新疆主栽苹果品种ISSR分析及富士芽变优系分子鉴定

以新疆主栽苹果品种及富士芽变优系为材料,进行了ISSR(Inter-simple sequence repeat)分析,构建了17个苹果品种的指纹图谱,并聚类分析确定不同苹果品种的亲缘关系。从100个ISSR引物中,共筛选出3个多态性好、稳定且重复性好的引物(UBC846、UBC881和UBC895)。17个苹果品种共在41个位点上扩增出条带,多态性条带百分率为77.2%。UBC895引物能够把富士芽变优系和长富2号品种清楚地区分开,构建的数字化指纹也可以清楚地鉴定其他苹果品种。聚类结果与传统的苹果谱系相一致,表现出ISSR分子标记在品种鉴定和亲缘关系分析中的稳定性和可行性。     

优变梨橙材料的RAPD分析

永川梨橙1号和永川梨橙5号是优良芽变材料,为确定这两份材料的性状究竞属于遗传变异还是环境饰变及其来源,实验采用RAPD对永川梨橙1号、永川梨橙5号和普通梨橙、锦橙一起进行了分析。结果表明：在70个引物中有6个引物可扩增出条带,共计94条,其中多态性条带数为27条,平均每个引物出现多态带4．5条。特别是引物J039、S150和S304可清晰的区分开这4份材料。聚类分析发现,梨橙和锦橙遗传相似系数在90％左右,永川梨橙1号与普通梨橙遗传上最为相似,而永川梨橙5号与梨橙亲缘关系则相对较远,表明其发生了较大程度的变异,这与其生物学性状的表现是吻合的。     

优变梨橙材料的RAPD分析

永川梨橙1号和永川梨橙5号是优良芽变材料,为确定这两份材料的性状究竞属于遗传变异还是环境饰变及其来源,实验采用RAPD对永川梨橙1号、永川梨橙5号和普通梨橙、锦橙一起进行了分析.结果表明:在70个引物中有6个引物可扩增出条带,共计94条,其中多态性条带数为27条,平均每个引物出现多态带4.5条.特别是引物J039、S150和S304可清晰的区分开这4份材料.聚类分析发现,梨橙和锦橙遗传相似系数在90%左右,永川梨橙1号与普通梨橙遗传上最为相似,而永川梨橙5号与梨橙亲缘关系则相对较远,表明其发生了较大程度的变异,这与其生物学性状的表现是吻合的.     

短枝条红型红富士苹果芽变的ISSR鉴定

[目的]利用ISSR分子标记技术对选择的富士芽变优系和12个苹果品种为材料进行分子鉴定,构建指纹图谱,并且根据聚类分析的结果确定这13个苹果品种的亲缘关系.[方法]从100条ISSR引物中对供试样品进行PCR扩增筛选,采用NTSYSpc2.10t软件根据Nei's遗传相似系数采用UPGMA法进行聚类,此分析亲缘关系,并采用POPGENE1.32软件计算多态性位点数、多态性点百分率,最终筛选出条带清晰、多态性较高、稳定且重复性好的引物.[结果]从100个ISSR引物中筛选出3个多态性高、重复性好的引物,分别为UBC846、UBC881和UBC899,共在57个位点扩增出条带,其中50个为多态性位点,平均多态性位点百分率为86.11;.利用3条多态性ISSR引物构建的数字化指纹能够有效地区分出所有供试材料,且建立了13个苹果品种的亲缘关系聚类图,这13个品种的相似系数的变化范围在0.67 ～0.82,表现出较高的遗传多样性.[结论]ISSR分子标记技术可以有效地用于苹果种质资源评价、指纹图谱的构建和苹果芽变品种的鉴定,为苹果的种质资源鉴定、遗传多样性检测和栽培育种提供了分子生物学依据.     

24份葡萄种质亲缘关系的ISSR分析

利用ISSR标记对24份葡萄材料进行了基因组多态性分析,从50条引物中筛选出6条扩增稳定且多态性丰富的引物用于葡萄的ISSR扩增。共扩增出59条条带,其中多态性条带53条,多态性百分率为90%。根据ISSR扩增结果,利用NTSYSpc2.10e软件进行Jaccard相似性系数分析,24份葡萄材料的遗传相似系数为0.42～0.88,平均遗传相似系数为0.6495。在遗传相似系数为0.55处,24份葡萄材料明显分为2大类群。第1类包含10个欧美杂种、7个欧亚种、1个华欧杂种,第2类包含3个美洲杂交种、1个河岸葡萄、1个冬葡萄、1个东亚葡萄。由此可见,美洲杂交种与欧美杂种、欧亚种葡萄的亲缘关系较远,欧美杂种与欧亚种葡萄之间亲缘关系较近。此外,引物BC820与引物BC847分别在我国自主选育砧木品种华佳8号与抗砧3号中扩增出一条特异条带,可为利用ISSR标记鉴定葡萄品种或品系提供参考依据。     

