间接血凝(IHA)间接免疫荧光(IFAT)与酶联免疫吸附测定法(ELISA)对猪肉孢子虫的检验

3,2与2头猪,分别感染猪肉孢子虫的孢子囊40,000,80,000与120,000个;另1头猪感染猪人肉孢子虫的孢子囊50,000个。152天后,用IFAT,ELISA与IHA各方法进行了特异性抗体的检查与83天内抗体形成的研究。在感染后14天第一次检查,又在21天与28天分别以IHA,ELISA与IFAT方法检查结果:抗体的最高滴度分别在感染后的     

猪流感(H3N2亚型)油乳剂灭活疫苗的免疫及攻毒试验

用不同剂量的猪流感H3N2亚型油乳剂灭活疫苗免疫15头断奶仔猪,每组5头,四周后二免。另外3头为非免疫攻毒对照组。首免后第10周用同源病毒攻毒,分别在免疫前及免疫后2、3、4、6、8、10、11周采血,分离血清,用HI试验检测其抗体滴度。攻毒后通过免疫猪和非免疫攻毒对照猪临床、病理变化及病毒分离等方面的比较,评价疫苗的保护效果。结果中、高剂量组的抗体滴度明显高于低剂量组;免疫组和对照组攻毒前后体温无显著差异(P>0.05),免疫组病理保护明显好于非免疫攻毒对照组;鼻液和肺中的病毒分离率比较,免疫组明显低于非免疫攻毒对照组。本研究表明,用该疫苗免疫后猪对同亚型的病毒攻击有一定的保护作用。     

舍饲猪预防猪丹毒的气雾免疫

59头猪在120立方米的猪舍中,用猪丹毒活菌苗以每立方米1.38个感染量的菌苗稀释为200毫升进行气雾免疫,并停留30分钟,在免疫后第10、17或24天用9×10~8强菌攻毒,获得97％的免疫效果。每立方米0.8感染量气雾免疫的98头猪,获得95％的免疫效力,每立方米0.4感染量气免的58头猪有72.4％的保护力。中间试验对1,800头猪以每立     

使用猪三联苗的防疫效果观察及对猪瘟免疫期抗体效价测定

猪三联苗免疫51—60日龄断奶前仔猪对猪瘟免疫期试验,是用人工接种猪瘟强毒致病的猪与试验猪、对照猪一起同圈感染,其结果免疫51日龄仔猪经7.5个月100%保护;免疫60日龄仔猪经6个月75%保护;另一组免疫60日龄仔猪经9个月,感染观察22天均健活,用猪瘟毒1毫升肌注后,对照猪于15天死亡,免疫猪100%保护。免疫猪与对照猪在攻毒前采取血清,用中和反应测定猪瘟免疫抗体及其效价的结果,共测14头中有5头猪血清中无中和抗体,家兔体温呈现热反应(其中对照猪3头均死亡,另2头免疫猪死亡一头,感染发病耐过1头),另9头免疫猪血清有中和抗体,试验兔无体温反应,攻猪瘟毒后均健活。被检血清中和效价一般在4—32倍之间。免疫7.5个月组的猪中和效价个别达到128倍,免疫9个月组的猪也有达到64倍的。田间试验免疫15,225头,其中发生反应17头,占11/千,死亡3头,占2/万,留养观察6236头,发病率9.64%,死亡率1.59%,没有猪瘟、猪丹毒病的发生。     

猪肺炎支原体与猪支气管败血波氏杆菌在猪体液免疫和生长性能上的协同作用

试验选用10日龄成华×大约克杂交猪36头,随机分成四组(1、2、3、4),每组9头.其中1、2组用猪肺炎支原体全菌抗原免疫后再分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒,3、4组注射生理盐水作为对照,并与前两组同时分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒.采用间接ELISA、组织切片等方法对猪血清中的抗体水平、肺脏的病理变化及生长性能进行测定.试验表明:用猪肺炎支原体全菌抗原接种猪后,在血清中能检测到较高的抗体水平(25).猪肺炎支原体攻毒后2周,免疫猪和对照猪血清中猪肺炎支原体抗体的滴度分别为23.8与22.4(P＜0.05),且免疫猪的生长性能比对照猪好.在猪支气管败血波氏杆菌攻毒组,攻毒2周和4周后免疫猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体水平与对照猪相比分别提高了26.67%和30.00%(P＞0.05),6周后免疫猪和对照猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体分别为21.7和20.3(P＜0.05),且在攻毒后4～6周,免疫猪的生长性能有了显著的改善.组织切片显示,无论是用猪肺炎支原体攻毒还是用猪支气管败血波氏杆菌攻毒,免疫猪的肺脏病变程度都较对照猪轻.     

