氧化酶     

清香型乌龙茶品质形成过程中儿茶素类和嘌呤碱指纹图谱变化规律

分别以铁观音、黄棪、金观音和黄观音品种春茶新梢为供试材料,对其新梢生育及清香型乌龙茶制作过程中的儿茶素类和嘌呤碱进行高效液相色谱检测分析,结果表明该方法的稳定性、精密度和重现性等符合茶样儿茶素类和嘌呤碱指纹图谱构建要求。运用指纹图谱数据处理软件ChemPattern 2.0专业版对所获得的指纹图谱数据进行相似度分析、聚类分析和主成分分析均可获得较为一致的模式识别结果。在茶树新梢生育过程中,各茶样指纹图谱存在较大差异,且能与清香型乌龙茶在制品（Work in process, WIP）指纹图谱相区分;采用聚类分析法（欧氏距离-近邻法）,尤其是主成分分析法（Log变换数据预处理）,可实现清香型乌龙茶在制品的品种鉴别。各茶树品种在新梢生育过程中以EGC含量变化最为明显,其次为EGCG和咖啡碱;在清香型乌龙茶制作过程中则以EGCG变化较为明显,其次为EGC。儿茶素类和嘌呤碱在新梢生育过程中含量及组成的动态变化较在清香型乌龙茶制作工艺中的变化更为明显。     

茶多酚中儿茶素类的HPLC分析方法学考察

本文建立了一种非梯度洗脱的儿茶素HPLC定性定量分析方法 ,同时对茶多酚中的四种主要儿茶素(EC ,EGCG ,ECG ,EGC)考察了其方法学。得到最佳色谱条件为 :ODS (5 μm ,4 6× 2 5 0mm)柱 ,以重蒸水∶乙睛∶乙酸乙酯 =86∶12∶2 (v v v)为流动相 (浓硫酸调pH值至 3 0～ 4 0 ) ,流速为 1 0ml min ,UV检测波长 2 80nm。探讨了分离测定条件并验证其精密度及方法的稳定性     

儿茶素体外氧化制备茶黄素的研究

对儿茶素通过体外酶促氧化和化学氧化定向制备茶黄素进行了研究,并对两种制备途径进行了比较。酶促氧化结果表明,发酵80分钟时,茶黄素的生成量最高(为15.05%)。化学氧化结果表明,以大叶儿茶素为材料,浓度为10βmg/ml, 氧化剂的比例为2:3:1（儿茶素: K₃Fe(CN)₆:NaHCO₃）时,有利于茶黄素类物质的形成。     

摊放环境对名优绿茶鲜叶茶多酚及儿茶素组成的影响

以单芽或一芽一叶茶鲜叶为原料,设置连续(78%～61%)摊放水分处理和不同环境条件摊放试验处理,分别进行液氮固样和冷冻干燥,测定茶多酚和儿茶素组分含量,研究摊放过程和摊放环境对茶多酚和儿茶素组成变化的影响。结果表明,摊放过程中茶多酚和儿茶素总量呈现前期下降后期有所上升的趋势,酯型儿茶素总量逐渐下降,EGC、EGCG,EC及GCG等儿茶素组分呈逐渐下降趋势,而C,ECG等组分呈逐渐上升趋势,鲜叶和摊放叶中检测不到没食子酸儿茶素(GC)。在摊放叶含水量控制在70%左右的前提下,环境温度与湿度对摊放过程中的化学成分变化有明显的影响,低湿环境下(60%)的茶多酚和儿茶素总量呈下降趋势,高湿环境下(90%)的茶多酚和儿茶素总量呈上升趋势,而中湿(75%)对茶多酚和儿茶素总量的影响与环境温度关系密切。     

36份茶树种质资源所制武夷岩茶毛茶的内含成分分析

文章以武夷山地区36份茶树种质资源样品为试验样本,通过测定样品中L-茶氨酸(L-The)、儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、没食子酸(GA)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)、咖啡碱(CAF)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)8种组分的含量,分析武夷岩茶初制加工中不同茶树种质资源之间、鲜叶和毛茶之间生化成分含量的差异。通过聚类分析,将36份茶树种质资源分为3类,发现各类群间GA、EGC、EGCG和儿茶素总量均存在一定的差异。通过对比毛茶与鲜叶各内含成分的转化保有率发现,经过武夷岩茶初制加工工艺后,L-茶氨酸和儿茶素总量的损耗率不超过20%,咖啡碱含量变化不大,没食子酸含量平均提高了40%以上。研究为了解武夷岩茶初制加工工艺,稳定茶叶产品质量提供了一定的数据基础。     

Effect of Girdling at Various Positions of ‘Huang Zhi Xiang’ Tea Tree (<Emphasis Type="Italic">Camellia sinensis</Emphasis>) on the Contents of Catechins and Starch in Fresh Leaf

The contents of starch and catechins in the fresh leaf of 'Huang Zhi Xiang' Oolong tea trees girdled at the bottom, middle (on the big branches) and top (on the small branches) were determined. The study demonstrated that the starch contents from girdled trees were significantly higher (p<0.05) than that from non-girdled ones. Furthermore, the contents of (-)-epicatechin (EC), (-)-epigallocatechin (EGC), total catechins (TC) and simple catechins (SC) from girdled trees were significantly higher (p<0.05) than those from non-girdled ones. Especially, the contents of (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), (-)-epicatechin gallate (ECG) and catechin gallate (CG) from girdled at the middle were also significantly higher (p<0.05) than those from the non-girdled. The starch contents were negatively correlated with the contents of (-)-gallocatechin (GC), EC, SC, TC and EGC, while positively correlated with the contents of EGCG and CG in fresh shoots.     

EGCG氧化产物不同级分的分析及其抗氧化活性的研究

利用乙酸乙酯在中性和酸性条件下萃取EGCG氧化产物,得到级分A(EOPA)和级分B(EOPB),用化学发光法比较EGCG与EOPA、EOPB的抗氧化活性及其对DNA损伤的保护作用,并通过HPLC-MS分析两级分中的氧化产物。结果表明EGCG及EOPA、EOPB均有较好的清除活性氧和保护DNA损伤的活性,其中EOPA的活性强于未氧化的EGCG。HPLC-MS分析表明,EOPA、EOPB级分中的氧化产物均为二聚体。