中华山蓼克隆的分子鉴定

采用ISSR分子标记对21个中华山蓼克隆进行了鉴定,结果表明:从100个ISSR引物中筛选出8个引物,对21个中华山蓼克隆进行DNA扩增,共扩增出84个清晰条带,其中44条具多态性,平均多态比率为52.4%。共扩增出73种条带类型,其中特异性条带类型为40种。综合分析这些条带类型,可知只要通过8个引物中的3个即可将所有的克隆鉴定出来,表明ISSR技术在分子水平上鉴定中华山蓼的克隆是一种行之有效的方法。     

鄂柑一号椪柑少核芽变的AFLP分析

利用AFLP技术,对鄂柑一号椪柑(Citrus reticulata Blanc.cv.ponkan)的3个少核芽变及其母株进行分子鉴定。筛选了64对引物,有60对引物可扩增出清晰的条带,共获得2 281条清晰的扩增谱带,其中有9对引物可扩增出明显多态性条带,多态性位点共15个,占总数的0.66%。结果表明,鄂柑一号椪柑的少核芽变由遗传物质改变引起,通过AFLP技术可以有效鉴定。     

两性花毛葡萄野酿2号芽变株系Y137的鉴定及评价

[目的]鉴定评价毛葡萄品种野酿2号的芽变株系Y137,为两性花毛葡萄优良新品种(系)提供亲本材料.[方法]对野酿2号芽变株系Y137进行形态学特征、生物学特性、果实品质特性等方面的观察及测定,以野酿2号为对照进行对比分析;并利用ISSR分子标记对芽变株系Y137进行遗传变异分析.[结果]芽变株系Y137在形态学特征、生物学特性、果实品质特性等方面与野酿2号存在明显差异:芽变株系Y137幼果为圆形,野酿2号幼果为椭圆形;芽变株系Y137成熟期比野酿2号提早7~10 d;芽变株系Y137可溶性总糖含量和糖酸比分别比野酿2号提高66.40%和90.64%,可溶性固形物含量比野酿2号提高15.5%.筛选出的9条引物共扩增出57条条带,多态性条带为7条,多态性比例为12.28%,遗传相似系数为0.8772,说明芽变株系Y137与野酿2号的基因组DNA存在差异,但遗传背景相似度较高.[结论]芽变株系Y137部分果实品质指标优于野酿2号,初步判定其为野酿2号的优良芽变,可作为毛葡萄新品种选育及品种改良的亲本材料.     

艳红桃芽变品系彩虹的RAPD分析

为进一步确认芽变性状的可遗传性,对桃品种艳红自然变异原株的变异枝(YC0)及其无性系第一代(YC1)、艳红自然变异原株的正常枝(YY)2个品种(系)3个样品进行了RAPD分析.结果表明:从20个引物中筛选出13个随机引物,其中,共扩增出条带110条,平均每个引物扩增8.5条,其中引物LC17扩增出多态性条带,可用作鉴定...     

基于SSR分子标记的象草变异分析

【目的】从分子水平上确认能够在四川泸州叙永县东牛牧场自然越冬并且含糖量有明显差异的7个单株象草材料是否存在遗传变异。【方法】对8份供试材料进行含糖量测定并利用SSR分子标记进行引物筛选及PCR扩增。【结果】22对引物共扩增出166条清晰有效的条带，其中有114条多态性条带，多态性条带比率为68.67%。聚类结果表明，8份供试材料间的遗传相似系数在0.560～0.795之间，SA-4和桂牧1号的遗传相似系数最小，亲缘关系较远。【结论】根据不同引物扩增出现的特异性条带，推测含糖量最高的SA-4是桂牧1号的芽变材料。该结果为象草芽变新材料选育提供了分子生物学依据。     

3种中间砧对长果形纽荷尔脐橙树体特性和果实品质的影响

将罗伯逊脐橙36号、锦橙和国庆1号温州蜜柑作为长果形纽荷尔脐橙的中间砧（基砧为枳）进行田间试验研究，结果表明：罗伯逊脐橙36号的冠幅和树冠体积最小，锦橙的春梢和夏梢生长量均最小，而秋梢则反之；中间砧粗度和接穗粗度均表现为锦橙、罗伯逊脐橙36号、国庆1号依次递减；3种中间砧与接穗在亲和性上无显著的差异。罗伯逊脐橙36号花量过大，国庆1号花量过小，锦橙花量适中且单株产量最高。罗伯逊脐橙36号在果实综合品质表现上略好。3种中间砧对中片光合色素含量与相对组成有显著的影响；对叶片糖分含量有明显的影响。对叶片P含量影响无显著性差异，对叶片的N、K、Fe、Ca含量有显著的影响。     

豫南引进茶树品种叶片形态、结构特征与抗性评价研究

通过扫描电镜、石蜡切片等方法对豫南引进的茶树(Camellia sinensis L.)品种舒茶早、白毫早、平阳特早、迎霜、乌牛早、碧香早等的叶片形态特征及结构特征进行了观察分析.结果表明,乌牛早、白毫早的抗旱、抗寒能力较强,舒茶早、迎霜、碧香早的抗旱、抗寒能力中等,平阳特早的抗旱、抗寒能力较差.因此,在常受干旱、寒害的豫南茶区,乌牛早、白毫早为适宜推广的品种.     