嵌合型猪圆环病毒（PCV1—2）及PCV2 ORF2真核表达质粒对商品猪的免疫保护

应用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒（PCV1—2）及真核表达质粒pcDNA3．1／V5-His-ORF2作为免疫原免疫母源抗体ELISA效价在0．07～0．60不等的商品猪,9头猪随机分为4组,1组（3头）肌肉注射免疫10^3.5 TCID50的PCV1-2／头,2组（2头）肌肉注射真核表达质粒200μg／头,3组（2头）肌肉注射空载体（pcDNA3．1）200μg／头,4组（2头）不免疫作为攻毒对照组。于免疫后42d,PCV1—2组及真核表达质粒组产生了PCV2抗体。免疫后42d所有组攻毒PCV2和PRRSV,剂量分别为2×10^4.5 TCID50／头和10^6 TCID50／头。攻毒后21d,攻毒对照组猪淋巴结比免疫组显著肿大,免疫组猪血清、淋巴结中PCV2病毒栽量低于对照组,攻毒对照组猪淋巴结中PCV2抗原含量高于免疫组。这些结果表明,嵌合型PCV1-2及真核表达质粒肌肉注射免疫商品猪后,对PCV2感染能产生保护性免疫应答,有可能成为候选疫苗。     

猪流行性腹泻病毒(PEDV)XJ-DB2株对25日龄仔猪毒力试验

用生理盐水将猪流行性腹泻病毒细胞分离毒株XJ-DB2株稀释成含10~4、10~5和10~6 TCID_(50)(病毒半数细胞感染量)3个剂量组。将16头25日龄健康易感仔猪随机分成4组,每组4头。前3组分别口服1 mL含有10~4、10~5 TCID_(50)和10~6TCID_(50)PEDV XJ-DB2株病毒液作为攻毒组,最后1组作为阴性对照口服同等量的生理盐水。相同条件下隔离饲喂,连续观察7 d,攻毒组全部出现猪流行性腹泻临床症状,对照组则无任何临床症状。第7天全部剖杀,观察肠组织病理变化。剖检结果显示:10~4TCID_(50)剂量组中有3头猪肠组织均有明显病变(肠壁变薄、臌气,肠内充满黄色液体)而另外1头猪肠组织无明显病变;10~5 TCID_(50)和10~6 TCID_(50)两个剂量组8头仔猪肠组织均出现明显病变;阴性对照组4头仔,猪肠组织均无病变。由此判断XJ-DB2株为PEDV强毒株,以10~4 TCID_(50)剂量口服可以致25日龄仔猪发病。     

日本猪肉孢子虫感染与发病率

据Saito,M.等报道,1983年3月至1984年3月检查日本琦玉地区屠宰的肥育猪100头和老龄汰淘品种猪200头,结果后者有17头(8.5％)感染猪肉孢子虫,而前者未发现感染。猪肉孢子虫包囊平均为393.4×126.5微米,缓殖子为15.49×3.92微米,囊壁有放射状条纹,其厚度为4.48微米。经在5℃冷藏的感染肉试验,潜伏期9—10天,开放期为50—83天。在5℃冷藏肌肉中的肉孢子虫囊存活期为30天,孢子囊平均12.0×9.4微     

口蹄疫紧急疫苗研究进展(续完)

3.4猪 采用ISA 206与25油佐剂配方,以C1Ober-bayern疫苗对28头猪进行免疫,4～21 d间攻毒,均可产生保护性,而3头对照均在攻毒后4 d产生临床症状[14].     

猪细小病毒S—1毒株的分离和鉴定(二)

S一1毒株在猪肾原代细胞第1～10代之间共进行36次传代,培养物的平均HA价>384,第6代以后对细胞的最小感染量稳定在10~(-6)～10~(-7)之间,第5代PK细胞传代毒在-25℃～-30℃保存180天毒价保持10~(-5)不变,死产胎猪组织(S—1毒株分离猪)在用同样温度保存300天能重复分离到病毒,S—1毒株PK传代毒能适应于胎猪睾丸细胞株(ST)增殖,毒价达1O~(-7),以比利时荧光抗体柒色ST细胞培养物和用比利时PPV阳性血清对ST细胞传代毒作HI测定,进一步证实分离物的特异性。用PK细胞传代毒感染HI抗体阴性怀孕头胎母猪能产生明显的抗体反应。3头感染母猪中,1头(用口服途径攻毒)在感染后2～4天间出现排毒现象;从另一头母猪(用肌肉注射途径攻毒)的胎儿中分离到病毒,证实经胎盘感染的发生。     

