用对虾的致病病毒人工感染克氏原螯虾

用从对虾闰料提取的无包埋体对虾病毒（ＮＯＳＶ）人工接种淡水的克氏原螯虾,螯虾发病死亡。再用死亡螯虾组织接种健康螯虾传代,传至第９代,接种的螯虾每代都发病死亡。用显微镜发病螯虾的组织切片,发现其胃,前肠上皮,鳃,结缔组织等的细胞核明显肿在和嗜伊红着染。经超薄切片观察,在发病螯虾的胃肠部,鳃组织的细胞核内有大量的杆状样病毒粒子,病毒大小为１１０－１４０ｎｍ×３４０－４３０ｎｍ,有囊膜,在细胞核内不形成     

用酶联免疫吸附试验检测马铃薯卷叶病毒

本文介绍用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法快速检测马铃薯叶片及块茎内的马铃薯卷叶病毒(PLRV),检测叶片的最高稀释倍数为1/128,检测块茎的最高稀释倍数为1/64。马铃薯病株的顶部叶片和底部叶片的病毒含量不同,而又没有一定的规律性。马铃薯感染PLRV后可表现为底叶卷叶、部分全株卷叶或顶叶卷叶,有的品种无症;还有一部分植株虽然表现出各种卷叶症状,但并不是由PLRV所致。我院马铃薯育种圃内常用的杂交亲本的带毒率为31.21％;在黑龙江省的几个主栽品种上均可检测到PLRV。     

用酶联免疫吸附试验检测马传染性贫血病毒抗体

用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测马、骡传染性贫血抗体,并与琼脂扩散沉淀试验(AGID)相比较,结果ELISA检出率为84.26％—96.45％,AGID相应为25.67％—47.87％,前者检测效果优于后者。     

PCR检测对虾白斑综合征病毒的组织特异性

该研究提取了95%酒精保存的病虾组织(鳃、肌肉、表皮、附肢和复眼)的基因组总DNA,并进行了对虾白斑综合征病毒的PCR检测。琼脂糖凝胶电泳结果显示,病虾组织(鳃、肌肉、表皮、附肢和复眼)有轻微的跑带现象,鳃和肌肉比表皮、附肢和复眼的基因组总DNA电泳条带亮。PCR检测结果发现,对虾不同组织的阳性检出率高低顺序如下:鳃肌肉=表皮附肢复眼。研究结果说明,鳃和肌肉可作为对虾白斑综合征病毒PCR检测的合适部位。     

实时定量PCR快速检测对虾白斑综合症病毒

根据对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的保守序列,利用Primer Express2.0软件设计引物和Taqman探针,建立了WSSV的实时定量PCR检测体系.构建含有WSSV目的扩增片段的质粒为标准品,进行定量PCR扩增,结果表明标准品浓度在1.5×107～1.5×101个拷贝之间有S型扩增曲线,检测限为15个拷贝.标准曲线中模板浓度(X)与Ct值的关系为:Ct=-3.77 lgX+43.73,相关系数R2=0.9967.该检测方法特异性强,对传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)、斑节对虾杆状病毒(MBV)、肝胰腺细小病毒(HPV)以及对虾基因组DNA没有扩增反应.运用该方法对100尾对虾样品进行检测,14个对虾样品为阳性.而运用巢式PCR检测只有4个对虾样品为阳性.实时定量PCR方法检测WSSV,快速、特异、灵敏,在虾病的临床检测上具有重要意义.     

用酶联免疫吸附试验诊断鹿脑脊髓丝虫病研究

首次报道了应用牛腹腔丝虫成虫ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析抗原进行了ＥＬＩＳＡ诊断鹿脑脊髓丝虫病的新方法。结果证明，该种方法特异性强，敏感性高和重复性好（６．３％）。     

应用酶联免疫吸附测定技术检测香蕉束顶病毒

为探讨快速而准确的检测香蕉束顶病毒的方法,采用本所制备的香蕉束顶病毒多克隆抗体ＩｇＧ和台湾的香蕉顶病毒单克隆抗体２Ｈ６,用酶联免疫吸附测定技术双抗体夹心法测定了漳州市天宝的香蕉束顶病病株。试验结果表明,多抗和单抗相结合的ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ法能检测到病组织汁液的最大稀释度为１：６４０,而单独使用单抗的最大稀度为１：１０。     

对虾白斑综合症病毒PCR检测体系的优化研究

通过改进WSSVPCR模板制备方法、引物的筛选、PCR反应的优化,建立稳定的WSSVPCR检测体系。结果表明,该体系具有稳定、快速、灵敏等特点,可用于生产中对WSSV的检测。     

