食线虫真菌蠕虫埃斯特菌对植物寄生线虫的侵染特性

为评价食线虫真菌蠕虫埃斯特菌Esteya vermicola菌株NKF 13222的生防应用价值,采用2%水琼脂培养基平板接种法测定了该菌株对7种植物寄生线虫的诱引、黏附和侵染能力,并比较了其对不同线虫的侵染特性.结果显示,该菌株的菌丝对松材线虫、拟松材线虫、腐烂茎线虫和水稻干尖线虫均有诱引作用,而对南方根结线虫、禾谷孢囊线虫和穿刺短体线虫无诱引作用;菌株的粘性分生孢子对有诱引现象的4种线虫都能黏附,接种24 h后的黏附率达到82%～99%,对无诱引现象的3种线虫不能黏附;粘性分生孢子黏附虫体后对不同线虫的侵染力存在差异,接种7 d后的松材线虫死亡率可达98%,而拟松材线虫、腐烂茎线虫和水稻干尖线虫死亡率分别为43%、35%和9%.表明蠕虫埃斯特菌不仅是松材线虫的强内寄生真菌,而且对其它重要植物寄生线虫也具有一定的应用潜力.     

淡紫拟青霉MCWA18菌株对南方根结线虫的寄生和防治作用

试用双温测定法,室内测定淡紫拟青霉ＭＣＷＡ１８菌株对南方根结线虫卵的寄生效果,测定结果表明,供试菌株对南方根结线虫卵的相对寄生率为９２．６％。在温室盆栽试验中,用剂量为５ｇ／ｍ２和１０ｇ／ｍ２固体菌剂处理,９３日后番茄根围土壤中南方根结线虫二龄幼虫的群体密度比对照分别降低６２．３％和６６．９％,番茄株高分别增加１７．２％和４９．６％,地上部鲜重分别增加１００％和１４５．９％,ＭＣＷＡ１８菌剂防病和促生效果均高于剂量为４．５ｇ／ｍ２益舒宝处理。     

水稻拟禾本科根结线虫生防细菌的分离鉴定与防治效果评价

为获得对水稻拟禾本科根结线虫具有较高杀线虫活性的生防细菌,初筛以马铃薯腐烂茎线虫、复筛以拟禾本科根结线虫2龄幼虫为靶标线虫,采用直接触杀法对土壤分离细菌进行筛选。获得8株具有较高杀线虫活性的菌株,其中D45菌株发酵液的杀虫活性最好。其发酵液上清5倍稀释液处理24、48 h后,马铃薯腐烂茎线虫和拟禾本科根结线虫2龄幼虫的死亡率分别为69.8%、72.1%和60.9%、70.4%。盆栽试验和田间试验表明,在拟禾本科根结线虫侵染前采用D45菌株发酵液进行土壤处理,可显著减少水稻根结数。D45高活性菌株产生的杀线虫物质对蛋白酶稳定,但不耐热和酸。经生理生化测定结合16S rRNA基因序列分析,D45菌株为巨大芽胞杆菌Bacillus megaterium。D45菌株对防治水稻拟禾本科根结线虫具有应用潜力。     

杀线虫植物内生细菌和根际放线菌对根结线虫的防效

为了获得防治植物寄生线虫的微生物菌种资源和防效稳定的生防菌剂,以松材线虫为靶标,采用直接触杀法对植物根际放线菌和内生细菌进行了筛选,通过盆栽试验测定了筛选到的菌株发酵液对根结线虫的防治效果,并将有初步防效的菌株制成固体菌剂,分别测定单菌剂和复合菌剂的防效。共筛选到16株放线菌和4株内生细菌具有杀线虫活性,其中2株放线菌和3株内生细菌的发酵液对根结线虫防效明显;放线菌和内生细菌混合发酵液均保持了对根结线虫的抑制作用,但是放线菌和细菌菌株的固体菌剂混合后对根结线虫的防效低于细菌单菌株的防效。植物内生细菌BCM2和CCM7单菌株的固体菌剂对番茄根结线虫的防效最高,分别达到了83.31%和83.07%。表明高杀线虫活性的植物内生细菌制备的固体菌剂具有应用潜力。     

淡紫拟青霉菌IPC菌株诱变育种方法比较

淡紫拟青霉菌Paecilomyces lilacinus(Thom)Samson是一种重要的根结线虫卵寄生菌,同时是多种昆虫及其他植物寄生线虫的重要天敌,具有极高的应用价值.Jatala等[1]发现该菌对南方根结线虫Meloidogyne incognita的卵寄生率高达60%～70%.作者采用紫外线等方法对淡紫拟青霉菌IPC菌株进行了诱变选育,以便进一步提高其防效及应用价值.     