育成猪肉孢子虫病的治疗

10头猪分组接种猪犬肉孢子虫(Sarcocystis Suicanis)2×10~6个孢子囊,然后进行治疗。用Salinomycin(4mg/kg每日1次,共用30天)与/或乙酰水杨酸(30mg/kg,每日1次,共用30天)。治疗结果:单用一种药的均无死亡;两种药合用的有一猪急性发病死亡。治疗中,所有的感染猪均发病,其中单用Salinomycin治疗的猪比其他猪能耐受感染,用乙酰水杨酸治疗的猪与Salinomycin混合乙酰水杨酸治疗的猪均差于单用Salinomycin治疗的猪与未感染的对照猪。     

嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)及PCV2 ORF2真核表达质粒对商品猪的免疫保护

应用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)及真核表达质粒pcDNA3.1/V5-His-ORF2作为免疫原免疫母源抗体ELISA效价在0.07～0.60不等的商品猪,9头猪随机分为4组,1组(3头)肌肉注射免疫103.5TCID50的PCV1-2/头,2组(2头)肌肉注射真核表达质粒200μg/头,3组(2头)肌肉注射空载体(pcDNA3.1)200 μg/头,4组(2头)不免疫作为攻毒对照组.于免疫后42 d,PCV1-2组及真核表达质粒组产生了PCV2抗体.免疫后42 d所有组攻毒PCV2和PRRSV,剂量分别为2×104.5TCID50/头和106TCID50/头.攻毒后21 d,攻毒对照组猪淋巴结比免疫组显著肿大,免疫组猪血清、淋巴结中PCV2病毒载量低于对照组,攻毒对照组猪淋巴结中PCV2抗原含量高于免疫组.这些结果表明,嵌合型PCV1-2及真核表达质粒肌肉注射免疫商品猪后,对PCV2感染能产生保护性免疫应答,有可能成为候选疫苗.     

3ABC-ELISA检测口蹄疫野毒抗体时效性研究

为了验证3ABC-ELISA检测口蹄疫野毒感染抗体的时效性,用口蹄疫OZK/93、O/(XJ/10-11/MYA/98)病毒分别对3ABC-ELISA检测阴性的60头临床健康免疫猪和4头未免疫临床健康对照猪经肌肉注射接种.接种病毒第6天,对照猪全部发病,实验猪6头发病,其中对照猪3ABC-ELISA抗体全部为阴性,实验发病猪3ABC-ELISA抗体阳性1头,54头未发病猪3ABC-ELISA抗体阳性14头.试验结果表明,3ABC-ELISA检测口蹄疫野毒抗体具有时效性,建议在口蹄疫疑似病例确诊中优先采用病原学检测方法进行确诊,3ABC-ELISA检测方法可以用作野毒感染的追溯性调查.     

3种非猪瘟病毒单独或混合感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效力的影响

将 2 0头 9月龄左右猪瘟、伪狂犬、猪繁殖与呼吸障碍综合征抗原、抗体阴性猪分成 6组 ,分别利用猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒 (PRV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 (PRRSV)单独或混合感染。 7d后连同对照猪 4头 ,免疫接种猪瘟兔化弱毒疫苗 (HCL V) ,13d后连同 4头阴性对照猪一起攻击猪瘟石门强毒。整个试验期间分别每天测温 ,观察临床症状 ,每周采集扁桃体和血样做各种病毒抗原及抗体检测。结果表明 ,非猪瘟病毒感染 7d后 ,所有各组猪均从体内检测到了相应感染的病原 ,表明 3种非猪瘟病毒感染成功。在攻击猪瘟石门强毒后 2周 ,感染了非猪瘟病毒后接种 HCL V疫苗的 4个免疫组 12头猪除 1头外 ,11头全为猪瘟病毒 (HCV)抗原检测阳性 ,且多呈强阳性 ;而单一 HCL V疫苗免疫组在猪瘟强毒攻击后检测不到 HCV;所有 HCL V疫苗免疫猪均存活 ,而非免疫对照组 4头猪全部在攻毒 16 d内死亡。     

大肠杆菌热敏肠毒素对家兔和猪的免疫试验

用一株猪源产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的全细胞培养物加多粘菌素B制备的热敏肠毒素(LT),在4℃下保存期可达218天以上,用LT抗原加佐剂制苗,免疫家兔,其血清琼扩抗体效价可达8～32倍。以2～16倍同源菌株的LT作兔肠结扎攻毒试验,免疫兔肠道液体分泌量降低50％以上。用LT氢氧化铝苗免疫孕猪后,经临床观察其对仔猪的保护率为65.9％(P<0.01)。用琼扩法测母猪的初乳抗体,免疫组14头猜中有10头初乳抗体阳性,对照猪16头,有5头阳性.     