对虾病毒的分离纯化和检测方法研究进展

对虾病毒的研究始于本世纪70年代［Couch1974］，全世界现已发现的对虾病毒至少在18种以上［陈细法等1997］。自1993年我国沿海地区暴发大面积养殖对虾病毒性流行病以来，病毒病的不断发生与传播已给我国养虾业造成了空前的危害，全国养殖对虾产量从1992年的220000t跌至1993年的87000t和1994年的53000t［石拓等1998］。1995～1997年养殖对虾的产量仍在低水平线上徘徊。时至1998年6月上旬，在未采用对虾病毒病综合防治技术［WangAL和WangWN1996］的大部分养虾区，当养殖对虾体长达到30～4Omm时即纷纷死亡。虾病不仅未随时间的推移有所减…     

对虾病毒的分离纯化和检测方法研究进展

对虾病毒的研究始于本世纪70年代［Couch1974］,全世界现已发现的对虾病毒至少在18种以上［陈细法等1997］。自1993年我国沿海地区暴发大面积养殖对虾病毒性流行病以来,病毒病的不断发生与传播已给我国养虾业造成了空前的危害,全国养殖对虾产量从1992年的220000t跌至1993年的87000t和1994年的53000t［石拓等1998］。1995～1997年养殖对虾的产量仍在低水平线上徘徊。时至1998年6月上旬,在未采用对虾病毒病综合防治技术［WangAL和WangWN1996］的大部分养虾区,当养殖对虾体长达到30～4Omm时即纷纷死亡。虾病不仅未随时间的推移有所减…     

百合无症病毒的ELISA检测

对两个百合品种应用ELISA检测法进行百合无症病毒检测,发现样品、阳性对照与底物的反应均表现出阳性,结果表明样品100%带有LSV病毒.     

棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒粒子单克隆抗体及抗原特性分析

经多角体碱溶超离心和柱层析纯化的棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒(HaSNPV)粒子作为抗原,通过细胞融合,得到3株分泌抗HaSNPV单克隆抗体的杂交瘤细胞D_2、B_8和D_7,相应抗体的效价MAD_2为10,MAB_8为50,MAD_7为1000。其中MAB_8为构象决定簇抗体,MAD_2和MAD_7为顺序决定簇抗体。用SDS-PAGE,Western-blot和ELISA方法确定MAD_2对应的抗原决定簇多肽大小为56kd和96kd,MAD_7对应56kd多肽。在不同病毒株系鉴别中发现MAD_2,MAD_8为HaSNPV特异,而MAD_7则对大袋蛾单粒包埋核型多角体病毒(CvNPV)发生交叉反应。另外用ELISA法检测了HaSNPV在体外细胞系统中的增殖动态。     

酶联免疫吸附试验检测鸭瘟抗体的研究和应用

应用提纯的鸭瘟病毒作为包被抗原，建立了用于检测鸭瘟抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）间接法。试验结果表明，该法特异性高（与鸭病毒性肝炎等１３种病的阳性血清不发生交叉反应），与血清中和试验的符合率为１００％但其敏感性比血清中和试验至少要高１０００倍，且重复性好，结果可靠，用于大批量样品的检测大约经６小时即可获得结果，是一种适合于血清流行病学调查、进出口鸭对鸭瘟的检疫和对鸭群进行免疫抗体水平检测的敏感、快速、准确性高、特异性强、重复性好且简便实用的方法。     

多角体病毒琼脂免疫双扩散和ELISA检测研究

用提纯的SpltNPV、AcNPV病毒粒子分别为免疫抗原获得抗血清,以此抗血清为抗体,提纯的SpltNPV、AcNPV多角体裂解所得粗提纯病毒粒子为检测抗原,初步建立两种病毒的琼脂免疫双扩散法和ELISA间接检测方法.琼脂免疫双扩散结果表明：所得抗血清能识别粗提抗原,但不能与细胞培养的病毒粒子反应.两种病毒I-ELISA检测灵敏度分别达11.23、11.67 ng.     

异源多角体蛋白包装对重组家蚕核型多角体病毒感染性的影响

 将 Ac MNPV的 polh基因克隆到缺失 polh基因的 Bm NPV(API4)基因组中 ,得到被 Ac MNPV多角体蛋白包埋并可表达慈菇蛋白酶抑制剂的重组病毒 Bm NPV(OAc- API4)。发现它的芽生型病毒能感染家蚕细胞和经皮下注射感染家蚕幼虫 ,但包埋型病毒不能经口感染家蚕幼虫。