淡紫拟青霉E7菌株对香蕉根结线虫的致病性和生防效果

测定淡紫拟青霉E7菌株对香蕉根结线虫致病性和生防效果,各处理间差异显著.结果表明,利用不同浓度E7孢子悬浮液侵染香蕉根结线虫卵,处理18 d后含孢子109个/mL的E7孢子悬浮液对卵的相对寄生率为96.5%:利用不同稀释倍数的E7发酵滤液处理2龄幼虫,稀释1.5倍液处理6 d后相对死亡率为98.2%.在温室盆栽试验中.用剂量为20、10和5g/株固体菌剂处理,90 d后香蕉根围土壤中香蕉根结线虫2龄幼虫的群体密度比对照分别降低84.5%、71.1%和66.7%,香蕉根重分别增加27.7%、20.6%和8.4%,株高分别增加17.2%、49.6%和16.9,地上部鲜重分别增加31.9%、23.9%和21.1%.3 g/株阿维地线净处理的虫口减退率为70.7%,与10g/株和5g/株固体菌剂处理效果接近.高剂量的E7菌剂防病和促生效果均高于剂量为3/株阿维地线净处理.     

福建省毛豆根结线虫种类鉴定及初侵染来源

福建省漳州市一基地毛豆(品种:‘毛豆64’)苗期发生严重根结线虫病, 发病株率为78%。为明确其病原的种类及其初侵染来源, 通过形态学、分子生物学方法进行了种类鉴定。研究结果表明, 该线虫雌虫、雄虫、2龄幼虫(J2)的形态学特征与测量值和拟禾本科根结线虫Meloidogyne graminicola相吻合;基于线虫rDNA-ITS序列和28S rDNA D2D3序列构建的系统发育树进一步确定其为拟禾本科根结线虫;室内接种试验确定了其致病性。这是首次在福建省毛豆上发现拟禾本科根结线虫。在毛豆基地畦地残留的前作水稻稻茬根内和根际土壤中均分离到大量J2s, 经特异性引物扩增确定为拟禾本科根结线虫, 研究认为前作水稻根系受拟禾本科根结线虫侵染, 在灌溉淹水状态下线虫2龄幼虫和卵在根内与土壤中长期存活, 成为轮作毛豆根结线虫病的初侵染源。     

一种防治线虫的真菌——淡紫色拟青霉

淡紫色拟青霉(Paecilomyces lilac-inus)是土壤兼生腐生菌,广泛存在于世界各地土壤中。此菌对线虫的寄生性是秘鲁国际马铃薯研究中心P.Jatava博士首次从南方根结线虫的卵中分离证实的,于1979年首次作了该菌寄生线虫的报道,之后许多国     

淡紫紫孢菌YES和粉红螺旋聚孢霉67-1组合对黄瓜根结线虫病的防效评价

为了提高生防菌的防病效果及其稳定性,本研究以黄瓜根结线虫病为靶标病害,对淡紫紫孢菌(原名为淡紫拟青霉)YES与粉红螺旋聚孢霉67-1混和使用的防病效果进行了评价。平板对峙实验表明两菌株相容性较好,在马铃薯和黄瓜根际分泌物培养基上无拮抗作用;通过测定两菌株对根结线虫的卵寄生性及其无菌发酵滤液对2龄幼虫致死作用,确定YES菌株孢子悬浮液(2×106孢子/m L)对根结线虫的卵寄生作用(51.0%)显著高于菌株67-1(44.0%);而菌株67-1代谢产物48 h后对根结线虫2龄幼虫的致死率(100%)高于菌株YES(77.4%)。土壤中2龄幼虫接种量为1000线虫/100 g土时,将菌剂YES和67-1单独或混和加入育苗基质中(终浓度为106孢子/g基质)并在移栽时穴施50 g菌剂(106孢子/g),结果表明两菌株单独使用和混和使用的防治效果接近,在20%~30%左右;根据blissing independence模型,两菌株之间表现为拮抗作用。土壤中线虫卵密度为398卵/100 g干土时,菌剂YES和67-1混和使用可显著抑制黄瓜根系上根结的形成,防病效果为63.7%,显著高于两菌剂单独使用的防效33.0%和41.3%。两菌株之间表现为累加效应。上述结果表明,两个主要作用机理不同的生防菌混和使用可以延缓根结线虫的侵染,提高防病效果。但土壤中线虫虫态和密度影响依据blissing independence模型判定生防菌之间的相容性。该结果对杀线虫复合生防菌剂的研制及使用技术改进具借鉴意义。     