猪瘟疫苗免疫哺乳前仔猪的效果观察

用邹县某猪场3头健康母猪同日所生仔猪23头,出生后立即肌肉注射1头份/头猪瘟兔化弱毒疫苗、注射后60～120分钟让仔猪吃初乳。于免疫后10、30日及2、3、4、5、6、7及8个月分别用免疫扩散法监测猪瘟抗体效价。当免疫猪266日龄时,从23头猪中任选4头,经肌肉攻击经复壮后的猪瘟血毒lml/头。结果,免疫后10天,抗体未阳转,30天时,19/23阳性,2月龄以后至8个月,抗体均23/23阳性,266日龄攻毒4/4保护(对照3/3死亡)。说明该免疫程序是可靠的,能够控制猪瘟的发生。哺乳前免疫需要饲养人员与兽医密切配合,这一工作最好在母猪     

不同厂家猪肺炎支原体灭活疫苗免疫效力对比实验

本研究旨在评价不同厂家猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫攻毒保护效果。选择4周龄仔猪25头,随机分为5组,每组5头猪,分别免疫四种猪肺炎支原体灭活疫苗（即疫苗A组、疫苗B组、疫苗C组、疫苗D组）,E组为攻毒对照组,不做任何处理,在同等条件下隔离饲养。各疫苗按照对应的说明书进行免疫,免疫后第14、28天进行采血,检测支原体抗体水平,一免后28 d时,所有免疫组连同攻毒对照组,各气管注射猪肺炎支原体CJ株5 m L/头（含0.01 g肺组织毒）。攻毒后饲养观察28 d,对所有实验组动物进行观察临床症状。A组实验动物攻毒后未出现咳嗽、腹式呼吸等支原体临床症状,B-D组实验猪攻毒后偶尔出现轻微间隔性咳嗽,E组实验动物攻毒后出现连续性咳嗽,个别猪出现腹式呼吸等临床症状。攻毒后第28天进行病理剖检。结果表明,攻毒对照组猪4/5头出现典型猪肺炎支原体病变,在肺脏尖叶、心叶、膈叶前1/3部位以及中间叶,出现“肉样”或“胰样”实质样病变,界限明显。B～D组解剖后个别猪出现典型猪肺炎支原体病变,A组实验动物解剖后个别猪肺脏出现零星病变,剩余实验动物肺脏均未出现猪肺炎支原体病变。根据肺部病变较少率计算,A～D组病变...     

不同猪瘟疫苗对18周龄猪群预防野毒攻击的疫苗效果对比研究

目的:探讨不同种类的猪瘟疫苗针对18周龄猪群在野毒攻击中的预防效果观察。方法:随机选取30头不患有蓝耳病的仔猪,并将其分成3组,对照组中的仔猪不接种任何疫苗,C1和C2为观察组,其中C1在仔猪为3周龄时接种4种不同的免疫疫苗,C2在仔猪为5周龄时接种4种不同的免疫疫苗,在仔猪达到18周龄时,给每头仔猪注射猪瘟野毒,并在攻毒0,8,15天时采集这三组仔猪的血样进行CME检测。结果:对照组中的仔猪在攻毒为8至11天时全部死亡,在C1组中有5头仔猪在攻毒11至36天时,C2组在攻毒36天之内都没有出现死亡的现象。结论:不同种类的猪瘟疫苗针对18周龄猪群在野毒攻击中的预防作用在细胞免疫应答方面都有着不同的免疫效果。     

猪支原体肺炎活疫苗经肌肉注射的免疫效果评价

猪支原体肺炎活疫苗(168株)是一种以肺内注射途径免疫的弱毒活疫苗。为了拓展猪支原体肺炎活疫苗的免疫途径,评估猪支原体肺炎活疫苗(168株)配合佐剂以肌肉注射方式免疫猪群后的攻毒保护效果,选取20头7日龄猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)阴性仔猪,将其随机平均分成4组,分别为健康对照组、感染对照组、肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组。在免疫后采集血样并检测其中的Mhp IgG抗体,在首次免疫后42 d人工感染Mhp组织毒(JS株),攻毒28 d后评估肺脏的病变情况并测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的Mhp含量。结果显示：免疫后肌肉注射免疫组动物产生了明显的Mhp特异性血清IgG抗体,而肺内注射免疫组动物在攻毒前未见明显的血清抗体;肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组的攻毒保护率分别平均为88.89%和75.93%,且组间无显著性差异;感染对照组的BALF中Mhp单位含量极显著高于肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组(P<0.01),2个免疫组间无显著性差异。结果表明：猪支原体活疫苗配合佐剂后经肌肉注射免疫可产生较好的免疫攻毒保护效果。本研究为猪支原体肺炎活...     

用猪带绦虫培养抗原对猪的免疫

用体外培养六钩蚴获得的分泌排泄抗原,免疫8头实验室繁殖的15日龄猪,来防治猪带绦虫感染,另8头未免疫猪作对照。免疫后30天,将两组猪都口服15000个虫卵攻击。12周后将全部猪剖杀,进行详细检查。与对照猪相比,免疫猪的感染率比对照猪降低了94.9%,免疫猪的囊虫数量的减少是保护力