猪链球菌2型的分离鉴定及致病性试验

从济南某猪场急性死亡的病例中,采集猪心血、肺、肝、脾和淋巴结等组织器官,通过病原分离,药敏试验,猪链球菌2型荚膜多糖基因(cps2J)的PCR检测及动物试验分别对其进行病原、药物敏感性、血清型和生物学特性等初步研究。结果表明:分离菌的形态、培养特性及生化特性符合链球菌的特点,cps2J基因PCR扩增均出现长度为675 bp的特异性条带,其核苷酸序列与GenBank中猪链球菌2型参考菌株的cps2J基因序列同源性达98%～100%,由此证明其病原菌为猪链球菌2型。对小鼠的致病性试验表明能100%致死小鼠。     

猪链球菌2型的分离鉴定及致病性试验

从全国部分猪场采集疑似猪链球菌感染病例脑样品20份进行细菌分离,成功分离到10株细菌,通过猪链球菌及血清类型鉴定,最终确定其中一株为2型猪链球菌。应用猪链球菌7种主要毒力因子特异性基因扩增检测方法检测所分离到的2型猪链球菌的毒力因子分布情况,并应用小鼠攻毒试验对其致病性进行观察研究。结果表明:分离的2型猪链球菌具备7种毒力因子;动物试验表明SS2能引起小鼠的急性败血症及脑膜炎;细菌回归试验结果表明,试验组死亡小鼠的脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植,且能分离出攻毒菌。此分离菌株的研究为研制2型猪链球菌病疫苗奠定了基础。     

牛源麦氏弧菌的分离鉴定及进化分析

从肉牛上呼吸道中分离出3株细菌,通过细菌培养、形态观察、生化试验、16S r RNA鉴定及对其系统发育进化分析,结果分离菌株为麦氏弧菌(Vibrio metschnikovii)。药敏试验结果显示,该分离菌株对头孢类药物、左氟沙星等药物敏感,对青霉素、氨苄西林、万古霉素等药物耐药。动物致病性试验显示,接种的小鼠于24 h全部死亡。     

猪链球菌2型的分离鉴定及免疫预防

从某猪场分离到一株细菌，通过培养特性、菌体形态、菌落形态、染色特性、生化试验及血清学试验等一系列的系统鉴定，确定为猪链球菌2型。动物致病性试验表明该菌对小白鼠和仔猪有较强的致病性，引起其死亡。药敏试验证明该菌对青霉素、氯霉素等高度敏感，对头抱拉定、卡那霉素等中度敏感，对痢特灵、氟派酸等不敏感。分离菌制成油佐剂灭活苗能有效的预防该猪场猪群的发病。     

猪链球菌2型山东强毒株的分离鉴定

对某养猪场发生呼吸道感染及神经症状的病猪脑组织进行了病原菌分离,对其优势菌进行菌落形态学观察、生化试验、PCR检测、药敏试验和毒株致病力试验.结果显示,成功分离到1株猪链球菌2型,其含有目前已知的mrp、sly、ef3种毒力基因,该菌株对昆明系小鼠、新西兰白兔具有一定的致病性,动物回归试验证实该菌株对断奶仔猪具有较强的致病性.     

猪链球菌的分离鉴定及药敏试验

昆明市某猪场的仔猪群中发生一起以败血症为主要特征的急性传染病。从该猪场可疑病料中分离出1株猪源致病性链球菌,开展了形态学、培养特性、生化特性、血清学鉴定等试验对其进行了鉴定,并进行了猪链球菌的动物致病性试验和药敏试验,结果表明:此分离菌株为猪链球菌2型;对小鼠有很强的致病性;头孢噻呋、阿莫西林、头孢他啶、氧氟沙星、氨苄青霉素等对分离菌株高敏。     

猪链球菌2型安徽株的分离鉴定与药物敏感试验

2005年8月,安徽某地出现1例猪急性死亡病例,通过对猪病料进行细菌分离、培养以及生化和分子生物学鉴定,确诊为猪链球菌2型感染,分离菌株被命名为SSah0501。动物致病性试验表明,该菌株对小鼠有致病性,但无致死性。药敏试验显示SSah0501对青霉素类药物及头孢类药物敏感,对氨基糖苷类和四环素类药物高度耐药。     

仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

从20多个猪场中采集仔猪腹泻粪便，进行大肠杆菌的分离培养，经接种小白鼠进行致病性鉴定后，共获得276株致病性大肠杆菌；并从水肿病猪的水肿液中分离鉴定出1株猪水肿病致大肠杆菌。对其中112株进行了药敏试验；先锋霉素V的敏感菌株为96.3%，环丙沙星为56.3%，诺氟沙星为50.5%，卡那霉素和庆大霉素均为45.9%。蓖株的耐药率，四环素为96.8%，链霉素为71.8%，复方新诺明为67.5%，随机抽取10株进行了5种微量糖发酵试验；结果均符合大肠杆菌生化特性。此外对广西某猪场分离出的大肠杆菌进行了黏附素抗原鉴定为阴性。     

猪链球菌2型的分离鉴定与药敏试验

从广东省某猪场病猪脑内分离到1株细菌,经培养特性观察、镜检、生化鉴定和PCR检测,结果鉴定为链球菌2型。该菌对阿莫西林、头孢拉定、头孢喹肟、头孢曲松均敏感;对青霉素G、氨苄西林、恩诺沙星、氧氟沙星、阿奇霉素、多西霉素中度敏感;对林可霉素、壮观霉素、链霉素、土霉素、复方新诺明、阿米卡星耐药。     

猪链球菌2型毒力因子研究进展

猪链球茵(SS)病是一种严重危害养猪业的人畜共患病,呈世界性分布.根据荚膜抗原特性的不同,猪链球茵被分为35个血清型(1/2型,1型～34型),其中以猪链球菌2型(SS2)流行最广,毒力最强.SS2主要的毒力因子有溶菌酶释放蛋白、胞外蛋白因子、荚膜抗原、溶血素等.然而,新近发现的一些与SS2致病性相关的基因序列和蛋白片段已经成为当前研究的重点和热点.在基因水平上的新发现主要有orf2毒力因子、89 kb毒力岛、转录调节因子、氨基酸通透酶、ABC转运子及表面锚定蛋白基因、反应调节因子RevS基因、纤连蛋白结合蛋白基因、编码噬茵体的基因序列Ssl和分泌性核酸酶SsnA基因等.蛋白水平上的新发现主要有脂磷壁酸的D-丙氨酰位点、自溶素、精氨酸脱亚氨酸酶系统、浑浊因子,38,45,39,44 ku蛋白,以及一些蛋白酶和纤维蛋白溶血酶原受体等.     

4株猪链球菌的病原生物学特性分析

对4株新分离猪链球菌NJ25、SH29、SH40和RC4726进行病原学特性分析,以评估其对公共卫生的威胁性。利用中国疾病预防控制中心传染病所制定的猪链球菌2型鉴定方案,对4株新分离猪链球菌NJ25、SH29、SH40和RC4726进行毒力相关基因检测、细菌染色体酶切片段多态性分析(PFGE)、多位点序列分型(MLST),并用C57BL/6小鼠作致病性试验。结果显示,NJ25株为ST7序列型,SH29、SH40为ST1序列型,3株菌的基因型均为sly+mrp+ef+;RC4726的7个管家基因座位分别为aroA(18)、cpn60(34)、dpr(24)、gki(12)、mutS(1),recA(1)、thrA(4),是一个新的MLST型,基因型为sly+mrp-ef-。PFGE分析显示NJ25、SH29、SH40与SC84有60%的相似性,RC4726与SC84的相似性仅为20%。用108CFU攻击C57BL/6小鼠,除RC4726外,NJ25、SH29、SH40均能致小鼠发病、死亡。结果表明,NJ25、SH29、SH40可能是高致病性猪链球菌,RC4726是1株非致病性猪链球菌。     

猪链球菌通用及2型TaqMan荧光PCR检测技术建立与应用

在对设计合成的引物和6-carboxy-fluorescein(6-FAM)荧光素标记的TaqMan水解探针进行筛选的基础上,通过反应体系优化,建立了检测猪链球菌通用和2型的2种荧光PCR检测技术,实现了对猪链球菌的快速检测和定型。敏感性、特异性、重复性、感染组织模拟试验及临床样品的检测结果均表明建立的方法快速、特异、灵敏,整个检测过程(包括样品的前处理时间)可在1.5 h内完成,检测培养物和模拟组织样品的灵敏度可达10 CFU～100 CFU。     