品种及添加春副茶对夏秋季颗粒绿茶品质的影响

分别采用川茶群体种(小叶种)、福鼎大白(中叶种)、蜀永3号(大叶种)3个品种的夏秋季纯鲜叶原料加工颗粒绿茶以及纯鲜叶原料添加春副茶加工颗粒绿茶,对它们的品质进行了比较分析.结果表明:以川茶小叶群体种纯鲜叶原料加工的颗粒绿茶综合品质最好,蜀永3号居中,福鼎大白最差;添加春副茶对夏秋季颗粒绿茶的香气和滋味有改善作用,特别是对滋味的改善效果明显.     

对茶树炭疽病菌具拮抗作用的茶树内生细菌的筛选

从黄观音、茗科1号、福鼎大毫茶、福鼎大白茶、福安大白茶5个供试品种中分离到茶树内生细菌共79株,并利用平板对峙法筛选出对茶炭疽病菌具有较强拮抗作用的茶树内生细菌5株,测定结果表明其对茶炭疽病平均抑制率达到60.09%.利用普通光学显微镜和扫描电镜观察,发现目标菌株均可有效抑制茶炭疽病菌菌丝的生长.     

光山县茶树品种调查与评价

对光山县茶树品种资源进行了一次全方位的调查与评价。2007年,光山县茶园面积达8333.3 hm2,现有无性系品种福鼎大白茶、龙井43、龙井长叶、乌牛早、白毫早、迎霜、安吉白茶、劲峰、碧云、浙农12号、茂绿、福鼎大毫等12个,栽培面积2100.0 hm2,占全县茶园总面积的25.2%;有性系茶树品种有:本地群体种、信阳群体种、祁门槠叶群体种、福鼎大白、龙井43、鸠坑、湘波绿等7个品种,种植面积达6233.3 hm2,占全县茶园总面积的74.8%。     

不同抗性香蕉品种遗传多样性的ISSR分析

利用香蕉枯萎病的病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种,对巴西蕉、粤科1号、粤科3号、抗枯1号、粉杂1号、农科1号等香蕉品种进行离体叶片的病原菌接种试验,结果显示,不同香蕉品种对枯萎病的抗性存在明显差异,其中巴西蕉最感病,其他品种都具有不用程度的抗性。对不同香蕉品种(包括抗枯5号)进行ISSR分子标记试验,从100条ISSR引物中筛选出19条扩增效果好、多态性高、重复性好的ISSR引物用于遗传多样性分析,共检测到121个条带,其中98个为多态性条带,多态性比率达81.0%;记录ISSR标记的多态性数据,用NTSYS2.10e软件计算得到Dice相似性系数为0.57～0.94,表明香蕉品种间遗传背景丰富,UPGMA法聚类将7个香蕉品种分为两大类群。综合分析表明,不同香蕉品种对枯萎病的抗性强弱与其遗传相似性之间没有明确的相关性。     

Marker Assisted Selection in Citrus Rootstock Breeding Based on a Major Gene Locus 'Tyr1' Controlling Citrus Nematode Resistance

Based on the former constructed 'Tyr1' locus genetic map in family 9145, from LB6-2 [Clementine mandarin (C. reticulata) x Hamlin orange (C. sinensis)] x Swingle citrumelo (C. paradise × P. trifoliata), 9 markers were chosen for application in evaluating their effectiveness in marker-assisted selection (MAS) for citrus rootstock breeding program from many F1 progeny of Poncirus trifoliata. As the mapping revealed that these markers were estimated within a range of 12.1 cM in the linkage group, and among them, SCO07 co-segregated with 'Tyr1', and 7A4R as the closest to 'Tyr1' with a distance of 1.5 cM, these markers were basically fitful to go MAS screening. The results of screening P. trifoliata F1 progeny indicated that all the markers were inherited in codominant fashion and most of them were heterozygous on PT (Pomery of P. trifoliata)., marker 4L17R/CfoI and 7A4(1407)/BfaI were proved to be consistently reliable for accurate scoring of genotypes and the revealed polymorphism was basically coincided with the citrus nematode resistant phenotype within tested populations. The polymorphic genotype with marker 4L17R/Cfo1 was found completely matched up with the phenotype of individuals that conferred high resistance to citrus nematode when the USDA hybrid rootstocks were screened. Utilization of these markers, especially the highly specific 4L17R/CfoI and 7A4(1407)/5/a/, should result in great benefit to world citrus industry for early selection in rootstock-breeding program.     