拟青霉云南菌株的杀线虫作用

测定了来自云南部分地区的拟青霉36株菌株对全齿复活线虫的杀虫作用。结果表明，除已知种淡紫拟青霉对线虫有毒杀作用外，拟青霉属中其余菌株对线虫也有一定的杀虫作用。其中，采自昆明西山的环链拟青霉．11号菌株对线虫有很强的降解作用，在CMV和沙氏培养基上，24h对线虫的致死率分别为68．7％和90．8％；一株待定种A-43-1菌株对线虫有很强的致死作用，在CMA培养基上，24h对线虫的致死率达94．7％，并且其分泌的红色素能被线虫吸收，使虫体变红。     

淡紫紫孢菌防治采后番茄果实灰霉病

本文通过孢子萌发检测、平板生长抑制法和果实病害防治试验,测定了淡紫紫孢菌Purpureocillium lilacinus PL36-1防治储藏期番茄果实灰霉病的效果。结果表明,菌株PL36-1发酵滤液不仅能够抑制灰葡萄孢分生孢子萌发和芽管伸长,而且可以抑制灰葡萄孢菌丝生长。对峙培养的菌株PL36-1显著抑制灰葡萄孢的菌丝生长,菌丝生长抑制率可达到74.45%,菌株PL36-1产生的挥发性物质也对灰葡萄孢菌丝生长有一定的抑制作用。菌株PL36-1发酵液处理樱桃番茄果实后,能有效控制番茄果实灰霉病的发生,含有2×10~8孢子/m L的发酵液10 d的防治效果达70.64%。     

淡紫拟青霉36-1耐药性测定

本试验测定了淡紫拟青霉36-1对常用5种杀菌剂和2种杀虫剂的耐药性。研究表明:多菌灵、百菌清对淡紫拟青霉36-1抑制作用很强,辛硫磷和阿维菌素则比较弱。本文还确定了各药剂最低抑制浓度。     

自然寄生红火蚁病原真菌的分离、鉴定及其对红火蚁的致病力

对采自广州番禺区、南沙区,惠州和深圳市等地的红火蚁Solenopsis invicta虫体进行病原菌的分离与鉴定。致病力测定发现分离物PL对红火蚁有一定致病作用。采用单孢分离法获得PL菌株,形态学鉴定该菌株为淡紫拟青霉Paecilomyces liacinus。对PL菌株的10个分离株PL01~10进行致病力测定,结果表明,经1×108孢子/ml的浓度处理后第15d,菌株PL04处理的红火蚁累计死亡率最高,为70.60%。     

两种拟青霉菌提取物对菜蚜的控制作用

浸叶法毒力测定结果表明,淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)菌株MCWA18和拟青霉(Paecilomycessp.)菌株X1甲醇萃取物对萝卜蚜无翅成蚜48 h后LC50分别为0.3435 mg/mL和0.8309 mg/mL。网室盆栽试验,菌株MCWA18和X1甲醇萃取物2.5 mg/mL处理7 d后对菜蚜的防治效果分别为92.24%和87.06%,田间小区试验处理后7 d,防治效果分别为81.82%和81.70%,相当于1.3%鱼藤氰乳油500倍的防效。     

4种生物源杀线剂对番茄根结线虫的田间防效

为减少化学农药的施用量, 筛选出高效生物杀线剂, 选用0.3%苦参碱水剂?1.8%阿维菌素乳油?2亿孢子/g淡紫拟青霉粉剂和2.5亿孢子/g厚孢轮枝菌微粒剂4种生物杀线剂进行田间药效试验?结果表明, 0.3%苦参碱AS?1.8%阿维菌素EC?淡紫拟青霉DP和厚孢轮枝菌MG对番茄根结线虫病的防效分别为64.0%?44.0%?44.0%和32.0%, 增产率分别为92.6%, 53.1%, 15.9%和-0.1%?苦参碱对番茄根结线虫病的防效明显高于对照10%噻唑膦GR和其他生物杀线剂, 可以更好地抑制番茄根部根结的形成, 控制土壤中2龄幼虫的数量, 促进植株生长, 适合在生产上推广应用, 促进设施蔬菜的可持续安全高产和稳产?     