猪链球菌2型生物被膜的生物学特性研究

通过细胞培养板法研究了猪链球菌2型生物被膜的生物学特性。结果显示:大部分猪链球菌均具有不同程度形成生物被膜的能力,其中3株(3/15)形成能力较强;猪链球菌生物被膜的成熟约需60 h,培养基中葡萄糖浓度是影响生物被膜形成的重要因素;生物被膜中的多糖含量显著高于浮游菌;氨苄青霉素钠和阿莫西林对这3株猪链球菌生物被膜的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)均高于游离菌约2 500倍;扫描电镜观察发现,生物被膜内猪链球菌彼此黏连,形成致密的三维立体结构。对猪链球菌生物被膜生物学特性的研究为进一步揭示生物被膜的形成机制、耐药机理,以及清除生物被膜等提供理论依据。     

人感染猪链球菌2型的研究进展

猪链球菌2型是一种重要的人畜共患病原菌,可引起人的脑膜炎、败血症等疾病.2005年6月发生的四川疫情是由猪链球菌2型引起的人猪共同感染,流行广,发展快,人猪患病数量多.本文从病原、流行特点、感染途径、临床表现、实验室鉴定(包括培养特性、形态特征、生化特性、血清凝集、毒力基因)等方面做了详细的综述,初步探讨了2型猪链球菌病的防治方法.     

猪链球菌2型HA0609的分离及致病性研究

从江苏省某屠宰场猪的扁桃体中分离到1株细菌,通过培养特性、菌体形态、菌落形态、染色特性、生化试验以及荚膜多糖(cps)基因的PCR检测,确定为猪链球菌2型,命名为HA0609。本试验针对猪链球菌7种主要毒力因子——谷氨酸脱氢酶(gdh)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(epf)、溶血素(sly)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(fpbs)、次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(impdh)及毒力相关序列orf2,进行PCR检测。与已知强毒株比较,该菌株2种主要毒力因子sly和epf均为阴性。动物试验显示HA0609对猪、兔和Balb/c鼠均无致病性。     

猪链球菌2型分离株对野生斑马鱼的致病性

以野生斑马鱼为模式动物,对6株mrp＋epf＋sly＋猪链球菌2型（SS2）分离株进行致病性比较。斑马鱼经腹腔接种不同稀释度的SS2分离株,连续观察5d,Kaplan-Meier生存曲线分析并统计半数致死量（LD50）。结果显示,6个分离株对斑马鱼的LD50在10^5cfu-10^6cfu之间,临床株与非临床株的毒力差异不显著（P〉0.05）。从攻毒后死亡的鱼腹腔和脑可分离到SS2,并伴有腹腔出血及肝、肠、脑部炎性病变。表明SS2可感染斑马鱼,为进一步研究SS2的体内感染机制及毒力因子功能等奠定了基础。     

Presence of the Streptococcus suis suilysin gene and expression of MRP and EF correlates with high virulence in Streptococcus suis type 2 isolates

Nineteen Streptococcus suis type 2 isolates that had been analyzed previously for hemolysin production, ribotype, and virulence in pigs were examined for presence of the gene coding for suilysin by PCR amplification, and southern blot and hybridization techniques. Based on southern blot and hybridization analysis, all isolates tested contained at least a portion of the suilysin gene. PCR amplification of the entire gene resulted in gene fragments from five of the seven highly virulent isolates and none of the moderately virulent or avirulent isolates. Additional PCR analysis showed that mutation or deletions at the 5′ end of the suilysin gene in the less virulent isolates prevented amplification of the sly gene fragment from those isolates. The MRP+ (muramidase-released protein) EF+ (extracellular protein) phenotype was also expressed by the same five highly virulent/sly+ isolates.     

猪链球菌病研究进展

猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人兽共患病病原体,能够引起猪的疫病,人类感染该菌可导致脑膜炎、败血症,甚至死亡.该菌对养猪业造成严重经济影响,对公共卫生事业构成巨大威胁.由于猪链球菌血清型较多,抗原结构复杂,在临床上又可呈现不同的症状,如败血症、脑膜脑炎、心内膜炎、肺炎、化脓性淋巴结炎、关节炎等,还常常与其他疾病发生合并感染.近几年来,该病的发病率和死亡率有逐年上升趋势.链球菌的致病性已引起临床工作者和科研人员的广泛关注和重视,国内外许多学者对猪链球菌做了大量的研究工作,已发现的猪链球菌2型的致病因子包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、细胞外因子、蛋白质片段和IgG结合蛋白、溶血素等.