2种不同中间砧/基砧组合的纽荷尔脐橙树体特征和营养特性

通过连续2a田间试验，比较纽荷尔脐橙高接在2种不同基砧／中间砧组合上的树体特征和营养特性差异，表明锦橙／红桔组合投产显著地晚于国庆1号温州蜜柑／枳组合(对照)。锦橙／红桔组合比国庆1号温州蜜柑／枳组合树势生长强旺，枝条较直立，树冠郁闭；2种组合树体生长势和新梢生长量存在不同的年际间差异特点。2种组合叶片的单叶光合潜力无明显差异，叶绿素a/b值分别存在年际间差异且具有相同的相对大小趋势。锦橙／红桔组合叶片可溶性糖有低于国庆1号温州蜜柑／枳组合的趋势，而淀粉含量有高于国庆1号温州蜜柑／枳组合的趋势；2种组合的3种糖份指标存在年际间差异且分别具有相同的相对高低关系。锦橙／红桔组合叶片N、P含量比国庆1号温州蜜柑／枳组合低，Fe、Ca、K含量和C／N水平比国庆1号温州蜜柑／枳组合高；2种组合的C／N值、N、P、Ca和Fe含量年际间差异特点分别相同，而K含量则具有相反的年际间差异趋势。     

基于SCoT分子标记的黄河鲤抗嗜水气单胞菌不同群体遗传多样性分析

【目的】基于SCoT分子标记探讨黄河鲤遗传多样性与其抗嗜水气单胞菌能力的关系,为黄河鲤的抗病育种提供理论依据。【方法】通过腹腔注射对300尾黄河鲤进行人工感染嗜水气单胞菌,按死亡顺序分为最先死亡群体（FP）、最后死亡群体（LP）和存活群体（SP）,每个群体选取30尾。从80条SCoT引物中筛选出多态性好、重复性高、条带清晰的引物,对3个黄河鲤群体进行多态性扩增,采用PopGene32和Arlequin 3.5计算3个群体的等位基因数（Na）、有效等位基因数（Ne）、Nei’s基因多样性指数（H）及Shannon’s信息指数（I）等遗传参数,基于Nei’s遗传距离（Ds）利用MEGA 7.0中的非加权组平均法（UPGMA）构建系统发育进化树,并以Structure 2.3进行群体间的遗传结构分析。【结果】黄河鲤感染嗜水气单胞菌的死亡率为40.0%。从80条SCoT引物中筛选出18条扩增条带清晰、多态性好的引物,从3个黄河鲤群体中共扩增出103条条带,其中多态性条带97条,占94.17%。3个黄河鲤群体的Na范围为1.7961~1.8155,Ne范围为1.3828~1.4029,H范围为0.2258~0.2467,I范围为0.3453~0.3804;群体间的遗传分化指数（Gst）为0.0972,即90.28%的遗传多样性分布在群体内部。3个黄河鲤群体的遗传分化指数（Fst）为0.1299,属于轻度遗传分化;群体间的Ds分布在0.0248~0.0835,其中FP群体与SP群体的遗传距离最大。基于Ds的UPGMA聚类分析结果显示,FP群体和LP群体聚为一支,SP群体单独聚为一支;遗传结构分析结果表明,3个黄河鲤群体可分为2个亚群［抗病群体（SP）和易感群体（FP和LP）］。可见,通过黄河鲤死亡时间划分的群体与通过聚类分析及遗传结构分析得出的群体基本一致。【结论】黄河鲤抗嗜水气单胞菌的能力随着群体遗传多样性的增大而增强。因此,在黄河鲤抗病品种（系）选育过程中应保证足够的群体数量,在提高生长、营养等经济性状的同时保证一定的基因杂合度。     

向海桑1号遗传背景的AFLP分析

本文利用AFLP(Amp lified Fragm ent Length Polymorph ism)分子标记技术,即扩增片段长度多态性,从DNA分子水平对蒙桑(M orusm ongolica)、白桑(M orus alba)、鲁桑(M orusmulticaulis)等5个包括向海桑1号在内的桑树品种或类型进行了遗传背景分析,构建了其指纹图谱。通过分析表明,向海桑1号与参试的两个蒙桑类型以及1个白桑和鲁桑栽培品种遗传相似系数都低于0.8271,其中向海桑1号与向海桑30号间的遗传相似系数仅为0.5566,遗传关系较远。本研究从基因组DNA分子水平上初步分析向海桑1号的遗传背景,为今后该品种作为育种材料提供了理论依据。