淡紫拟青霉的培养和对南方根结线虫的防治试验

初步筛选出椰子汁及麦麸为大量繁殖淡紫拟青霉的最适培养基质。室内测定这种真菌对番茄南方根结线虫早期发育阶段卵的寄生率为54％。在室温移栽时,用4克和8克稻谷培养的菌剂处理,50天后线虫卵寄生率分别是35.3％和41.2％。蔬菜塑料大棚小区处理结果表明,移栽前一个月施用这种菌的麦麸加沙培养物,番茄植株平均高度比对照高4～5cm,花果数增加,根结根数和幼虫数量仅为对照的1/3到1/4。     

5种生物制剂对设施蔬菜根结线虫防治技术研究

蔬菜根结线虫已成为内蒙古赤峰市设施蔬菜园区的主要病害,对黄瓜和番茄造成严重的产量损失,为了筛选高效、安全的生物杀菌剂,2011-2012年在赤峰市松山区设施蔬菜园区进行了5种不同生物杀菌剂对设施黄瓜和番茄根结线虫防治的田间试验,在黄瓜和番茄定植时用100亿cfu/g厚孢轮枝菌粉剂0.2kg/667m2撒施,2%阿维菌素+多聚糖乳油3 000倍稀释液灌根处理,0.2亿cfu/g淡紫拟青霉颗粒剂5kg/667m2撒施,10亿cfu/mL蜡质芽胞杆菌水剂6L/667m2灌根,1.8%阿维菌素乳油500倍稀释液灌根,设4次重复,并设空白对照。定植20d后再用同样的浓度和方法处理一次,结果表明:5种生物杀菌剂对黄瓜和番茄根结线虫的防治效果为20%~60%,10亿cfu/mL蜡质芽胞杆菌水剂效果最好,达到56.3%,同时可以提高黄瓜和番茄的商品性,适于在设施蔬菜上推广使用。     

大丽轮枝菌果胶裂解酶PL1家族基因VdPL1-4的致病功能研究

大丽轮枝菌Verticillium dahliae引起的黄萎病是一种传播迅速且为害广泛的土传维管束真菌病害。大丽轮枝菌分泌的水解酶在侵染中发挥重要作用,尤其是纤维素酶和果胶酶。大丽轮枝菌果胶裂解酶包括PL1、PL3、PL4、PL9和PL11 5个家族,其中PL1家族成员数目最多,但对该家族的致病功能还未见系统研究。本研究明确大丽轮枝菌PL1家族共包含17个成员,且多数成员在侵染早期上调表达,其中VdPL1-4和VdPL1-8在侵染早期强烈诱导表达。挑选VdPL1-4构建缺失突变体,发现VdPL1-4缺失后菌株对棉花的致病力显著下降,对复杂碳源(果胶、羧甲基纤维素、淀粉)的利用能力受限,该基因回补后菌株的毒力和碳源利用能力均得以恢复。信号肽介导的分泌活性验证表明VdPL1-4为分泌蛋白。以上研究表明,VdPL1-4是重要毒力因子,研究结果为后续系统解析果胶裂解酶在病原致病过程中发挥的作用提供了理论依据。     

禾谷丝核菌对井冈霉素的抗性风险预测

采用菌丝生长速率法,测定了4个麦区的5个禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis菌株对井冈霉素的抗药性;在含井冈霉素的PDA平板培养基上对禾谷丝核菌进行继代培养,以诱导抗药性菌系;测定了抗性菌系对其他杀菌剂的交互抗性,并比较了抗性和敏感菌系对渗透压的敏感性及药剂处理后两种菌系培养液内还原糖和可溶性蛋白的含量差异。结果表明,田间禾谷丝核菌菌株对井冈霉素分别产生了7.26、7.75、10.46、14.92和23.31倍的抗性。室内继代培养36代,禾谷丝核菌对井冈霉素的抗性达49.24倍,形成了抗井冈霉素菌系。抗井冈霉素菌系对 口 恶 醚唑、福美双、三唑酮、丙环唑、戊唑醇和咯菌腈分别产生了48.58、21.78、17.62、10.95、2.55和1.78倍的交互抗性。抗性菌系在较低和较高渗透压下其生长抑制率均大于敏感菌系,用井冈霉素处理抗性和敏感菌系后,其体内的电解质都严重外渗,且抗性菌系在10 h 内的外渗量明显大于敏感菌系。